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大鼠ELISA試劑盒使用要點(diǎn)
閱讀:110 發(fā)布時間:2018-5-21大鼠ELISA試劑盒使用要點(diǎn):
1、按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
2、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
3、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
4、標(biāo)本由于冷藏時Ig G聚合成多聚體,F(xiàn)ib非特異性吸附,反復(fù)凍融機(jī)械切力致使蛋白分子受損。
5、實(shí)驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
7、加樣時不準(zhǔn),槍頭吸樣時插入樣本液面下2mm為宜。
8、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
9、加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
10、應(yīng)該注意試劑4°c冷藏時水化層形成,蛋白分子分布異常。
11、底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
12、常采用的溫度有43、37°c、室溫、或者4°c等。37°czui常用,4°c效果,但孵育時間有異。
13、要注意內(nèi)源如風(fēng)濕因子,補(bǔ)體,高濃度非特異性免疫球蛋白,異嗜性抗體及某些自身抗體等;外源如標(biāo)本溶血,細(xì)菌污染,儲存時間過長及凝固等因素影響。
14、洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
15、在使用ELISA試劑盒時應(yīng)注意:2-8℃保存(特殊情況除外)、同一品種不同批號試劑不能混用、不同品種試劑盒顯色劑不能混用。
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