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          恒遠文獻:大鼠(IL-2),(IL-6),(IL-10)在文獻中的應用

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          青藤堿對肝細胞癌模型大鼠肝移植術后免疫應答的影響*

          王欣玲 1 羅 霞 1 孫建琴 1 鄒 艷 1 陳德森 2△

          (1.湖北省十堰市太和醫(yī)院,湖北醫(yī)藥學院附屬醫(yī)院,湖北 十堰 442000;

          2.湖北醫(yī)藥學院機能實驗室,湖北 十堰 442000)

          中圖分類號:R285.5 文獻標志碼:A 文章編號:1004-745X(2017)02-0222-04doi:10.3969/j.issn.1004-745X.2017.02.011

          【摘要】 目的 建立大鼠肝細胞癌(HCC)模型,觀察青藤堿對肝細胞癌大鼠肝移植術后免疫應答的影響。方法將 60 只雄性 Lewis 大鼠用二乙基亞硝胺灌胃 14 周的方法建立大鼠肝細胞癌模型,成模后將用 DA 大鼠作為供體進行肝臟移植,術后隨機分為模型組、青藤堿組。 青藤堿組用青藤堿[2.0 mg/(kg·d)]灌胃,模型組灌等體積 0.9%氯化鈉注射液。 采用 ELISA 法檢測第 1、2、3、4 周肝臟組織中白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、轉化生長因子-β1(TGF-β1)及趨化因子-10(IP-10);采用流式細胞儀檢測靜脈血 T 細胞(Treg)、CD4+ T、CD8+ T 等占 T 淋巴細胞的百分比。 結果 青藤堿組在第 3 周和第4 周時,肝臟組織中 IL-2、IL-6,靜脈血 Treg%、CD4+T %明顯降低,第 4 周時 TNF-α、TGF-β1 和 IP-10 明顯降低,與模型組比較(P < 0.05),且以上各指標在 4 周時的檢測值與同組 1、2、3 周時比較,差異有統(tǒng)計意義(P <0.05)。 結論 青藤堿可抑制肝細胞癌大鼠肝移植術后細胞免疫。

          【關鍵詞】 大鼠 青藤堿 肝細胞癌 肝臟移植 細胞免疫 免疫應答肝細胞癌占原發(fā)性肝癌的 75%~80%[1]。 WHO 統(tǒng)計顯示,這各病理類型的肝癌患者死亡率高、預后差,占所有惡性腫瘤死亡率的第 2 位, 且一半以上的肝癌發(fā)生在我國[2]。 由于肝細胞癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢,且傳統(tǒng)抗癌藥治療療效不佳, 而肝臟移植是中晚期肝細胞癌 5 年生存率很高的治療方法,但qi官移植后免疫反應常造成器官排斥,如何降低排斥反應、提高移植成功率、 提高 5 年生存率成為當前治療至關重要的研究內容。中醫(yī)中藥在抗癌方面往往發(fā)揮著重要作用,如青藤堿, 目前體外實驗均顯示其具有抗腫瘤的藥理活性[3]。 青藤堿是中草藥防己科植物青風藤的根莖提取而成的生物堿單體,具有鎮(zhèn)痛、抗炎、免疫調節(jié)等藥理作用,國內已有鹽酸青藤堿注射液、鹽酸青藤堿片等制劑,用于治療急性關節(jié)炎、類風濕性關節(jié)炎、白血病、前列腺癌、肺癌、肝細胞癌及宮頸癌等,均有一定的抗腫瘤作用[4]。 筆者在本移植實驗中,系統(tǒng)觀察了青藤堿對肝細胞癌肝移植術后大鼠細胞免疫功能的影響, 為臨床肝臟移植提供可靠的實驗及理論依據(jù)?,F(xiàn)報告如下。

          1 材料與方法

          1.1 動物 雄性 Lewis 大鼠 (受體) 和雄性 DA 大鼠(供體)各 60 只,9~10 周齡,體質量 180~200 g,十堰市太和醫(yī)院科研中心從上海購進 [許可證 SYXK (鄂)2014-0031]。

          1.2 藥物與試劑 鹽酸青藤堿腸溶片(煙臺魯銀藥業(yè)有限公司,批號 H37023717,規(guī)格 20 mg);二乙基亞硝胺(上 海恒遠生物 科技 有 限 公 司,批 號 H20160211);戊 ba比 妥 鈉 (上 海 哈 靈 生 物 科 技 有 限 公 司 , 批 號H0160527);大鼠 白介 素-2(IL-2)、白 介 素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)ELISA 試劑盒(上海恒遠生物科技有限公司,批號 0160524、0160528、0160526)。 大鼠轉化 生 長 因 子-β1(TGF-β1)、腫 瘤 壞 死 因 子-α(TNF-α)、趨化因子-10(IP-10)ELISA 試劑盒(上海恒遠生物科技有限公司,批號 XF160420、XF160422、 XF160426)。

           

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