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ELISA試劑盒檢查中顯色液A和B效果分析
閱讀:291 發(fā)布時間:2023-2-15酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enayme liked immunosorbent,ELISA)是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的一種檢查技能,因其具有靈敏性高、特異性強(qiáng)、操作簡略等長處,被廣泛運(yùn)用于各種抗原和抗體的測定。ELISA試劑盒檢查中顯色液A和B效果分解如下:
酶聯(lián)免疫確診試劑盒的底物A即是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B即是顯色劑B(含TMB),用于顯色。別的,常用的底物還有:
AP的底物,常用的為對-硝基苯磷酸脂(PNP),其反響物為黃色的對硝基酚,測讀波長為405nm2)GOD的底物,為葡萄糖,供氫體為對硝基藍(lán)四氮唑,反響商品為不溶性的藍(lán)色沉積啥是TMB?TMB即四甲基聯(lián)苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強(qiáng)的基團(tuán),因而簡略進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中的HRP反響,且因?yàn)檫@種高度的脂溶性,使其易構(gòu)成多聚體,在HRP活性部位發(fā)生粗大的、深蘭色沉積物,這使得TMB變成組化試驗(yàn)中的一種ji 好的發(fā)色團(tuán)。一起反響商品的沉積,使得HRP的活性部位愈加露出,利于酶氧化反響進(jìn)行。
TMB的反響商品為深藍(lán)色,利于光鏡調(diào)查,且反響商品越聚越大,常超出單個細(xì)胞器的規(guī)模(而DAB則被約束在其內(nèi)),故TMB反響的檢查閾較低。