詳細介紹
產品分類:結締染色
儲存條件:4℃,避光,6個月
用途:又稱MGT染色液。肌肉活檢,肌纖維呈青綠色,膠原纖維呈亮綠色,細胞核呈紫色,線粒體呈紅色。
注意事項:新鮮材料盡快進行冰凍切片。Gomori染色液應冰箱內存放,超過有效期建議丟棄以保證染色鮮亮。分化時間應根據(jù)染液配制時間適當調整,時間越長,分化時間約短。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
改良Gomori三色染色液 | 4×50ml | FS-R6712 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
土荊皮乙(標準品) 2'-Deoxyguanosine monohydrate透明質合成3抗體包裝250mg
土壟大白蟻巢(標準品) 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白56抗體包裝1g
土木香(標準品) 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體包裝5g
土木香內酯(標準品) 2'-Deoxyadenosine monohydrate熱休克蛋白相關蛋白4抗體包裝100g
土牛膝(標準品) DNA, Fishsperm透明質合成2抗體包裝25g
兔耳草(標準品) DNA from salmon sperm 同源盒基因HOXA3蛋白抗體包裝5g
菟絲子(南方菟絲)(標準品) 5-Fluoro-2'-deoxycytidine同源盒基因HOXA4蛋白抗體包裝1g
蛻皮激(標準品) 5-Fluoro-2'--deoxyuridine同源盒基因HOXA6蛋白抗體包裝25g
脫落(標準品) Guanosine同源盒基因HOXA7蛋白抗體包裝5g
脫氫齒孔 Guanosine羥基類固(17β)脫氫4/17β-HSD4抗體包裝1g
脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿(標準品) GDP Disodium Salt血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體包裝100g
脫內酯(標準品) SU-11274血紅結合蛋白1抗體包裝25g
脫內酯琥珀半酯(標準品) Uridine血紅蛋白α抗體包裝500g
脫羊藿(標準品) Uridine結合球蛋白β抗體包裝100g
脫氧熊果苷(標準品) UTP, Trisodium Salt海馬豐富基因轉錄蛋白1抗體包裝25g
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品免疫球蛋白重鏈可變區(qū)試劑盒遼東楤木皂苷Ⅹ;Araloside X
三隔鐮刀菌Gibberella│tricincta El-Gholl McRitchie Schoult. & Ridings 質量規(guī)格:>99%免疫球蛋白重鏈試劑盒硫辛;Lipoic acid
鏈孢囊菌Streptosporangium│sp. 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品免疫球蛋白輕鏈lambda試劑盒羅丹明B;Rhodamine B
改良Gomori三色染色液TIEG1/KLF(TGF-beta inducible early response gene 1) TGF-β誘導早期應答基因1抗原規(guī)格: 0.5mg
TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I) 轉移生長因子–β受體1抗原規(guī)格: 0.5mg
Thioredoxin 1(ERdj5) 硫氧還蛋白抗原規(guī)格: 0.5mg
Tie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪氨suan激mei1抗原規(guī)格: 0.5mg
Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生長因子樣域酪氨suan激mei2抗原規(guī)格: 0.5mg