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推薦生長條件
（適用于KWKK-STIK 和LYFO DISK 產(chǎn)品）
如何選擇的菌種生長條件
1. zui初的生長是在非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上。除非特殊情況或特別推薦，zui初的生長一般不考慮液體培養(yǎng)基。這是由于在液體培養(yǎng)基中獲得凍干菌株的純種比較困難，污染所帶來的雜菌可能會過度生長，影響得到目標(biāo)菌株的純種。
2. 以下列出可供選擇的瓊脂培養(yǎng)基和相應(yīng)的生長條件，供各實驗室培養(yǎng)菌種時參考。
方法 1
ü 胰蛋白胨大豆瓊脂，非選擇性羊血瓊脂，標(biāo)準(zhǔn)計數(shù)平板，或營養(yǎng)瓊脂-----35℃，正常環(huán)境，24-48小時。
方法 2
ü 非選擇性羊血瓊脂----- 35℃，正常環(huán)境，24-48小時。
方法 3
ü 巧克力瓊脂（含血紅蛋白和NAD）-----35℃，5％－10％ CO2環(huán)境，24-48小時。
方法 4
ü 厭氧血瓊脂-----35℃，厭氧環(huán)境，48-72小時；
ü 部分專性厭氧菌可能需要5－7天，才能充分生長；
ü 對于梭菌，以下新鮮配制的平板也可選用：營養(yǎng)瓊脂，胰蛋白胨大豆瓊脂和標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)瓊脂（標(biāo)準(zhǔn)方法瓊脂）；只是需額外培養(yǎng)24小時。
方法 5
ü 沙保氏葡萄糖Emmons瓊脂-----25℃，正常環(huán)境，2-7天；
ü 沙保氏葡萄糖瓊脂-----25℃，正常環(huán)境，2-7天；
ü 非選擇性羊血瓊脂也可選用；
ü 以下培養(yǎng)基也可選用：營養(yǎng)瓊脂，胰蛋白胨大豆瓊脂，馬鈴薯葡萄糖瓊脂和標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)瓊脂，只是需額外培養(yǎng)24小時。
方法 6
ü 巧克力瓊脂（含血紅蛋白和NAD）-----35℃，微需氧環(huán)境，48-72小時。
方法 7
ü Lowenstein Jensen瓊脂或Middlebrook瓊脂-----35℃，5％－10％ CO2環(huán)境或正常環(huán)境，7天。
方法 8
ü 緩沖活性炭酵母提取物瓊脂-----35℃，正常環(huán)境，3-5天。
方法 9
ü V 瓊脂或巧克力瓊脂-----35℃，5％－10％ CO2環(huán)境，48小時。
方法 10
ü 腦心浸出液肉湯，胰蛋白胨大豆肉湯，或0.85％生理鹽水均可選用。
ü 非選擇性羊血瓊脂或胰蛋白胨大豆瓊脂-----35℃，正常環(huán)境，24-48小時。
方法 11
ü 先接種于MRS肉湯中-----35℃，正常環(huán)境，48小時；
然后接入含羊血的哥倫比亞CNA培養(yǎng)基中-----35℃，5％ CO2環(huán)境，48小時。
方法 12
ü 馬鈴薯葡萄糖瓊脂-----45℃，正常環(huán)境，48-72小時。
方法 13
ü 取一顆凍干顆粒于10 B 精氨酸肉湯中，若是KWIKSTIK則溶于自帶的培養(yǎng)基中。作系列梯度稀釋（例如，1:10，1:100，1:1000，1:10000）。在35℃下，正常環(huán)境中培養(yǎng)。精氨酸瓶中液體一旦變成粉紅色（24-48小時），轉(zhuǎn)接0.1 mL到A-8瓊脂，劃線分離。人型支原體，35℃，5-10%CO2環(huán)境；解脲支原體，35℃，厭氧環(huán)境，培養(yǎng)96個小時。使用顯微鏡觀察平板菌落。
方法14
ü 取一顆凍干顆粒于SP4葡萄糖肉湯中，若是KWIKSTIK則溶于自帶的培養(yǎng)基中。作系列梯度稀釋（例如，1:2，1:4，1:8，1:16，1:32）。在35℃下，正常環(huán)境中培養(yǎng)。一旦肉湯從紅色變成黃色（1-4周），轉(zhuǎn)接0.2 mL到SP4葡萄糖瓊脂，劃線分離。不要使用棉質(zhì)拭子或木質(zhì)棒。35℃，CO2環(huán)境中，可以使用燭缸，培養(yǎng)5-15天。使用顯微鏡觀察平板菌落。
