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斑點(diǎn)Elisa有哪些優(yōu)點(diǎn)
閱讀:1865 發(fā)布時(shí)間:2014-5-14 相對(duì)與酶聯(lián)免疫試驗(yàn),zui近我是發(fā)現(xiàn)了一種新型的免疫方法,為斑點(diǎn)免疫法,此特點(diǎn) Dot-ELISA是由Hawkes等建立。用吸附蛋白質(zhì)能力很強(qiáng)的硝酸纖維素膜(NC膜)為載體,將少量抗原(1~2μL)點(diǎn)加于膜上,干燥后經(jīng)過(guò)封閉液處理;滴加待檢血清和酶標(biāo)抗抗體(間接法),或是先在NC膜上滴加待檢血清(2~5tzL),干燥后加封閉液處理;滴加特異性抗原和酶標(biāo)抗體(雙抗體夾心法)進(jìn)行反應(yīng)。
洗滌后滴加能形成不溶性有色沉淀的底物溶液(HRP常用二氨基聯(lián)苯胺、4-氯乙萘酚)。陽(yáng)性反應(yīng)在膜上出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的著色斑點(diǎn)。Dot-ELISA常用于篩選單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞;在各種病毒性疾病和寄生蟲(chóng)病的臨床診斷與血清流行病學(xué)調(diào)查中亦廣泛使用。
根據(jù)恒遠(yuǎn)試驗(yàn)得出此法具有以下優(yōu)點(diǎn):
①特異性強(qiáng),假陽(yáng)性較少;
②敏感性高,NC膜對(duì)蛋白質(zhì)的吸附性能優(yōu)于聚苯乙烯,可檢出lng抗腺病毒IgC;檢出抗原的敏感性較常規(guī)ELISA法高6~8倍;
③試劑用量少,比ELISA法至少節(jié)約10倍;
④操作簡(jiǎn)便快速,不需要特殊設(shè)備條件,適合基層單位使用;
⑤抗原膜保存期長(zhǎng),—20%可保存半年,不影響其活性;并可郵寄供現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查使用;
⑥檢測(cè)結(jié)果可長(zhǎng)期保存,便于復(fù)查。