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          [供應(yīng)]人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞

          貨物所在地:上海上海市

          更新時(shí)間:2024-09-25 21:00:07

          有效期:2024年9月25日 -- 2025年3月25日

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          人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞

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          冷凍細(xì)胞操作步驟:1.收集對數(shù)生長期細(xì)胞;
          2.以25μl臺盼藍(lán)溶液稀釋25μl細(xì)胞懸液;用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)并計(jì)算細(xì)胞存活率(至少應(yīng)該在90%以上);
          3.細(xì)胞懸液在4℃ 條件下200磄離心10分鐘;
          4.將沉淀的細(xì)胞重新懸浮在冷凍液中(大約5?06細(xì)胞/0.5 ml 冷凍液);
          5.將細(xì)胞懸液加入到冷凍管中,每管0.5 ml;
          6.將冷凍管置于-80℃冰箱中;
          7.24小時(shí)后,將冷凍管移入液氮罐中;
          8.在記錄本或電腦中記錄下每一個(gè)冷凍管的位置以確保在以后應(yīng)用時(shí)能夠找到每一個(gè)冷凍管。

          細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟:
          1.將冷凍管迅速由液氮轉(zhuǎn)入到37℃水浴中,冷凍管的頂部保持在水面以上以避免任何污染,不定時(shí)攪拌加速解凍;
          2.當(dāng)細(xì)胞*解凍后,用含70%乙醇的紗布擦拭冷凍管消毒;
          3.將解凍后細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含4℃預(yù)平衡培養(yǎng)液的試管中;
          4.細(xì)胞懸液在4℃下200磄離心10分鐘;
          5.棄上清,將細(xì)胞重新懸浮在新鮮培養(yǎng)液中;
          6.將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,CO2孵箱中培養(yǎng);
          7.是用倒置顯微鏡檢查細(xì)胞存活率以及細(xì)胞密度,如果細(xì)胞密度過高,用培養(yǎng)液稀釋至適宜濃度。

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