伊文思藍(lán)染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：雞血小板親和蛋白2(PKP2)試劑盒Anti-CA14 AntibodyBcl-xL蛋白抗原
雞緊密連接蛋白Claudin 4(CLDN4)試劑盒 Anti-CA14 Antibody磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原
雞N端中段骨鈣素(N-MID-OT)試劑盒Anti-CA181 Antibody丁酰膽堿脂酶抗原(N端)
雞單氧化酶(MAO)試劑盒Anti

產(chǎn)品分類：神經(jīng)染色

儲(chǔ)存條件：4℃,避光,12個(gè)月

用途：組織切片染色,測(cè)定血腦屏障完整性 、染色區(qū)分活細(xì)胞、測(cè)定血容量

注意事項(xiàng)：主要由依文思藍(lán)、磷酸鹽溶液等組成。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

球孢白僵菌2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體Human FGF16 ELISA Kit豚鼠白介4(IL-4)免疫試劑盒

強(qiáng)壯根瘤菌科凱恩氏綜合癥相關(guān)蛋白/早衰蛋白CSA抗體Human FGF17 ELISA Kit豚鼠白介22(IL-22)免疫試劑盒

雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)磷化角蛋白8抗體Human FMN2 ELISA Kit豚鼠白介2(IL-2)免疫試劑盒

日本色鹽桿菌磷化角蛋白8抗體Human FGF18 ELISA Kit豚鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌磷化角蛋白18抗體Human FDX1 ELISA Kit豚鼠白介1β(IL1B)免疫試劑盒

腐皮鐮孢菌胞粘蛋白2抗體Human FDXACB1 ELISA Kit豚鼠白介18(IL-18)免疫試劑盒

新鞘菌色CPA6抗體Human FEM1B ELISA Kit豚鼠白介17(IL-17)免疫試劑盒

戊糖片球菌色CYP3A抗體Human FDPS ELISA Kit豚鼠白介13(IL-13)免疫試劑盒

馬鈴薯炭疽病菌色cP450 CYP20A1抗體Human FEM1C ELISA Kit豚鼠白介12(IL-12/P70)免疫試劑盒

雅致小克銀漢霉色cP4501B1抗體Human FKBP1A ELISA Kit豚鼠白介10(IL-10)免疫試劑盒

大腸埃希菌色cP450 CYP26A1抗體Human FEN1 ELISA Kit豚鼠白介1(IL-1)免疫試劑盒

短乳桿菌磷化周期E抗體Human FGFBP3 ELISA Kit豚鼠白蛋白免疫試劑盒

火木層孔菌磷化周期E2抗體Human FGFR1OP ELISA Kit豚鼠γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

小麥蒼白桿菌周期M3抗體Human FHIT ELISA Kit豚鼠α干擾(IFN-α)免疫試劑盒

鹽海洋菌屬周期Y/X抗體Human FKBP1B ELISA Kit豚鼠P物質(zhì)(SP)免疫試劑盒

蘋果木層孔菌磷化周期D3抗體Human FER ELISA Kit豚鼠Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6)免疫試劑盒

谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRα1抗試劑盒

平菇Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRα1防御試劑盒丁

傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRα1β糖蛋白試劑盒氫高烏
伊文思藍(lán)染色液BP(Human Bullous Pemphigoid) ELISA Kit  人大皰性類天皰瘡規(guī)格： 48T

Human Enterovirus ELISA Kit  人腸病毒規(guī)格： 48T

Human echinococcus antibody IgG ELISA Kit  人包蟲(chóng)IgG規(guī)格： 48T

PT(Human Pertussiu Toxin) ELISA Kit  人百日咳毒su規(guī)格： 48T

C.albicans(Human Candida Albicans) ELISA Kit  人白色念珠jun規(guī)格： 48T