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山羊痘抗體（Pox-Ab）ELISA Kit說明書下載
閱讀：496 發(fā)布時間：2012-11-21【山羊痘抗體（Pox-Ab）ELISA Kit】 Elisa試劑盒現(xiàn)貨代測|ELISA試劑盒——全國包郵送貨上門
規(guī)格：48T/96T（定性定量分析檢測）
Elisa試劑盒應用范圍：科研試驗用檢測試劑
ELISA實驗步驟,樣本處理及要求（液體類標本：血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等）,請參考Elisa試劑盒說明書——點此索取！
【 山羊痘抗體（Pox-Ab）ELISA Kit 】 Elisa試劑盒測試性能穩(wěn)定可靠，本公司Elisa試劑盒的優(yōu)點：
1、、靈敏、特異的抗體；
2、穩(wěn)定的重復性和可靠性；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
5、zui大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費
使用目的：
本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中山羊痘抗體（Pox-Ab）含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中山羊痘抗體（Pox-Ab）水平。用純化的抗原包
被微孔板，制成固相抗原，往包被單抗的微孔中依次加入山羊痘抗體（Pox-Ab），再與HRP
標記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標抗原復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB
在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中
的山羊痘抗體（Pox-Ab）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過
標準曲線計算樣品中山羊山羊痘抗體（Pox-Ab）濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（120pg/ml） 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
山羊痘抗體（Pox-Ab）ELISA Kit操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
60pg/ml 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
30pg/ml 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
15pg/ml 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
7.5pg/ml 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
3.75pg/ml 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，
然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此
重復5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進行。
山羊痘抗體（Pox-Ab）ELISA Kit注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個月