方法15
ü 取一顆凍干顆粒于10 B 精氨酸肉湯中，若是KWIKSTIK則溶于自帶的培養(yǎng)基中。作系列梯度稀釋（例如，1:10，1:100，1:1000）。在35℃下，正常環(huán)境中培養(yǎng)。一旦肉湯從黃色變成粉紅色（48-72個小時），轉(zhuǎn)接0.2 mL到SP4葡萄糖瓊脂，劃線分離。不要使用棉棒或者木質(zhì)棒，將平板至于35℃厭氧環(huán)境中培養(yǎng)3-6天。使用顯微鏡觀察平板菌落。
方法16
ü Leeming Notman瓊脂，30℃下，正常環(huán)境中培養(yǎng)72個小時。
各類菌株的推薦培養(yǎng)方法如下：
| Acinetobacter sp. | 不動桿菌屬 | 方法1 | ||
| Acetobacter sp. | 醋桿菌屬 | 方法3 | ||
| 注：25℃培養(yǎng)3-4天。 | | | ||
| Actinobacillus sp. | 放線桿菌屬 | 方法3 | ||
| Actinomyces sp. | 放線菌屬 | 方法4 | ||
| Aerococcus sp. | 氣球菌屬 | 方法1 | ||
| Aeromonas sp. | 氣單胞菌屬 | 方法2 | ||
| 注：Aeromonas hydrophila （嗜水氣單胞菌）應(yīng)在30℃培養(yǎng)。Aeromonas salmonicida（殺鮭氣單胞菌）應(yīng)在25℃培養(yǎng)。 | ||||
| Alcaligenes sp. | 產(chǎn)堿桿菌 | 方法1 | ||
| Alicyclobacillus sp. | 脂環(huán)酸芽孢桿菌 | | ||
| Alloiococcus sp. Method 2 | | | ||
| Aneurinibacillus sp. | 硫胺素芽孢桿菌屬 | 方法1 | ||
| Aquaspirillum sp. | 水螺菌屬 | 方法1 | ||
| 注：25℃培養(yǎng)6天。 | | | ||
| Arcanobacterium sp. | 隱秘桿菌屬 | 方法2 | ||
| Arthrobacter sp. | 節(jié)桿菌屬 | 方法1 | ||
| | ||||
| | 曲霉菌屬 | 方法5 | ||
| Bacillus sp. | 芽孢桿菌屬 | 方法1 | ||
| 注：一些芽孢桿菌屬經(jīng)證明在室溫下保存后的傳代恢復(fù)率高于在2-8℃中保存的。 | ||||
| Bacteroides sp. | 擬桿菌屬 | 方法4 | ||
| | ||||
| Bifidobacterium sp. | 雙岐桿菌屬 | 方法4 | ||
| Bordela sp. | 博德特氏菌屬 | 方法3 | ||
| 注：可能需要一周的培養(yǎng)時間；正常環(huán)境也可。 注：Bordela pertussis （百日咳桿菌） （MicroBioLogics 目錄號0843） 需添加了15%去纖維蛋白羊血的包姜氏（Bordet Gengou）培養(yǎng)基。 | ||||
| Brevibacillus sp. | 短芽孢桿菌屬 | 方法1 | ||
| Brevundimonas sp. | 短波單胞菌屬 | | ||
| Brochothrix sp. | 環(huán)絲菌屬 | 方法1 | ||
| 注：25℃培養(yǎng)。 | | | ||
| Budvicia sp. | 布戴約維采菌屬 | 方法1 | ||
| 注：25℃培養(yǎng)。 | ||||
| Burkholderia sp. | 伯克霍爾德菌屬 | | ||
| Campylobacter sp. | 彎曲桿菌屬 | 方法6 | ||
| | ||||
| Candida sp. | 念珠菌屬 | 方法5 | ||
| Capnocytophaga sp. | 噬二氧化碳菌屬 | 方法3 | ||
| Cellulosimicrobium sp. | 纖維微細(xì)菌 | 方法1 | ||
| Chryseobacterium sp. | 金黃桿菌屬 | 方法1 | ||
