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        1. 上海一基實業(yè)有限公司
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          大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒使用說明書

          時間:2011/4/13閱讀:1800
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          上海一基實業(yè)有限公司是一家集經(jīng)銷批發(fā)、招商代理的有限責(zé)任公司,是一家經(jīng)國家相關(guān)部門批準(zhǔn)注冊的企業(yè)。主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、生物試劑、培養(yǎng)基、等產(chǎn)品,具體請.
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          本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

           
          本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠組織多肽抗原(TPA單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠組織多肽抗原(TPA濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠組織多肽抗原(TPA含量。

          10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
          11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
          12、計算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
          【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒樣本要求】
          1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
          2、標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
          3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。
          【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒注意事項】
          1、實驗嚴(yán)格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
          2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
          3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
          4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
          5、本試劑盒定量范圍為3.75-120 U/L,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(3.75-120 U/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
          6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。
          7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。
          8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。
          9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
           
          【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒操作程序總結(jié)】
           
          準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
           

           
          加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘
           
          洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
           
          洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘
           
          加入終止液
           
          15分鐘之內(nèi)讀OD值
           
          計算
           
          【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒檢測范圍
          3.75 U/L - 120 U/L
          【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒規(guī)格】
          96人份/盒
          【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒貯藏】
          2-8,避光防潮保存。
          【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒有效期】
          6個月

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