孔雀石綠水溶液公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊集落激因子2受體β (CSF2Rβ)試劑盒Anti-CTU1 Antibody白血病抑制因子抗原
綿羊重肽鐵蛋白(FTH)試劑盒Anti-CUL2 Antibody白血病抑制因子受體抗原
綿羊八聚體轉(zhuǎn)錄因子2A(OTF2A)試劑盒 Anti-CUL3 AntibodyNogo受體作用蛋白抗原
綿羊粘蛋白1(MUC1)試劑盒Anti-CUL5 Antibody無(wú)

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：微生物染色

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：用于芽孢染色。真菌染色，尤其可用于布氏桿菌染色又稱科茲洛夫斯基染色

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

枯草芽孢桿菌羊毛甾14α-去甲基化蛋白抗體Human PDCD1LG1(Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1) ELISA Kit人神經(jīng)絲蛋白H(NF-H)免疫試劑盒

申氏不動(dòng)桿菌*補(bǔ)體C5抗體Human NTRK2(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) ELISA Kit人神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體(NGFR)免疫試劑盒

單色下皮黑孔菌5號(hào)染色體開放閱讀框24抗體Human PⅢCP(Procollagen Ⅲ C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit人神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)免疫試劑盒

海欖雌小單孢菌5號(hào)染色體開放閱讀框42抗體Human NTRK3(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) ELISA Kit人神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)免疫試劑盒

致密曲霉5號(hào)染色體開放閱讀框49抗體Human PACAP-38(Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit人神經(jīng)母瘤抗體(NB-Ab)免疫試劑盒

植物乳桿菌5號(hào)染色體開放閱讀框35抗體Human PADI4(Peptidyl Arginine Deiminase Type IV) ELISA Kit人(GM1)抗體(IgM)免疫試劑盒

云南紅球菌中心體蛋白192抗體Human MT3(Metallothionein 3) ELISA Kit人(GM1)抗體(IgG)免疫試劑盒

動(dòng)球菌中心體蛋白27抗體Human N-ERC/Mesothelin ELISA Kit人神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒

新城疫病中心體蛋白290抗體Human MT1M(Metallothionein 1M) ELISA Kit人神經(jīng)激肽B(NKB)免疫試劑盒

嗜鹽堿球菌中心體蛋白63抗體Human NFE2L2(Nuclear Factor, Erythroid Derived 2 Like 2) ELISA Kit人神經(jīng)調(diào)節(jié)1亞型HRGβ1(NRG1)免疫試劑盒

紫萁小菇中心體蛋白70/p10結(jié)合蛋白抗體Human NRG-3(Neuregulin 3) ELISA Kit人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)免疫試劑盒

彎孢菌中心體蛋白72抗體Human OVA sIgG(Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG3)免疫試劑盒

Curvularia  cocis Matsush. 中心體蛋白95抗體Human OXA(Orexin A) ELISA Kit人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)免疫試劑盒

謝瓦曲霉中心體蛋白89抗體Human NRG-4(Neuregulin 4) ELISA Kit人神經(jīng)穿透1(NPTX-1)免疫試劑盒

*蜜環(huán)菌CERD4蛋白抗體Human NT-ProANP(N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit人上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫試劑盒

波茨坦芽孢桿菌CES1P1蛋白抗體Human NTRK3(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) ELISA Kit人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：BSCD117分子試劑盒丁香樹脂雙葡萄糖苷

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>97%(HPLC),BCCD10分子試劑盒當(dāng)藥寧

云南節(jié)叢孢Arthrobotrys│yunnanensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCC趨化因子受體7試劑盒丹參新
孔雀石綠水溶液KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit  人mei6規(guī)格： 96T

PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit  人磷suan化乙酰輔meiA規(guī)格： 48T

PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit  人磷suan甘油suan變位mei2規(guī)格： 48T

PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit  人前列腺suD合成mei規(guī)格： 48T

PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit  人肽酰脯氨酰異構(gòu)mei(親環(huán)蛋白)樣1規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。