詳細(xì)介紹
一、人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒詳細(xì)參數(shù)
規(guī)格:96T
品牌:RD
保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:六個(gè)月
【Elisa貨期】現(xiàn)貨
【Elisa價(jià)格】咨詢
【Elisa說(shuō)明書】索取
【ELISA試劑盒】提供免費(fèi)檢測(cè)服務(wù):使用我公司試劑盒,只收取試劑盒的費(fèi)用,其他輔助試劑全部免費(fèi)。我們將根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量和難易程度,雙方協(xié)定實(shí)驗(yàn)周期,保質(zhì)保量完成委托實(shí)驗(yàn),并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果和材料用特快專遞免費(fèi)寄送到您手中。
二、人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問(wèn)題
一、所有孔未顯色?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、用錯(cuò)試劑。
3、在操作中忘記加酶或抗體。
解決辦法:
1、檢查洗板器械,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加樣前,要看清瓶簽。
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位。
二、所有孔顯色偏低?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、洗板不干凈。
3、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。
4、溫度沒(méi)達(dá)到要求。
5、每孔加入的試劑量低于說(shuō)明書要求量。
解決辦法:
1、手工加蒸餾水洗板時(shí),要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。
2、洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。
4、控制孵育溫度在25℃。
5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。
Elisa實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備
1仔細(xì)閱讀說(shuō)明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說(shuō)明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說(shuō)明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見(jiàn)技術(shù)指南
8選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì);若選擇兩個(gè)單抗,必須識(shí)別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對(duì)。
9ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí),應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說(shuō)明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
10標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
11一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
12為了優(yōu)化靈敏度,建議過(guò)一夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
13若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。
14當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.
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