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1.檢品溶液的制備:
取大黃粉末2克,加乙醇20ml,在沸水浴上回流浸提10分鐘,過濾供鑒別用。
2.鑒別試驗(yàn):
(1)與堿成鹽顯色反應(yīng)(Borntrager反應(yīng)):取1ml乙醇提取液,加入1ml 10% NaOH溶液,如產(chǎn)生紅色反應(yīng),加入少量30%過氧化氫液,加熱后紅色不褪,加酸使呈酸性時(shí),則紅色消褪再堿化又出現(xiàn)紅色。
注:或取大黃粉末少許,置小試管中,加水1~2ml,加濃H2SO4 2-3滴,置水浴中加熱10分鐘,冷卻,加乙1-2ml振搖。用吸管吸取醚液(黃色)于另一潔凈試管中,加入NaOH試液1ml振搖,則醚層應(yīng)褪為無色,堿層(下層)為紅色,示有蒽醌類成分存在,如供試的中草藥在以上試驗(yàn)中堿水層僅現(xiàn)黃色,可分出堿水溶液,置試管中,加30%H2O2溶液1~2滴,在沸水浴中加熱數(shù)分鐘,混液如能轉(zhuǎn)為橙紅色,說明中草藥中可能有蒽酚類成分存在。
(2)升華試驗(yàn):取大黃粉末少許,置載玻片上,玻片兩端各放短木棍一小段,然后另取一潔凈載玻片,放置于小棍上,注意勿觸及下面粉末。然后移置在三足架的鐵紗網(wǎng)上小心加熱(勿使粉末炭化)至玻片上有升華物凝結(jié)為止,取下蓋片,使升華物面向上,放于顯微鏡下觀察,可見多數(shù)黃色針晶或羽毛狀晶體(蒽醌衍生物)。此晶體遇堿液呈紅色。
(3)園形濾紙層析:
樣品:大黃醇浸液
顯色:
1)于自然光下觀察色帶
2)于紫外光下觀察熒光環(huán)
3)氨熏,觀察是否出現(xiàn)紅色環(huán),再置uv下觀察熒光環(huán)
4)噴0.5%MgAC2甲醇液,于90℃烘5分鐘,是否出現(xiàn)橙紅或紫紅色環(huán)。