人D-乳酸(D-Lactate)Elisa 試劑盒,Human D-lactic acid(D-LA)ELISA Kit,慧穎生物特惠價格中:!
檢測范圍:40μg/L -1600μg/L
規(guī)格:48人份和96人份
有效期:六個月
保存溫度:4°C
適合樣本:人血清、血漿、組織液等
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
凡購買慧穎生物人D-乳酸(D-Lactate)Elisa 試劑盒,提供免費代測服務(wù),收到樣本后,三個工作日內(nèi)出結(jié)果。本試劑盒僅供科研使用,不得用于其它。
人D-乳酸(D-Lactate)Elisa 試劑盒所需實驗材料:
儀器名稱 | 儀器來源 |
酶 標(biāo) 儀 | 芬蘭(Labsystems Multiskan MS) |
洗 板 機 | 芬蘭(Thermo Labsystems) |
離 心 機 | 微量高速離心機(國產(chǎn)) |
移液器 | 吉爾森P型移液器(Pipetman) |
培 養(yǎng) 箱 | 隔水式恒溫培養(yǎng)箱(國產(chǎn)) |
人D-乳酸(D-Lactate)Elisa 試劑盒操作流程:
- 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:標(biāo)準(zhǔn)品按照說明書稀釋好五個梯度,各個梯度每孔加樣量都為50μl,
- 加樣:分別設(shè)空白孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
- 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 配液洗滌:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用;小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
- 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
- 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
- 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
- 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)
- 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
- 計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為綜坐標(biāo),OD值為橫坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo) 準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。