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小鼠ELISA試劑盒標(biāo)本處理不當(dāng)直接影響實驗操作
閱讀：162 發(fā)布時間：2018-8-8| 提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 18.8KB |
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小鼠ELISA試劑盒標(biāo)本處理不當(dāng)直接影響實驗操作
一、標(biāo)本的影響
溶血標(biāo)本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性?？赡苁侨苎逯泻羞^氧化
酶物質(zhì)（紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍色，產(chǎn)生假陽性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。
二、標(biāo)本受細菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可產(chǎn)
生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
三、標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過久的標(biāo)本，在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、造成假陽性；為克服上述
干擾，elisa試劑盒測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5 d內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分
合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔，不可強烈振蕩。
塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
使用真空采血管；并使用非抗凝標(biāo)本，肝素抗凝血漿會增加OD值，EDTA、酶抑制劑可抑制
ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性。
四、標(biāo)本凝固不全
在工作中，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，使血
清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果；因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
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