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大鼠ELISA試劑盒操作的通用規(guī)則
閱讀:771 發(fā)布時(shí)間:2017-12-20大鼠ELISA試劑盒操作的通用規(guī)則:
1、要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時(shí),lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
2、 在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3、吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
4、 將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。吸入液體時(shí)的的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。
5、吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
6、 液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。
7、孵育時(shí)要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線性。
8、 實(shí)驗(yàn)前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只要取出所需量。
9、由于底物顯色劑對(duì)光及其敏感,因此要避光保存。
10、手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入11、檢測(cè)吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,將其預(yù)熱30min以上。
12、 底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚
13、 孵育的時(shí)間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書上的時(shí)間為準(zhǔn)。
14、 要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
15、 對(duì)樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要使用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證。
16、沒有去離子水或雙蒸水時(shí),可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來(lái)水。
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