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          羊白細胞介素2試劑盒使用說明書下載

          閱讀:153          發(fā)布時間:2012-12-5
          提 供 商 上海恒遠生物科技有限公司 資料大小 107.5KB
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                        羊白細胞介素2試劑盒使用說明書

          本試劑盒僅供研究使用。

          檢測范圍:                                                          96T

          0.5ng/L - 8ng/L 

          使用目的:

          本試劑盒用于測定羊血清、血漿及相關液體樣本中白細胞介素2IL-2含量。

          實驗原理

          本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中羊白細胞介素2IL-2水平。用純化的羊白細胞介素2IL-2抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素2IL-2),再與HRP標記的白細胞介素2IL-2抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素2IL-2呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中羊白細胞介素2IL-2濃度。

          試劑盒組成

          1

          30倍濃縮洗滌液

          30ml×1

          7

          終止液

          6ml×1

          2

          酶標試劑

          6ml×1

          8

          標準品(16ng/L

          0.5ml×1

          3

          酶標包被板

          12孔×8

          9

          標準品稀釋液

          1.5ml×1

          4

          樣品稀釋液

          6ml×1

          10

          說明書

          1

          5

          顯色劑A

          6ml×1

          11

          封板膜

          2 

          6

          顯色劑B

          6ml×1/

          12

          密封袋

          1

          標本要求

          1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融

          2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

          羊白細胞介素2試劑盒操作步驟

          1.         標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

          8ng/L

          5號標準品

          150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

          4ng/L

          4號標準品

          150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

          2ng/L

          3號標準品

          150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

          1ng/L

          2號標準品

          150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

          0.5ng/L

          1號標準品

          150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

           2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

          3.         溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  

          4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

          5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

          6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

          7.         溫育:操作同3。

          8.         洗滌:操作同5。

          9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,

          37

           

          避光顯色15分鐘.

          10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

           

          11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

          羊白細胞介素2試劑盒注意事項

          1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

          2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

          3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

          4.  請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

          5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

          6.底物請避光保存。

          7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

          8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

          9.本試劑不同批號組分不得混用。

          10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

          保存條件及有效期

          1.試劑盒保存:;2-8。

          2.有效期:6個月

           

          科研樣品ELISA檢測服務

          凡購買本公司目錄任何一種ELISA試劑盒,您只需將需要檢測的動物種類和檢測指標(介素類、因子類)及標本數(shù)量(48T/96T )通知公司業(yè)務員即可。在接到客戶標本當日起,現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測報告交到客戶手中!歡迎臨床醫(yī)學界和各科研單位在各種項目上與我們開展不同層次的密切合作,以雙贏求發(fā)展,共同進步,為中國檢測事業(yè)的發(fā)展積累經(jīng)驗。 

           

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