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小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn)
閱讀:103 發(fā)布時(shí)間:2018-3-16提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 80.5KB |
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小鼠ELISA試劑盒操作過(guò)程的操控:
⑴ 嚴(yán)厲依照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ elisa試劑盒加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)厲操控操作時(shí)刻,防止孵育時(shí)刻人為延伸,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反響孔周?chē)?,難以清洗*。
(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸騰,發(fā)生周邊現(xiàn)象然后導(dǎo)致“花板”的呈現(xiàn)。
(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選潔凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過(guò)程中易發(fā)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的呈現(xiàn)。
(5)合理安排檢丈量,以免反響板過(guò)多形成洗板等候時(shí)刻長(zhǎng)。
實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn)
1,是檢測(cè)抗體仍是抗原?
2,檢測(cè)的成果是定性仍是定量?
3,是否需求檢測(cè)特異抗體的類型?
4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?(1)檢測(cè)抗原zui常用于檢測(cè)抗原的方法對(duì)錯(cuò)比賽性的雙抗體夾心法,其次是比賽法。但比賽法在詳細(xì)實(shí)驗(yàn)中有些困難,特別是檢測(cè)微生物的抗原,因?yàn)樾枨蠓?hào)抗原,這關(guān)于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在比賽法中,酶符號(hào)的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的成果。(2)檢測(cè)抗體檢測(cè)抗體種類常用的方法是檢測(cè)抗體種類的捕獲法,這個(gè)方法常用于檢測(cè)特異性IgG、IgA和IgM.。這個(gè)方法的*步是捕獲所需求檢測(cè)的一個(gè)種類的抗體,接下來(lái)是檢測(cè)捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。
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