一種近紅外Cy活性染料用于小鼠活體成像-瑞禧生物

Cyanine菁染料是近紅外熒光染料中的一類(lèi)熒光染料，和組織的自發(fā)熒光在近紅外波段小，能提供的特異性和靈敏度，菁染料是二個(gè)非區(qū)域電荷的氮原子通過(guò)聚合搭橋的方式形成的一種分子。

由于Cy染料的結(jié)構(gòu)式特點(diǎn)，他們往往有著的消選光系數(shù)，數(shù)值達(dá)100,000 Lmol-1cm-1

Cy系列的熒光染料我們一般分為磺酸化菁染料和非磺酸化菁染料non-sulfonated cyanines, and sulfonated cyanines.他們的光譜性質(zhì)基本相同，和蛋白 小分子修飾反應(yīng)也幾乎是一樣的，*不同的在于他們的溶解性，非磺酸化菁染料是脂溶性的，磺酸化菁染料是水溶性的，結(jié)構(gòu)式上也會(huì)有些不同。

先我們用不同的活性基團(tuán)的Cyanine菁染料和相應(yīng)的活性基團(tuán)的生物分子或小分子發(fā)生反應(yīng)，鏈接到一起。

Cy3 Cyanine3 NHS ester和帶NH2的分子連接

Cy7 Cyanine7 maleimide和帶SH的分子或生物分子連接

Cy5 Cyanine5 amine和帶NHS的分子或小分子連接

Cyanine5.5 azide和Cyanine3.5 alkyne用于連接DNA和oligonucleotides

Cyanine3/5/7-分子或小分子多肽用于小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)步驟如下：

SPF級(jí) BALB/C裸鼠，6～8 周齡, 18～20克, 實(shí)驗(yàn)前24 h 自由進(jìn)食、飲水。

于實(shí)驗(yàn)裸鼠腹腔內(nèi)注射2%戊巴比妥鈉300μL(215 mg/ kg)麻醉。將裸鼠俯臥位平放于小多光譜活體成像的記錄暗箱中。

實(shí)驗(yàn)時(shí)將Cy7 或Cy7 標(biāo)記的生物分子或DMSO 稀釋后,于裸鼠尾靜脈注射200μL( 0.5 mg/g) [佳用量和時(shí)間需要客戶(hù)根據(jù)自己的儀器和試劑等條件] ,每5min 記錄1張?jiān)隗w內(nèi)發(fā)射熒光的成像圖片,分析熒光的分布情況。對(duì)照鼠不注射，進(jìn)行同時(shí)記錄。記錄結(jié)束后迅速解剖裸鼠的心、、脾、、腎等臟器，進(jìn)行成像。

Cy7 檢測(cè)時(shí)激發(fā)波長(zhǎng)700～770 nm 帶通 ,發(fā)射波長(zhǎng)790 nm 長(zhǎng)通。液晶可調(diào)諧濾光片掃描范圍 780～950 nm ,掃描步進(jìn)10 nm。曝光時(shí)間為500 ms。

不同的時(shí)間不一樣，注射入裸鼠體內(nèi)，熒光立即分布全身，然后逐步向膀胱聚集，呈現(xiàn)的腎排泄的特點(diǎn)一般4~6 小時(shí)，快得只有30 分鐘;如果是骨骼等部位靶點(diǎn)的Cy7 標(biāo)記，有客戶(hù)反映一周后活體成像仍能檢測(cè)到熒光成像。

器官切片觀察：將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4 小時(shí)以上，0%，20%，30%PBS 蔗糖依次沉底，20μm 切片，多聚賴(lài)氨酸洗過(guò)的載玻片貼片，晾干，DAPI 染色。共聚焦顯微鏡觀察，激光器為氦氖 633 nm。

西安瑞禧生物科技有限公司產(chǎn)品：

Cyanine3 alkyne

Cy3 alkyne

Cyanine3 azide

Cy3 azide

Cy3 N3

Cyanine3 carboxylic acid  1144107-76-5

Cy3 carboxylic acid

Cyanine3 hydrazide

Cyanine3 maleimide

Cy3 maleimide

Cyanine3 NHS ester   1032678-38-8

Cy3 NHS ester

Cyanine3.5 azide

Cyanine3.5 carboxylic acid  1144107-79-8

Cyanine3.5 NHS ester

Cy3.5 NHS ester

Cyanine5 alkyne

Cyanine5 amine

Cy5 amine

Cy5 NH2

Cyanine5 azide

Cy5 N3

Cyanine5 Boc-hydrazide

Cyanine5 carboxylic acid

Cyanine5 hydrazide

Cyanine5 maleimide

Cy5 maleimide

Cyanine5 NHS ester  1032678-42-4

Cy5 NHS ester

Cyanine5.5 alkyne

Cyanine5.5 azide

Cyanine5.5 carboxylic acid  1144107-80-1

Cyanine5.5 maleimide

Cyanine5.5 NHS ester

Cyanine7 amine   1650635-41-8

Cy7 amine

Cy7 NH2

Cyanine7 azide

Cy7 azide

Cyanine7 carboxylic acid

Cyanine7 maleimide

Cy7 maleimide

Cyanine7 NHS ester

Cy7 NHS ester

Cyanine7.5 amine

Cyanine7.5 azide

Cyanine7.5 carboxylic acid   1686147-68-1

Cyanine7.5 maleimide

Cyanine7.5 NHS ester

Sulfo-Cyanine 5 NHS ester

Sulfo-Cy 5 NHS ester

Sulfo-Cyanine3 azide

Sulfo-Cy3 azide

Sulfo-Cyanine3 carboxylic acid

Sulfo-Cyanine3 maleimide

Sulfo-Cy3 maleimide

Sulfo-Cyanine3 NHS ester

Sulfo-Cy3 NHS ester

Sulfo-Cyanine5 alkyne

Sulfo-Cyanine5 azide

Sulfo-Cy5 azide

Sulfo-Cyanine5 carboxylic acid   1121756-16-8

Sulfo-Cyanine5 maleimide

Sulfo-Cy5 maleimide

Sulfo-Cyanine7 azide

Sulfo-Cyanine7 carboxylic acid

Sulfo-Cyanine7 NHS ester

Sulfo-Cy7 NHS ester

以上資料源于西安瑞禧生物科技有限公司

西安瑞禧生物科技有限公司

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