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        1. 迪圖(上海)生物科技有限公司
          中級(jí)會(huì)員 | 第21年

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          美國(guó)ABI 賽默飛
          艾本德離心機(jī)
          德國(guó)默克密理博
          美國(guó)Bio-Rad 伯樂(lè)
          德國(guó)IKA系列
          移液器/移液槍
          生命科學(xué)儀器
          食品安全檢測(cè)試劑
          農(nóng)藥速檢測(cè)儀
          食品安全檢測(cè)儀
          制冰機(jī)
          酶標(biāo)儀
          奧林巴斯顯微鏡
          實(shí)驗(yàn)室設(shè)備
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          哈希水質(zhì)檢測(cè)儀
          瑞士梅特勒天平
          生化分析儀器
          滅菌器|生物安全
          電子天平
          水分儀
          測(cè)溫儀
          光度計(jì)
          搖床
          電化學(xué)|水質(zhì)測(cè)定儀
          意大利HANNA水質(zhì)分析儀
          氮吹儀
          美國(guó)Brookfield(博勒飛)
          土壤分析儀
          德國(guó)Sartorius系列
          環(huán)境檢測(cè)
          物理特性分析儀器
          通用分析儀器
          藥物檢測(cè)
          清洗機(jī)
          培養(yǎng)箱
          天隆

          選購(gòu)熒光定量PCR儀需要注意的幾個(gè)關(guān)鍵參數(shù)

          時(shí)間:2017/3/27閱讀:1834
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          選購(gòu)熒光定量PCR儀時(shí),需要注意的幾個(gè)關(guān)鍵參數(shù):

          1.儀器的檢測(cè)通量(Throughput)首先要考慮實(shí)驗(yàn)室目前需要使用定量PCR儀的頻率。加州大學(xué)舊金山分校癌癥中心的基因組分析設(shè)備負(fù)責(zé)人David Ginzinger檢測(cè)過(guò)市面上絕大多數(shù)的定量PCR儀。他表示,如果不是大規(guī)模批量使用,比如說(shuō)主要是用來(lái)檢測(cè)驗(yàn)已知基因,那確實(shí)不需要昂貴的產(chǎn)品。但是如果是那些需要尋找新藥靶點(diǎn)和疾病標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)室,就需要能容納384孔板、運(yùn)行時(shí)間更快的儀器。不過(guò)僅有這么一件高通量的儀器是不夠快的,你會(huì)發(fā)現(xiàn)樣品制備成為限速的瓶頸。所以高通量的實(shí)驗(yàn)室往往需要進(jìn)一步的自動(dòng)化儀器,只要“按一下鈕”,儀器就會(huì)自動(dòng)處理樣品、純化核酸和制備PCR模板。

          2.靈活性 大規(guī)模繁忙的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備**固然令人羨慕,常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室同樣可以有精彩的選擇?,F(xiàn)在的供應(yīng)商都擁有眾多的技術(shù)專家,不單了解你的目前需要,還非常周到地為你考慮了以后可能的需求變化,比如提供多種可升級(jí)配件和模塊。BioRad的MyCycler就可以選擇模塊而升級(jí)為實(shí)時(shí)定量。ABI的定量PCR有多種不同的樣品槽,可以將96孔槽變?yōu)殡p384孔槽而滿足部分高通量的需求。對(duì)于剛開(kāi)始小量做qPCR的實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō),SmartCyclerⅡ定量PCR儀是一個(gè)好選擇,一個(gè)基本模塊有16個(gè)獨(dú)立控溫樣品槽,可以同時(shí)或者前后分別進(jìn)行16個(gè)*獨(dú)立的不同實(shí)驗(yàn),“隨機(jī)存取”;當(dāng)實(shí)驗(yàn)室需要較大規(guī)模實(shí)驗(yàn)時(shí),可以非常經(jīng)濟(jì)地升級(jí),從1個(gè)增加到6個(gè)基本模塊,也就是96樣品孔。雖然不能用96孔板,但是當(dāng)一個(gè)學(xué)生開(kāi)始小量實(shí)驗(yàn),其他人還可以隨時(shí)插進(jìn)去開(kāi)始自己的獨(dú)立實(shí)驗(yàn),而且互不干擾,就是增加了靈活性。對(duì)于剛開(kāi)始只做少量實(shí)驗(yàn)而且預(yù)算較緊張的實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)是非常靈活的選擇。