| Citrobacter sp. | 檸檬酸桿菌屬 | 方法1 | ||
| Cladosporium sp. | 枝孢霉屬 | 方法5 | ||
| Clostridium sp. | 梭菌屬 | 方法4 | ||
| 注：Clostridium baratii（巴氏梭菌） 只在厭氧血平板上生長。 | ||||
| Corynebacterium sp. | 棒桿菌屬 | 方法1 | ||
| Cryptococcus sp. | 隱球菌屬 | 方法5 | ||
| 注：Cryptococcus（隱球菌）需在25℃培養(yǎng)。 | ||||
| Deinococcus sp. | 異常球菌屬 | 方法1 | ||
| Delftia sp. | 代爾夫特菌屬 | 方法1 | ||
| Edwardsiella sp. | 愛德華菌屬 | 方法1 | ||
| Eggerthella sp. | 埃格特菌 | 方法4 | ||
| Eikenella sp. | 埃肯菌屬 | 方法3 | ||
| Enterobacter sp. | 腸道細(xì)菌屬 | 方法1 | ||
| Enterococcus sp. | 腸球菌屬 | 方法1 | ||
| Erysipelothrix sp. | 丹毒絲菌屬 | 方法2 | ||
| Escherichia coli | 大腸桿菌 | 方法1 | ||
| Exiguobacterium sp. | 微小桿菌屬 | 方法1 | ||
| Finegoldia sp. | 芬戈爾德菌屬 | 方法4 | ||
| 注：厭氧環(huán)境中培養(yǎng)72-96小時。 | ||||
| Flavobacterium sp. 產(chǎn)黃菌屬 | 方法1 | |||
| 注：30℃培養(yǎng)。 | ||||
| Fluoribacter sp. | 熒光桿菌屬 | 方法8 | ||
| Fusarium sp. | 鐮刀菌屬 | 方法5 | ||
| Fusobacterium sp. | 梭桿菌屬 | 方法4 | ||
| Gardnerella sp. | 加德納氏菌屬 | 方法9 | ||
| Gemella sp. | 兼性雙球菌屬 | 方法4 | ||
| Geobacillus sp. | 地芽孢桿菌屬 | 方法1 | ||
| 注：Geobacillus stearothemophilus （嗜熱脂肪地芽孢桿菌）需在55℃培養(yǎng)。Geobacillus stearothemophilus，MBL貨號為0137，在羊血瓊脂上不能生長。 | ||||
| Geotrichum sp. | 地絲菌屬 | 方法5 | ||
| Haemophilus sp. | 嗜血桿菌屬 | 方法3 | ||
| Hafnia sp. | 哈夫尼菌屬 | 方法1 | ||
| Issatchenkia sp. | 伊薩酵母屬 | 方法5 | ||
| Kingella sp. | 金氏桿菌屬 | 方法2 | ||
| 注：在5-10% CO2 環(huán)境下培養(yǎng)。 | ||||
| Klebsiella sp. | 克雷伯氏菌屬 | 方法1 | ||
| Kloeckera sp. | 克勒克酵母屬 | 方法5 | ||
| Kocuria sp. | 庫克菌屬 | 方法1 | ||
| 注：K.糠疹應(yīng)在25℃培養(yǎng)。 | ||||
| Lactobacillus sp. | 乳酸桿菌 | 方法2 | ||
| 注：L. acidophilus （嗜酸乳桿菌）, L. casei （干酪乳桿菌）, L. delbrueckii （德氏乳桿菌） 和L.gasseri （加氏乳桿菌）需用方法11。 | ||||
| Lactococcus sp. | 乳球菌屬 | 方法2 | ||
| Leclercia sp. | 勒克菌屬 | 方法1 | ||
| Legionella sp. | 軍團(tuán)菌屬 | 方法8 | ||
| | 李斯特菌屬 | 方法1 | ||
| Macrococcus sp. | 巨型球菌屬 | 方法1 | ||
| Malassezia sp. | 馬拉色氏霉菌屬 | 方法16 | ||
