黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

    1. 

      <dd id="lgp98"></dd>
        • <dd id="lgp98"></dd>
        2. 

        4. 


          


          

  





          
  

          
    
          
            
          
        
          上海北諾生物科技有限公司
          中級會員·13年
          
    
          
	       
          
            
          
                
                
          
                    
          聯(lián)系電話
          
                    
          
                                              15800960770
                                          
          
                
          
            
          
        
          
              
    
          
    
          


	
  
          您現(xiàn)在的位置： 首頁> 技術(shù)文章 > 【感受態(tài)細(xì)胞的制備】 一步法制備感受態(tài)細(xì)胞
          
  
          
    
          
        
          
      

      
      

      
          
      
          
        
          
            
           
          
            
          中級會員·13年
          
        
          
            
          
                                     
          
                        
          聯(lián)系人：
          
                        
          周經(jīng)理 劉經(jīng)理
          
                    
          
                                                                                  
          
                            
          電話：
          
                            
           021-57730393
          
                        
          
                                                    
          
                                
          手機(jī)：
          
                                
          15800960770 
          
                            
          
                                                														
          
								
          傳真：
          
								
          86-021-61496710
          
							
          
							                        
                                   
                                           
          
                              
          地址：
          
                              
          上海市徐匯區(qū)宜山路520號中華門大廈18樓D座
          
                            
          
                                                     
          
              
          個(gè)性化：
          
              
          
                                    
                                        www.bnbiotech.com
              
          
          
          
                          
          
          
          網(wǎng)址：
          
          
          www.bnbiotech.com
          
        
          
            
        
          
            
          
            
          掃一掃訪問手機(jī)商鋪
          
        
          
                    
          
                
          
      
          
        
    
          
    
          
      
          【感受態(tài)細(xì)胞的制備】 一步法制備感受態(tài)細(xì)胞
          2013-5-15　　閱讀(1363)
          

          
							
				
				分享：
				
				
						
          
      
          
      
          
  
          一、操作步驟：
          1. 涂平板：為取得*的感受態(tài)效率，必須先把甘油菌或其它形式保存的菌種涂LB平板，并培養(yǎng)過夜。
          2. 接種：取一有新鮮培養(yǎng)的菌種的LB平板，后續(xù)操作均在超凈臺內(nèi)進(jìn)行。把鑷子的頂端在70%酒精中蘸一下，并在酒精燈上略略燒一下，使鑷子的頂端處于無菌狀態(tài)。用鑷子夾取一個(gè)無菌的塑料槍頭或牙簽，從平板上挑取一個(gè)單克隆，然后把蘸有菌種的塑料槍頭或牙簽放到裝有3毫升LB的細(xì)菌培養(yǎng)試管內(nèi)。上述操作也可以使用接種環(huán)等進(jìn)行操作。
          3. 培養(yǎng)：37℃約200rpm培養(yǎng)過夜，通常培養(yǎng)時(shí)間控制在16小時(shí)左右為宜。不宜超過18小時(shí)。
          4. 再接種培養(yǎng)：根據(jù)需要制備的感受態(tài)細(xì)菌的量，按照1:100的比例用新鮮培養(yǎng)的過夜菌接種培養(yǎng)。例如取500微升的新鮮過夜菌到50毫升的LB中繼續(xù)37℃約200rpm培養(yǎng)。通常在大約培養(yǎng)2-2.5小時(shí)后OD600可以達(dá)到0.3-0.5。
          5. 制備感受態(tài)細(xì)菌：在培養(yǎng)的細(xì)菌OD600達(dá)到0.3-0.5時(shí)，4℃2000g離心5分鐘收集細(xì)菌。如果離心沉淀前的菌量為50毫升，按后續(xù)操作進(jìn)行，如果是其它體積則按比例換算后進(jìn)行后續(xù)操作。用5毫升預(yù)冷的LB重新懸浮起細(xì)菌沉淀，加入5毫升在冰浴或冰水浴上融解的感受態(tài)制備試劑，混勻，冰浴放置5分鐘。然后再輕輕混勻，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)分裝到1.5毫升或0.5毫升的離心管內(nèi)后-70℃保存。
          注：如果以后會只做單管的轉(zhuǎn)化，可以分裝成每管zui少50微升或100微升，如果以后一次性做多個(gè)轉(zhuǎn)化，可以每管分裝500微升或更大體積。-70℃保存后，感受態(tài)的效率會隨時(shí)間的推移逐漸下降，但通常在半年內(nèi)使用轉(zhuǎn)化效率下降不會太多?？偟膩碚f，新鮮制備的感受態(tài)要比凍存的感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率更高一些。
          二、注意事項(xiàng)：
          1. 需自行配制LB液體培養(yǎng)基和LB平板以用于細(xì)菌的培養(yǎng)和感受態(tài)效率的檢測。
          2. 盡管凡是處于對數(shù)期內(nèi)的細(xì)菌都可以用于感受態(tài)細(xì)菌的制備，但如果細(xì)菌生長的OD600的值達(dá)到0.3-0.5左右時(shí)，制備出來的感受態(tài)效果*。
          3. 在制備感受態(tài)細(xì)菌的過程中均使用不含抗生素的LB。在使用感受態(tài)菌的過程中熱休克后的37℃培養(yǎng)時(shí)也必須使用無抗生素的LB，即便轉(zhuǎn)入的質(zhì)粒是有抗性的。
          4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
          
      
          
      
      
          
    
          
    
          
  
          

          
		 







  
    
    				
			 
    
    

    

     
      
     
	 

 	
	
	


          
	
          
		
          
			
          會員登錄
          
			×
		
          
		
          
				
          
					
          
						
						
          請輸入賬號
          
					
          
				
          
				
          
					
          
						
						
          請輸入密碼
          
					
          
				
          
				
          
					
          =
                       
          請輸驗(yàn)證碼
          
                    
          
				
          
				
          
		
          
	
          

          


          
	
          
		
          
			
          收藏該商鋪
          
			X
		
          
		
          
			
			
          該信息已收藏！
          
			
			
          
                
          
                    
          標(biāo)簽：
          
                    
          保存成功
          (空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
          
                
          
                
          
                    
          常用：
          
                    
          
                
          
            
          
		
          
	
          

          


          
	
          
		
          
			
          提示
          
			X
		
          
		
          
			
          您的留言已提交成功！我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
          
		
          
	
          

          






          
        
                
    產(chǎn)品對比
            
                
            
            二維碼
        
                
            
            在線交流
        
                
        

          掃一掃訪問手機(jī)商鋪
          
    
          
         
          
			
          對比框 
          
			
		
          
        

    

	
          
		在線留言
	
          

	
    
    








石门县|
衡南县|
松江区|
印江|
密山市|
新昌县|
巴彦淖尔市|
阜平县|
外汇|
祁连县|
荃湾区|
郸城县|
澄迈县|
唐山市|
安顺市|
绥芬河市|
南投县|
北宁市|
改则县|
沾益县|
晋宁县|
神池县|
朔州市|
观塘区|
偏关县|
革吉县|
扶绥县|
远安县|
五峰|
洪江市|
泰兴市|
淳安县|
惠水县|
天镇县|
开化县|
正定县|
新平|
景宁|
赫章县|
日照市|
图片|