          3.多重?cái)U(kuò)增的能力 多重?cái)U(kuò)增越來(lái)越熱。實(shí)時(shí)定量PCR儀也不能幸免。定量PCR儀擁有多個(gè)檢測(cè)通道,因而儀器就可以檢測(cè)同一個(gè)樣品槽里多個(gè)模板的擴(kuò)增過(guò)程。新的LightCycler2.0有6個(gè)檢測(cè)通道,比原來(lái)多了3個(gè)。SmartCyclerⅡ有4個(gè)檢測(cè)通道。以文庫(kù)產(chǎn)品而名滿天下的Stratagene也有一種價(jià)格不到Roche的一半、口碑不錯(cuò)的定量PCR儀Mx3000P,也就是4個(gè)檢測(cè)通道。不過(guò)多重?cái)U(kuò)增并非人人適用,因?yàn)樗箤?shí)驗(yàn)復(fù)雜化了。

          4.軟件 當(dāng)你準(zhǔn)備選擇一臺(tái)定量PCR儀,你必須要檢測(cè)附帶的軟件。使用方便嗎,是否可以進(jìn)行你所需要的分析,輸出格式有幾種。不過(guò),你需要留意,太容易使用的軟件是不是功能比較簡(jiǎn)單而無(wú)法進(jìn)行復(fù)雜計(jì)算,以前的軟件還需要你做進(jìn)一步分析,新的軟件已經(jīng)可以處理一切了。除了基本功能,部分軟件還可以有更多的功能,比如引物和探針設(shè)計(jì)、多重分析設(shè)計(jì)、背景校正、數(shù)據(jù)歸一化等等。Roche應(yīng)用科學(xué)部的應(yīng)用和技術(shù)服務(wù)部負(fù)責(zé)人Willian Demyan就強(qiáng)調(diào):定量PCR是一個(gè)幾何擴(kuò)增的過(guò)程,開(kāi)始時(shí)一個(gè)拷貝之差,結(jié)果就有幾何數(shù)量級(jí)之別。

          5.不確定性 盡管軟件可以做部分修正,購(gòu)買(mǎi)一臺(tái)系統(tǒng)誤差較少的儀器,無(wú)需那么多計(jì)算修正總比靠計(jì)算修正好。Cinzinger就認(rèn)為,要特別注意儀器樣品孔之間的差異性。除了*的樣品孔之間的溫度差異,還有樣品孔和檢測(cè)探頭之間光程距離、負(fù)責(zé)收發(fā)和傳遞信號(hào)的光纖長(zhǎng)度的微小差別、透鏡和樣品孔間的距離和角度的微小差別、甚至樣品槽對(duì)信號(hào)傳遞的影響。Cinzinger在絕大多數(shù)的市售的定量PCR儀做過(guò)同樣的測(cè)試,他將同樣的樣品和反應(yīng)試劑在儀器的每一孔進(jìn)行實(shí)時(shí)擴(kuò)增。很不幸,很多時(shí)候,不同樣品孔之間會(huì)有不同的結(jié)果。

          6.試劑盒的選擇 盡管銷售人員會(huì)吹噓有出色質(zhì)量控制的試劑盒和解決方案就會(huì)得到一至的結(jié)果,但購(gòu)買(mǎi)現(xiàn)成的試劑盒并不是解決差異性的辦法。認(rèn)真的評(píng)估實(shí)驗(yàn)和分析實(shí)驗(yàn)才是解決之道。

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