| Mannheimia sp. | 曼海姆菌屬 | 方法1 | ||
| Methylobacterium sp. | 甲基桿菌屬 | 方法1 | ||
| 注：25℃培養(yǎng)。在標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)瓊脂上生長。 | ||||
| Microbacterium sp. | 細(xì)桿菌屬 | 方法1 | ||
| 注：30℃培養(yǎng)。 | | | ||
| Micrococcus sp. | 微球菌屬 | 方法1 | ||
| 注：胰蛋白胨大豆瓊脂或非選擇性的羊血瓊脂對于貨號0337和0689是的生長培養(yǎng)基。 | ||||
| Micromonas sp. | 微單胞菌屬 | 方法4 | ||
| 注：Micromonas Micros（微小微單胞菌）需在厭氧環(huán)境中培養(yǎng)5-7天。 | ||||
| Microsporum sp. | 小孢菌屬 | 方法5 | ||
| 注：Microsporum canis（犬小孢子菌）在沙保氏葡萄糖瓊脂上生長困難。 | ||||
| Moraxella sp. | 莫拉菌屬 | | ||
| Morganella sp. | 摩根（氏）菌屬 | 方法1 | ||
| Mycobacterium sp. | 分枝桿菌屬 | 方法7 | ||
| | ||||
| 支原體屬 注： Mycoplasma hominis（人型支原體）必須按照方法13。Mycoplasma orale（口腔支原體）必須按照方法15。Mycoplasma pneumoniae（肺炎支原體）必須按照方法14. | ||||
| | 香味菌屬 | 方法 2 | ||
| Neisseria sp. | 奈瑟（氏）菌屬 | 方法 3 | ||
| 注：巧克力平板是Neisseria sp.（奈瑟菌）的zui適普遍生長培養(yǎng)基。在zui初的48小時培養(yǎng)期內(nèi)不要揭開接過種的平皿。 | ||||
| Nocardia sp. | 諾卡氏菌屬 | 方法1 | ||
| Novosphingobium sp. | 鞘脂單胞菌屬 | 方法1 | ||
| | | | ||
| Ochrobactrum sp. | 蒼白桿菌屬 | 方法1 | ||
| | 寡源桿菌屬 | 方法2 | ||
| Paecilomyces sp. | 擬青霉屬 | 方法5 | ||
| Paenibacillus sp. | 類芽胞桿菌屬 | 方法1 | ||
| Parabacteroides | | 方法4 | ||
| Pasteurella sp. | 巴斯德菌屬 | 方法2 | ||
| Pediococcus sp. | 片球菌屬 | 方法11 | ||
| 注：Pediococcus damnosus（有害片球菌）需從MRS肉湯轉(zhuǎn)入MRS瓊脂上次代培養(yǎng)，需在25℃培養(yǎng)。 | ||||
| Penicillium sp. | 青霉菌屬 | | ||
| Peptoniphilus sp. | 嗜胨菌屬 | 方法4 | ||
| 注：在厭氧環(huán)境中培養(yǎng)72-96小時。 | ||||
| Peptostreptococcus sp. | 消化鏈球菌屬 | 方法4 | ||
| Plesiomonas sp. | 毗鄰單胞菌屬 | 方法1 | ||
| Porphyromonas sp. | 卟啉菌屬 | 方法4 | ||
| 注：需在厭氧環(huán)境培養(yǎng)5-7天。 | ||||
| Prevola sp. | 普雷沃菌屬 | 方法4 | ||
| 注：需在厭氧環(huán)境培養(yǎng)5-7天。 | ||||
| Propionibacterium sp. | 丙酸菌屬 | 方法4 | ||
| 注：需在厭氧環(huán)境培養(yǎng)3-5天。 | ||||
| Proteus sp | 變形菌屬 | 方法1 | ||
| Prototheca sp. | 原壁菌屬 | 方法5 | ||
| Providencia sp. | 普羅威登斯菌屬 | 方法1 | ||
| Pseudomonas sp. | 假單胞菌屬 | 方法1 | ||
