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        1. 上海士鋒生物科技有限公司

          ELISA試劑盒,進(jìn)口,中檢所標(biāo)準(zhǔn)品,生物試劑,培養(yǎng)基,中間體

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          超快核酸電泳液

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          • 上海士鋒生物科技有限公司
          • 2016-05-07 21:11:19
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          公司合作伙伴:中科院化學(xué)研究所,清華大學(xué),南開(kāi)大學(xué),燕山大學(xué),第三軍醫(yī)大學(xué),山東魯南制藥,深圳海王藥業(yè),修正集團(tuán),康師傅集團(tuán)等

          PCR原理

            DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在DNA聚合酶的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,加入設(shè)計(jì)引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。
            但是,DNA聚合酶在高溫時(shí)會(huì)失活,因此,每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶,不僅操作煩瑣,而且價(jià)格昂貴,制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展。
            發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大  taq酶[1]量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
            PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基互補(bǔ)配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈,重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。

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          甲基環(huán)戊烯醇酮/3-甲基環(huán)戊烷-1,2-二酮/3-甲基-1,2-環(huán)戊二酮/2-羥基-3-甲基-2-環(huán)戊烯酮/3-Methyl-1,2-SFySFloSFentanedioneBR,98%765-70-8RT 
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          標(biāo)準(zhǔn)品,99% 
          醛固酮/醛甾酮/醛固醇酮/AldosteroneBR,98.5%52-39-12~8℃ 
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          人參皂苷RSF/人參皂甙RSF/GinsenosideRSF分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%11021-14-0RT 
          人參皂苷Rd/人參皂甙Rd/GinsenosideRd分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%52705-93-8RT 
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