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目視和光電比色法兩種常用的比色法詳解
常用的比色法有兩種:目視比色法和光電比色法。
一、目視比色法
常用的目視比色法是標準系列法，該法采用一組由質料*相同的玻璃制成的直徑相等、體積相同的比色管，按順序加入不同量的待測組分標準溶液，再分別加入等量的顯色劑及其他輔助試劑，然后稀釋至一定體積，使之成為顏色逐漸遞變的標準色階。再取一定量的待測組分溶液于一支比色管中，用同樣方法顯色，再稀釋至相同體積，將此樣品顯色溶液與標準色階的各比色管進行比較，找出顏色深度接近于樣品顯色溶液的那支標準比色管，如果樣品溶液的顏色介于兩支相鄰標準比色管顏色之間，則樣品溶液濃度應為兩標準比色管溶液濃度的平均值。標準系列法的主要優(yōu)點是設備簡單和操作簡便，但眼睛觀察存在主觀誤差，準確度較低。
二、光電比色法
光電比色法是在光電比色計上測量一系列標準溶液的吸光度，將吸光度對濃度作圖，繪制工作曲線，然后根據(jù)待測組分溶液的吸光度在工作曲線上查得其濃度或含量。光電比色計通常由光源(鎢燈)、濾光片、吸收池、接收器(光電池或光電管)、檢流計五部分組成。光路結構上有單光電池式和雙光電池式兩種:單光電池式儀器的測量結果受光源強度變化影響較大，而雙光電池式儀器則避免了這種影響。與目視比色法相比,光電比色法消除了主觀誤差,提高了測量準確度，而且可以通過選擇濾光片和參比溶液來消除干擾，從而提高了選擇性。光電比色計和紫外-可見分光光度計的光路結構非常相似，它們之間所不同的地方在于:①分光光度計采用棱鏡或光柵作色散元件，因而可以得到純度較高的單色光束。而光電比色計采用濾光片，只能得到一定波長范圍的光譜帶(復合光);②紫外-可見分光光度計采用紫外和可見區(qū)的光源，即氫燈和鎢燈，而光電比色計只用一種鎢燈光源，因而前者適用于紫外-可見光譜區(qū)，而后者只適用于可見光譜區(qū);③紫外-可見分光光度計可以測定待測組分的精細吸收光譜，不僅可用于定量分析，而且可以作有機化合物的定性和結構分析，而光電比色計只能作定量分析。此外，分光光度計一般都采用靈敏度高的光電倍增管作檢測器，而光電比色計一般用光電池或光電管作檢測器。因此，光電比色計無論在測量的準確度、靈敏度和應用范圍上都不如紫外-可見分光光度計。