改良Palmgren神經(jīng)染色液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：雞線(xiàn)粒體超氧化物歧化酶2(SOD2)試劑盒Anti-CARF Antibody鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)蛋白激酶2α抗原
雞多聚球蛋白受體(PIGR/SC)試劑盒Anti-CARM1 Antibody鈣/鈣調(diào)蛋白依賴(lài)蛋白激酶IG抗原
雞膜橋蛋白(Ponticulin)試劑盒 Anti-CASP4 Antibody轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β1（抗原）
聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類(lèi)：神經(jīng)染色

儲(chǔ)存條件：4℃,避光,3個(gè)月

用途：神經(jīng)纖維染色,采用甘氨酸銀浸鍍法，石蠟切片

注意事項(xiàng)：染色結(jié)果為：神經(jīng)軸突和神經(jīng)纖維成黑色或棕黑色。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

伯克氏菌21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體Human ETS1 ELISA Kit兔子(GSH)免疫試劑盒

孟氏假單胞菌4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體Human EXOSC1 ELISA Kit兔子睪(T)免疫試劑盒

毛胡枝子根瘤菌4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框40抗體Human ETS2 ELISA Kit兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒

居巖牙殖球菌Cullin3抗體Human EXOSC10 ELISA Kit兔子高密度脂蛋白膽固(HDL-C)免疫試劑盒

ATCC 35056分裂周期同源蛋白40抗體Human ETV4 ELISA Kit兔子肝生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒

白蘑卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白106抗體Human ETV6(ETS translocation variant 6) ELISA Kit兔子甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒

成團(tuán)泛菌染色質(zhì)修飾蛋白1A抗體Human EVI2A ELISA Kit兔子干因子/肥大生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌葉綠體伴侶蛋白抗體（蘋(píng)果）Human ETV5 ELISA Kit兔子二氧化(DAO)免疫試劑盒

釀酒酵母分裂周期蛋白20B抗體Human ESRP2 ELISA Kit兔子端粒(TE)免疫試劑盒

污黑腐皮殼周期調(diào)控蛋白D1抗體Human ESRRB ELISA Kit兔子低密度脂蛋白膽固(LDL-C)免疫試劑盒

東京根霉周期蛋白B1結(jié)合蛋白1抗體Human ESX1 ELISA Kit兔子蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒

放射形根瘤菌周期調(diào)控因子14A抗體Human ETF1 ELISA Kit兔子蛋白聚糖(ACAN)免疫試劑盒

異常威克漢姆酵母第七號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框12抗體Human ETFA ELISA Kit兔子膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)免疫試劑盒

副干酪乳桿菌碳酐11抗體Human ERO1L ELISA Kit兔子單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒

Bacillus aryabhattaiα酪蛋白抗體Human ERP29 ELISA Kit兔子催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒

白鱗馬勃周期調(diào)控相關(guān)蛋白1Human ERO1LB ELISA Kit兔子促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒

棉阿舒囊霉Ashbya│gossypii 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTH糖蛋白試劑盒馬兜鈴

小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTGF-β誘導(dǎo)早期基因1試劑盒牡荊內(nèi)酯

雞傷菌Salmonella│gallinarum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激級(jí)Tau蛋白毛地黃
改良Palmgren神經(jīng)染色液HBV preS2Ab(Human hepatitis B virus) ELISA Kit  人乙型肝炎病毒前S2規(guī)格： 48T

HBV preS2Ag(Human hepatitis B virus) ELISA Kit  人乙型肝炎病毒前S2抗原規(guī)格： 48T

HGV-IgM(Human Hepatitis G virus IgG) ELISA Kit  人庚型肝炎病毒IgM規(guī)格： 48T

TTV(Human transfusion transmitted virus) ELISA Kit  人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒規(guī)格： 48T

HEV-IgM(Human Hepatitis D virus IgM) ELISA Kit  人戊型肝炎病毒IgM規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線(xiàn)的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。