詳細介紹
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 山茱萸染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Fructus corni |
貨號 | FS-P99266 |
優(yōu)點:
(1)操作簡單,LAMP核酸擴增是在等溫條件下進行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴增只需要在反應體系中加入逆轉錄酶就可同步進行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因為不需要預先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失.核酸擴增在l h內均可完成,添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴增至109倍,達0.5 mg/mL.應用專門的濁度儀可以達到實時定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設計的4種特異性引物。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進行核酸擴增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴增模板可達幾個拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
Beta-casein β-酪蛋白10%A晶型甲咪唑Conivaptan HClMelamine/OVA(ovalbumin) 三聚胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物
BAFF/CD257 F家族B細胞激活因子甲咪唑 2-氨基-3-羥基吡啶chloramphenicol/BSA 氯霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白
BAFFR/CD268 B細胞活化因子受體6-甲氧基-2-萘乙酮2-氨基-3-羥基吡啶chloramphenicol/OVA 氯霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白
bFGF/FGF-2 堿性成纖維細胞生長因子N-甲基哌2-氨基-3-羥基吡啶Geamicin/BSA 慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白
BGP 骨保護蛋白/骨鈣素卡馬西平2,3-二羥基吡啶Geamicin/OVA 慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白
Bid BH3結構域凋亡誘導蛋白磷酸咯萘啶2,3-二羥基吡啶Tetracycline/BSA 四環(huán)素偶聯(lián)牛血清白蛋白
BIN1 橋連整合因子蛋白氨酯六氯鋨酸Geamicin/FITC 熒光素標記慶大霉素
Bim 細胞死亡調解子哈西奈德六氯鋨酸Tetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白
22號染色體開放閱讀框45尼群地平Porcine TERT (omerase Reverse Transcriptase) 檢測試劑盒
22號染色體開放閱讀框32四溴噻吩Porcine PDI (Protein Disulfide Isomerase) 檢測試劑盒
CD5L四溴噻吩Porcine MGST1 (Microsomal Glutathione S Transferase 1) 檢測試劑盒
CD63-硝基芐溴Porcine CALD (Caldesmon) 檢測試劑盒
CD9蛋白3-硝基芐溴Porcine NRG-1 (Neuregulin 1) 檢測試劑盒
CD23/FcεRII3-硝基芐溴Porcine GDF5 (Growth Differeiation Factor 5) 檢測試劑盒
CD272-硝基溴化芐Porcine (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) 檢測試劑盒
CD302-硝基溴化芐Porcine NPYR5 (Neuropeptide Y Receptor Y5) 檢測試劑盒
山茱萸染料法PCR鑒定試劑盒磷酸腺嘌呤,維生素B4SimpleChIP® Human KLK2 Intron 1 Primers
次 Phospho-53BP1 (Ser1618) (D4H11) Rabbit mAb
鳥嘌呤 SignalSilence® Akt siRNA I
鳥嘌呤 (標準品)SignalSilence® LC3B siRNA I
N-芐基吡咯烷-3-甲酸甲酯CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb
5-溴-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶SignalSilence® LC3B siRNA II
2-甲基5-噻唑甲酸SignalSilence® LC3A siRNA I
水溶性四氮唑-8;WST-8CBFβ (D4N2N) Rabbit mAb
水溶性四氮唑-5SignalSilence® β-Arrestin 1 siRNA I
水溶性四氮唑-4SignalSilence® Beclin-1 siRNA I