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生化試劑的一些概要:熒光素
生化試劑又叫生化藥品,簡稱試劑。它是工農(nóng)業(yè)、文教衛(wèi)生、科學(xué)研究以及國防建設(shè)等多方面進行化驗分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標準的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物。要進行任何實驗都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對生化試劑的有關(guān)知識深入了解,才能安全、順利進行各項實驗。既可保證達到預(yù)期實驗?zāi)康?,又可消除對環(huán)境的污染。因此,首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品:熒光素
聚(1,4-丁二醇丁二酸)酯,丁二酸乙二醇聚酯,丁二酸-1,4-丁二醇聚酯,聚-1,4-丁二醇丁二酸酯,聚丁二酸乙二醇酯,聚(乙二醇琥珀),BDS,LAC-6R-860,HI-EFF-4B 色固 25克 25569-53-3 RT
聚乙烯乙酸酯,聚乙烯乙酸酯,聚醋酸乙烯酯,乙酸乙烯聚酯,醋酸乙烯系列乳膠,聚乙酸乙烯酯,乙酸乙烯酯均聚物,PVAC乳液,PVA AR,3-5萬 100克 9003-20-7 RT
碳酸丙二醇酯,碳酸丙烯酯,1,2-丙二醇碳酸,1,2-丙二醇碳酸酯,4-甲基-1,3-二氧戊環(huán)-2-酮,碳酸丙烯,丙二醇環(huán)碳酸酯,丙烯碳酸鹽,Propylene carbonate CP 250毫升 108-32-7 RT
對羥基苯甲酸丙酯,對羥基安息香酸丙酯,尼泊金丙酯,4-羥基苯甲酸丙酯,對羥基苯甲酸正丙酯,對羥苯甲酸丙酯,Propyl paraben CP 100克 94-13-3 RT,避光
1公斤
GCS 5克
肉豆蔻酸異丙酯,十四酸異丙酯,十四酸1-甲基乙基酯,十四烷酸異丙酯,十四碳酸異丙酯,IPM CP,98% 500毫升 110-27-0 RT
丙酸正丙酯,丙酸丙酯,Propyl phenylacetate AR,98% 250毫升 106-36-5 RT
硼酸三正丁酯,硼酸三丁酯,三丁氧基甲硼烷,硼酸丁酯,硼酸正丁酯,三正丁氧基硼,三丁氧硼,Tributyl borate CP,99% 100毫升 688-74-4 RT
500毫升
亞磷酸三丁酯,亞磷酸正丁酯,亞磷酸三正丁酯,三(正丁氧基)膦,Tributyl phosphite BR,94% 100毫升 102-85-2 RT
500毫升
磷酸三乙酯,三乙基磷酸鹽,三乙磷酸酯,三乙基磷酸酯,三乙氧基磷,TEP CP, 500毫升 78-40-0 RT
GCS 5毫升
磷酸*酯,磷酸甲酯,*基磷酸酯,TMP AR,99% 250毫升 512-56-1 RT
GCS 5毫升
磷酸三苯酯,三聚磷酸酯,增塑劑,磷酸苯酯,磷酸三苯酚酯,磷酸三苯基酯,TPP CP 250克 115-86-6 RT
亞磷酸三苯酯,三苯基亞磷酸鹽,亞磷酸三苯基酯,亞磷酸苯酯,磷酸苯酯,Triphenyl phosphite CP 500毫升 101-02-0 RT
硅酯H-295,H295硅酯,H295 Estersil CP 1公斤 RT
棕櫚油酸甲酯,(Z)-十六烯酸甲酯,棕櫚烯酸甲酯,Methyl palmitoleate 特純,98.5% 100毫克 1120-25-8 保存:-20℃
500毫克
1克
乙酸正丙酯,醋酸正丙酯,乙酸丙酯,醋酸丙酯,Propyl acetate CP,98.5% 500毫升 109-60-4 RT
GCS 5毫升
過硫酸銨,高硫酸銨,過二硫酸銨,過氧化硫酸銨,過氧二硫酸銨,APS,PER AR,98% 500克 7727-54-0 RT
硫酸銨,硫酸铔,硫銨,硫氨,肥田粉,Ammonium sulfate AR,99% 500克 7783-20-2 RT
4N 10克
四庚基溴化銨,溴化四庚銨,四正庚基溴化銨,溴化四庚基銨,溴化四正庚基銨,Tetraheptylammonium bromide 特純,99% 5克 4368-51-8 RT
25克
100克
四丁基溴化銨,N,N,N-三丁基-1-丁銨溴化物,四正丁基溴化銨,溴化四丁銨,溴化四丁基銨,TBA溴化物,TBAB AR,99% 25克 1643-19-2 RT
100克
500克
四乙基溴化銨,溴化四乙銨, N,N,N-三乙基乙銨溴化物,四乙溴銨,溴化四乙基銨,四乙基溴銨,TEAB,TMD-10 AR,99% 25克 71-91-0 RT
100克
500克
四乙基氯化銨,氯化四乙銨, N,N,N-三乙基乙銨氯化物,氯化四乙基銨,四乙銨化氯,TEAC AR,98% 25克 56-34-8 RT
100克
500克
四乙基碘化銨,碘化四乙銨, N,N,N-三乙基乙銨碘化物,碘化四乙基銨,Tetraethylammonium iodide AR,99% 25克 CAS:68-05-3 RT,避光
四甲基溴化銨,溴化四甲基銨,四甲替溴化銨,溴化四甲銨,四甲胺溴化物,TMAB AR,99% 25克 64-20-0 RT
100克
500克
四甲基氯化銨,氯化四甲基銨,氯化四甲銨,TMAC AR,99% 25克 75-57-0 RT
100克
500克
四甲基碘化銨,碘化四甲基銨,N,N,N-*基-1-甲銨碘化物,碘化四甲銨,Tetramethylammonium iodide AR,98% 25克 75-58-1 RT
100克
500克
四丁基氫氧化銨,三丁基-1-丁銨氫氧化物,氫氧化四丁基銨,N,N,N-三丁基-1-丁銨氫氧化物,Tetrabutyl ammonium hydroxide AR,10% 50克 2052-49-5 RT
四正丁基氯化銨,N,N,N-三丁基-1-丁銨氯化物,四丁基氯化銨,氯化四丁銨,氯化四丁基銨,氯化四正丁基銨,TBAC AR,95% 25克 1112-67-0 RT
100克
500克
四正丁基碘化銨,四丁基碘化銨,碘化四丁銨,N,N,N-三丁基-1-丁銨碘化物,TBAI AR,99% 25克 311-28-4 RT,避光
100克
500克
鉬酸銨,四水合鉬酸銨,鉬酸銨四水合物,七鉬酸銨,仲鉬酸銨,Ammonium molybdate tetrahydrate AR,99% 100克 12054-85-2 RT
500克
4N 5克
磷酸烯醇丙酮酸單環(huán)己銨鹽,磷酸烯醇丙酮酸單環(huán)己胺鹽,磷酸稀醇丙酮單環(huán)已銨鹽,磷酸烯醇丙酮酸,2-(膦酰氧基)丙烯酸環(huán)己胺鹽,磷酸丙酮酸一環(huán)己銨鹽,PEP BR,95% 500毫克 10526-80-4 避光,-20℃
磷酸烯醇丙酮酸單鉀鹽,磷酸稀醇丙酮酸單鉀鹽,磷酸烯醇丙酮酸酯一鉀,磷酸烯醇式丙酮酸單鉀鹽,PEP-K 超純,98% 250毫克 4265-07-0 保存:-20℃
磷酸烯醇丙酮酸三環(huán)已胺鹽,磷酸烯醇丙酮酸三環(huán)己胺鹽,磷酸烯醇丙酮酸三(環(huán)已胺)鹽,PEP-TRI,PEP-3CHA 超純 1克 35556-70-8 保存:-20℃
