商品介紹:
測(cè)定意義: S-POD主要來源于土壤微生物,能夠氧化土壤有機(jī)物質(zhì)產(chǎn)生過氧化物,在腐殖質(zhì)的形成過程中具有重要作用。 測(cè)定原理: S-POD催化有機(jī)物質(zhì)氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。 自備用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板50mL(不允許快遞)、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4。△A測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
2-羥基-他英文名: 9-Bromo-10-phenylanthracene神經(jīng)特異蛋白酪磷N5抗體包裝25g
2-羥基阿托伐他 酰化-β-D-葡萄糖苷英文名: 2-Chloroanthracene足表達(dá)蛋白/轉(zhuǎn)錄因子21抗體包裝5g
2-羥基阿托伐他單鈉鹽二合物英文名: 9,10-Dichloroanthracene孕激受體抗體包裝100g
2-羥基阿托伐他內(nèi)酯英文名: 1,5-Dibromoanthracene神經(jīng)突觸蛋白PCLO抗體包裝25g
2-羥基雌二英文名: 1,8-Diiodoanthracene早老γ分泌2抗體包裝100g
2-羥基雌激英文名: 9-Phenylanthracene泛激1抗體包裝25g
2-羥基奈韋平英文名: N-Phenyl-9-anthramine泛激2抗體包裝500g
2-羥基炔雌英文名: 1-Iodonaphthalene泛激3抗體包裝25g
2-羥基英文名: Benz[a]anthracenep53調(diào)控PA26核蛋白抗體包裝5g
2-巰基英文名: 1H-Cyclopenta[l]phenanthrene26S蛋白調(diào)節(jié)亞型S5a抗體包裝10g
2-去酰-2-基巴豆酰多烯紫杉(多烯紫杉雜質(zhì)...英文名: Cyclopenta[fg]tetracene-1,2-dione絲/蘇蛋白磷3B抗體包裝50g
2-去丁基-2-異戊基-5-基伊曲康唑英文名: Dibenz[a,h]anthracene蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1α抗體包裝100g
2-去乙氧基-2-羥基-1氫-1-乙基坎地沙坦酯英文名: Dibenzo[b,def]chrysene泛連接抗體包裝25g
2-十八烯單甘油酯英文名: 1,2:8,9-DibenzopentacenePGBD3蛋白抗體包裝100ml
2-溴-比多巴英文名: Dibenzo[g,p]chrysene泛激4抗體包裝25ml
強(qiáng)酒海桿菌Marinobacter│vinifirmus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷[NMDA]受體亞基ε-2試劑盒維生D2;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
食戴爾福特菌Delftia│acidovorans 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品孤腓肽試劑盒維生B1(鹽硫);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;
核盤菌Sclerotinia│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品鉤端螺旋體IgM試劑盒維生K1;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
土壤過氧化物酶(SPOD)測(cè)試盒100管/96樣短小芽孢桿 三異丁基二氫二噻3-羥-3-甲戊二酸單酰還原Elisa
蠟狀芽孢桿 1,1,2-乙烷三羧酸三乙酯色P4502D6Elisa
黑曲霉 3--4-甲氧基苯葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2Elisa
奇異硬皮馬勃 3-溴-5-ⅤElisa
金黃色葡萄球 3-溴-5-ⅢElisa
巨大芽孢桿 3,5-二氟-2-吡啶羧酸ⅩElisa
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 (R)-3-甲基嗎啉肝生長(zhǎng)因子激活物Elisa
黑色附球霉 2-甲基丁酸乙酯胃蛋白原Elisa
塔賓曲霉 苯甲酰苯角蛋白18-M30Elisa
朱黃籃狀 硫酸鋯四水合物角蛋白18-M65Elisa
大腸埃希 對(duì)氨基苯甲酰氨基苯甲酰酮戊二酸Elisa
腸桿屬 1-己基溴化吡啶翁性T相關(guān)抗原4Elisa
香菇 4-羥基-7-氮雜13-羥基十八碳二烯酸Elisa
膠孢鐮孢 鉑(鉑碳)低氧誘導(dǎo)因子-αElisa
芥黃蜜環(huán) 4-溴-2,6-二甲酸去乙?;疭irtuin-1Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。