胞內(nèi)鈣掩蔽EGTA, AM實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：胞內(nèi)鈣掩蔽EGTA, AM
貨號：FSP072
產(chǎn)品規(guī)格：10 mg
分類：熒光核酸試劑
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素（LR）分析檢測試劑盒Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Sepharose® Bead Conjugate)100 ul

人白介素12（IL-12/P40）分析檢測試劑盒Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb300 ul

人β甘露糖苷酶（β Manase）分析檢測試劑盒SignalSilence® VPRBP siRNA I10 mg

人β淀粉樣蛋白25-35（Aβ25-35）分析檢測試劑盒Lipopolysaccharides (LPS)100 ul

人Prominin 2（PROM2）分析檢測試劑盒PC2 (D1E1S) XP® Rabbit mAb20 ul

人N端中段骨鈣素（N-MID-OT）分析檢測試劑盒PC2 (D1E1S) XP® Rabbit mAb100 ul

人MAX二聚化蛋白1（MXD1）分析檢測試劑盒Miro2 Antibody400 ul

人G蛋白偶聯(lián)受體152（GPR152/PGR5）分析檢測試劑盒Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Magnetic Bead Conjugate)100 ul

人CXC趨化因子受體3（CXCR3）分析檢測試劑盒BMAL1 (D2L7G) Rabbit mAb100 ul

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α（C/EBPα）分析檢測試劑盒LEF1 (C12A5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)500 ul

人Apelin 分析檢測試劑盒SimpleChIP® Human HSP70 Intron 1 Primers100 ul

人5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亞基（PRKAA2）分析檢測試劑盒PRNP (D3Q5C) Rabbit mAb100 ul

人Ⅱ型膠原C端肽（CTX-Ⅱ）分析檢測試劑盒Phospho-GSK-3β (Ser9) (D85E12) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

人Ⅱ型膠原（Col Ⅱ）分析檢測試劑盒IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

人26S蛋白酶體非ATP酶調(diào)節(jié)亞基11（PSMD11）分析檢測試劑盒P-Cadherin (12H6) Mouse mAb100 ul

人17-酮類固醇（17-KS）分析檢測試劑盒HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul

人12羥二十烷四烯酸（12-HETE）分析檢測試劑盒GPR50 (D1D6I) Rabbit mAb100 ul
胞內(nèi)鈣掩蔽EGTA, AM黑曲霉種屬: Aspergillus│niger凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 66生長條件: 24℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Phytophthora│cinnamomi Rands分離基物: 根系斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-27存儲條件: 定期移植法

Rhizobium│sp.分離基物: 珍珠葉相思斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 63生長條件: 28存儲條件: 定期移植法

Erysipelothrix│rhuriopathiae分離基物: 丹毒豬凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清定性培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;

Alternaria│bokurai凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法

Phanerochaete│chrysosporium凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分解木質(zhì)素。培養(yǎng)基: CM0017生長條件: 28-32℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Streptoverticillium│biverticillatopsis Yan et al.分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 益生菌培養(yǎng)基: 12生長條件: 30存儲條件: 定期移植法

Planktotalea│sp.分離基物: 沉積物/黃棕色沉積物凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 極地細(xì)菌培養(yǎng)基: 821生長條件: 15℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 痰凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 36℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計合成（費(fèi)用另計）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。