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細菌內(nèi)的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍色。常跟IPTG一起用與藍白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,對幾乎所有的細胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當neo基因被整合進真核細胞基因組合適的地方后,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用。
6、DMSO:二甲基亞砜。實驗室常用于作液體層析溶劑,同時用作測試物質(zhì)紫外消光值上時用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細胞裂解液成分之一,在保護蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細管電泳中的變性單股DNA。
11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合。
12、巰基乙醇:一種強還原劑??蛇€原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個亞基。
13、甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
14、過硫酸銨:過硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15、B27:一種添加劑,用于神經(jīng)肝細胞培養(yǎng),被認為具有抑制膠質(zhì)細胞生長的作用。
16、DTT:二硫蘇糖醇,常用還原劑,既有抗氧化作用。它能保護酶分子上的還原性基團,維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,破壞二硫鍵,濃度不同,起到的作用也不同。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細胞壁成分。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細胞壁成分,可以加強對抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。
18、吐溫 20:Tween-20 ,常用的非離子去垢劑。
19、吐溫 80:weenum 80 ,除作乳化劑外,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20.、十二烷基肌氨酸鈉 :脫細胞試劑,制備脫細胞組織工程支架材料。21.PVPP:PVPP對片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。22、PIPES:哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸),實驗室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng),價格比較貴。常用在免疫和細胞類的實驗中,PIPES有時還被用來制備大腸桿菌感受態(tài)。23、CTAB:十六烷基三乙基溴化銨,一種去污劑,可溶解細胞膜,它能與核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時,從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類物質(zhì)分開。zui后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實驗室zui常用的一種提取核酸的手段。24、HEPES:羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持pH7.0左右。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。
25、MOPS:一種緩沖液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。26、鹽酸胍:鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。27、PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時后,可安全地予以丟棄。
28、溴酚藍:pH指示劑,pH=3.0時呈黃色,pH=4.6時呈藍紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗等。29、臺盼蘭:臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭,是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性。30、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙:是一種熒光色素,與細胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個相鄰的堿基對之間,這樣在DNA復(fù)制過程中,會使DNA鏈增加或缺失一個堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時要戴手套,需避光。32、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬從人體中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測定Ca2+時,可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。33、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果??梢杂们罢叽?。34、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強的結(jié)合酚類化合物的能力,與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物,常用于提取RNA時除去酚類。35、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,作用有:1、裂解細胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹慎。36、6-BA:細胞培養(yǎng)中用到,細胞分裂素。37、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺。用于有機合成,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級試劑。38、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑。可促進細胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等39。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑,滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細菌菌落長成紅顏色,對去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。