| 注：Pseudmonas fluorescens（熒光假單胞菌）應(yīng)在25℃培養(yǎng)，假單胞菌屬（MicroBioLogics 目錄號0162） 應(yīng)在30℃培養(yǎng)。 | ||||
| Ralstonia sp. | 雷爾氏菌 | 方法1 | ||
| Raoulla sp. | 拉烏爾菌屬 | 方法1 | ||
| Rhizopus sp. | 根霉菌屬 | 方法5 | ||
| Rhodococcus sp. | 紅球菌屬 | 方法2 | ||
| Rhodotorula sp. | 紅酵母屬 | 方法5 | ||
| Saccharomyces sp. | 酵母菌屬 | 方法5 | ||
| 注：沙保氏葡萄糖瓊脂和沙保氏葡萄糖Emmons 瓊脂是Saccharomyces sp.（酵母菌屬）生長的zui適培養(yǎng)基。 | ||||
| Salmonella sp. | 沙門氏菌屬 方法1 | |||
| Scopulariopsis sp., , | 帚霉屬 | 方法5 | ||
| Serratia sp. | 粘質(zhì)沙雷菌 | 方法1 | ||
| Shewanella sp. | 希瓦氏菌屬 | 方法10 | ||
| Shigella sp. | 志賀菌屬 | 方法1 | ||
| Sordaria sp. | 糞殼菌屬 | 方法5 | ||
| 注：Sordaria sp.（糞殼菌屬）在沙保氏葡萄糖Emmons 瓊脂上比在沙保氏葡萄糖瓊脂上更易形成孢子。 | ||||
| Sphingobacterium sp. | 鞘氨醇桿菌屬 | 方法1 | ||
| Sphingomonas sp. | 鞘氨醇單胞菌屬 | 方法1 | ||
| 注：25℃培養(yǎng)。 | | | ||
| Staphylococcus sp. | 葡萄球菌屬 | 方法1 | ||
| 注：對于金黃色葡萄球菌，MBL貨號為0158，對萬古霉素的耐受力隨著菌齡、培養(yǎng)基種類、傳代數(shù)變化而降低，傳菌zui適是在腦心浸出液瓊脂中加入4 mg/L萬古霉素。 | ||||
| Stenotrophomonas sp. | 寡養(yǎng)單胞菌 | 方法1 | ||
| Streptococcus sp. | 鏈球菌屬 | 方法2 | ||
| 注：Streptococcus cricetus（大鼠鏈球菌）應(yīng)在微需氧環(huán)境培養(yǎng)。Streptococcus sp.（鏈球菌屬）（MicroBioLogics貨號 #0978） 應(yīng)在CO2中生長。 | ||||
| Streptomyces sp. | 鏈霉菌屬 | 方法5 | ||
| | ||||
| Thermoanaerobacterium sp. | 高溫厭氧芽孢桿菌屬 | 方法4 | ||
| 注：T. thermosaccharolyticum （嗜熱細(xì)菌熱解糖熱厭氧桿菌，MicroBioLogics目錄號0728） 的zui初生長培養(yǎng)基應(yīng)為庖肉培養(yǎng)基。45° C，培養(yǎng)72小時。然后接種至厭氧血平板上培養(yǎng)，45° C，72 小時，厭氧環(huán)境培養(yǎng)。 | ||||
| Trichophyton sp. | 發(fā)癬菌屬 | 方法5 | ||
| Trichosporon sp. | 毛孢子菌屬 | 方法5 | ||
| Ureaplasma sp. | 脲原體屬 | 方法13 | ||
| Veillonella sp. | 韋榮球菌屬 | 方法4 | ||
| Vibrio sp. | 弧菌屬 | 方法10 | ||
| 注：Vibrio alginolyticus（溶藻弧菌）應(yīng)在哥倫比亞血瓊脂或胰蛋白胨大豆瓊脂上培養(yǎng)。 | ||||
| Virgibacillus sp. | 枝芽孢菌屬 | 方法1 | ||
| Yarrowia sp. | 亞羅酵母屬 | 方法5 | ||
| Yersinia sp. | 耶爾森菌屬 | 方法1 | ||
| Zygosaccharomyces sp. | 接合酵母屬 | 方法5 | ||
