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兔N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGLU)試劑盒Anti-ATF2 Antibody酮酸激酶-M2抗體
兔速激肽受體1(TACR1)試劑盒Anti

產(chǎn)品分類：細(xì)胞培養(yǎng)

儲存條件  4℃,12個(gè)月

用途  Hanks' Balanced Salt Solution為含鈣鎂的Hanks平衡鹽溶液,常用于懸浮、清洗細(xì)胞。

注意事項(xiàng)  主要由氯化鈣、硫酸鎂、氯化鎂、氯hau鉀、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、碳酸氫鈉、氯化鈉、酚紅等組成。該粉劑溶解于水,如需無菌溶液,應(yīng)過濾除菌,不可高壓滅菌,并密閉保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

酪羥化(TH)TH ELISA Kit過氧化物酰基氧化2抗體包裝25g

跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)TMEM97/MAC30 ELISA Kit膽固?；D(zhuǎn)移1抗體包裝5g

克細(xì)胞蛋白(CC16)CC16 ELISA Kit磷化間變型淋巴瘤激抗體包裝1g

可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)sTRAIL ELISA Kit磷化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體包裝5g

可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit磷化有絲分裂激B/C抗體包裝1g

可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)sTM ELISA Kit磷化腺泡Acinus蛋白抗體包裝25g

可溶性血凝樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)sLOX-1 ELISA Kit磷化腎上腺能受體β2抗體包裝5g

可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)sEPCR ELISA KitAPS抗體包裝25g

可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sVEGF R1/sFlt1)sVEGF R1/sFlt1 ELISA Kit激活受體樣激1抗體包裝5g

可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)sICAM-1 ELISA Kit激活A(yù)受體1B抗體包裝100ml

可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)sTREM-1 ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝25ml

可溶性瘦受體(sLR)sLR ELISA Kit磷化A-Raf抗體包裝5ml

可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)sLOX-1 ELISA Kit酰基鞘脫酰2抗體包裝100ml

可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)sMHC-2 ELISA Kit脂肪特異性粘附分子抗體包裝1g

可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)sMHC-1 ELISA Kit腺相關(guān)病5抗體包裝5g

雙調(diào)蛋白（結(jié)腸直腸源性生長因子）抗體C反應(yīng)蛋白(CRP)Pictilisib (GDC-0941) is a potent inhibitor of PI3Kα/δ with IC50 of 3 nM in cell
Hanks平衡鹽粉劑CLEC5A/MDL1/FITC  熒光標(biāo)記C型凝集結(jié)構(gòu)域家族5成員AIgG高效氟菊酯 ,99%

CLEC13D/MMR1/CD206/FITC  熒光標(biāo)記巨噬甘露糖受體IgG高效氟菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 0μg/ml,u=2%，體:石油

Clostridium perfringens type D/FITC  熒光標(biāo)記兔抗D型產(chǎn)氣莢膜梭菌IgG高效氟菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 μg/ml,u=3%，體:石油

cofilin/FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠絲切蛋白IgG高效氟菊酯 ，96%

Phospho-Cofilin (Ser3) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化絲切蛋白IgG氟菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 0μg/ml,u=4%，體：正己烷

Cortactin/FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠皮層肌動蛋白IgG氟菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 μg/ml,u=5%，體：正己烷

Cortactin (phospho Tyr466) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化皮層肌動蛋白IgG菊酯 ，97.5%

COLEC12/CL-P1/FITC  熒光標(biāo)記凝集胎盤蛋白1IgG菊酯 ，99.7%