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          核酸雜交漂洗液

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          更新時(shí)間:2022-08-30 10:26:07瀏覽次數(shù):253

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
          貨號(hào) FS-R7401 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R7401
          核酸雜交漂洗液公司正在銷售的產(chǎn)品:Anti-ROBO1 Antibody小鼠β干擾素
          Anti-RPA2 Antibody大鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽
          Anti-RORC Antibody人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體
          Anti-RPA3 Antibody小鼠肌鈣蛋白Ⅰ
          Anti-RPA32 Antibody大鼠腦腸肽
          Anti-RPAP2 Antibody人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體
          Anti-RPA4 Antib

          詳細(xì)介紹

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          產(chǎn)品分類:核酸雜交

          儲(chǔ)存條件:室溫,6個(gè)月

          用途:核酸雜交后漂洗溶液

          注意事項(xiàng):主要由SSC、曲拉通-100、滅菌水等組成,離子強(qiáng)度較低。

          公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號(hào)

          核酸雜交漂洗液

          500ml

          FS-R7401

           

          配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

          1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

          EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

          2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

          配制步驟:

          1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。

          2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

          3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

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          實(shí)驗(yàn)方法與判定:

          1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

          2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

          3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

          4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

          使用方法:

          1.  常用篩選濃度

          注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。

          一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

          2. 殺滅曲線的建立

          注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

          1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

          2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

          3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

          4)  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

          5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

          3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

          1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

          注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

          2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

          3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

          4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

          5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

          糖化酵母巨噬炎癥蛋白2( GROβ)抗體Human NCOR1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit可溶性O(shè)X40L(sOX40L)

          側(cè)耳金屬硫蛋白抗體Human FUT6(Alpha-(1,3)-fucosyltransferase) ELISA Kit可溶性E選擇(sE-selectin)

          綠色木霉磷化微管相關(guān)蛋白2抗體Human HNRNPK(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K) ELISA Kit可溶性Endoglin(sENG/sCD105)

          芽孢桿菌屬內(nèi)皮MMRN1蛋白抗體Human DEFB1(Beta-defensin 1) ELISA Kit可溶性CD86(B7-2/sCD86)

          硬毛栓孔菌磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體Human CCBL1(Kynurenine–oxoglutaRate transaminase 1) ELISA Kit可溶性CD44變體9(sCD44-v9)

          拜氏色鹽桿菌磷化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體Human AVP(Vasopressin-neurophysin 2-copeptin) ELISA Kit可溶性CD40配體(sCD40L)

          多根硬皮馬勃磷化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體Human DEFB4A(Beta-defensin 4A) ELISA Kit可溶性CD38(sCD38)

          釀酒酵母磷化髓樣白血病-1抗體Human IRS2(Insulin receptor substRate 2) ELISA Kit可溶性CD30配體(sCD30L)

          平菇磷化雙微體2癌基因抗體Human SLC8A1(Sodium/calcium exchanger 1) ELISA Kit可溶性CD28(sCD28)

          芽枝狀枝孢磷化肌增強(qiáng)因子2抗體Human ESRRG(Estrogen-related receptor gamma) ELISA Kit可溶性CD276分子(sCD276/sB7-H3)

          小馬勃磷化肌增強(qiáng)因子2抗體Human SLC11A2(Natural resistance-associated macrophage protein 2) ELISA Kit可溶性CD21(CR2/sCD21)

          溶藻弧菌磷化絲裂原活化蛋白激激1抗體Human INTS3(IntegRator complex subunit 3) ELISA Kit可溶性CD163分子(sCD163)

          蟬花*磷化微管相關(guān)蛋白2抗體Human GLUD1(Glutamate dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA Kit可溶性CD146分子(sCD146)

          哈茨木霉絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human GPX1(Glutathione peroxidase 1) ELISA Kit可溶性CD14(sCD14)

          閃光須霉磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human LPO(Lactoperoxidase) ELISA Kit可溶性CD105(sCD105)

          腸炎沙門氏菌磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human GLUD1(Glutamate dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA Kit可溶性CD100(sCD100)

          海科貝特氏菌Cobetia│marina 質(zhì)量規(guī)格:95%,BR齊墩果

          白地霉Geotrichum│candidum 質(zhì)量規(guī)格:1:3000,BR青藤堿

          大腸埃希氏菌DH5α/797(797-PknB)Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:≥50 U/mg,sigma 原裝雙氫
          核酸雜交漂洗液CGRP(Mouse calcitonin gene related peptide) ELISA Kit  小鼠降鈣su基因相關(guān)肽規(guī)格: 48T

          MTL(Mouse Motilin) ELISA Kit  小鼠胃動(dòng)su規(guī)格: 48T

          SS(Mouse Somatostatin) ELISA Kit  小鼠生長(zhǎng)抑su規(guī)格: 48T

          Fbg(Mouse Fibrinogen) ELISA Kit  小鼠血纖蛋白原規(guī)格: 48T

          PAF(Mouse platelet activating factor) ELISA Kit  小鼠血小板活化因子規(guī)格: 48T

           


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