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人ELISA試劑盒試驗時可能遇到的問題
閱讀：132 發(fā)布時間：2018-5-2| 提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 13.9KB |
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人ELISA試劑盒試驗時可能遇到的問題：
1、過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)。
2、手工操作中，加樣板過多形成加樣后放入孵箱前等待時間。
3、加完標本再加酶試劑時酶濺起孔外。.血清或血漿標本別離欠好即進行加樣。
詳細留意事項：
1、血清標本如是以無菌操作別離，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則主張冰凍保存。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70℃以下。
2、冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果，然后引起假陰性成果。此外，凍融標本的混勻亦應(yīng)留意，不要進行劇烈振動，重復(fù)倒置混勻即可。
3、標本在保存中如呈現(xiàn)細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時，應(yīng)離心沉積后取上清檢測。
4、要留意防止呈現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相，然后與后邊參加的HRP底物反應(yīng)顯色。
5、樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的成長，其所排泄的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定方法發(fā)生非特異性攪擾。
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