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          微生物學(xué)技術(shù):高壓蒸汽滅菌實(shí)驗(yàn)

          2014-8-14  閱讀(1876)

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          標(biāo)簽: 高壓蒸汽 滅菌

          高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加壓滅菌鍋內(nèi),通過(guò)加熱,使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡,然后關(guān)閉排氣閥,繼續(xù)加熱,此時(shí)由于蒸汽不能溢出,而增加了滅菌器內(nèi)的壓力,從而使沸點(diǎn)增高,得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。

          實(shí)驗(yàn)方法

          • 高壓蒸汽滅菌實(shí)驗(yàn)
          實(shí)驗(yàn)方法原理在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí),滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否*極為重要,因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒羝呐蛎泬海?,?dāng)水蒸汽中含有空氣時(shí),在同一壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。
          試劑、試劑盒

          牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

          儀器、耗材

          培養(yǎng)皿 手提式高壓蒸汽菌鍋

          實(shí)驗(yàn)步驟

          1.  首先將內(nèi)層滅菌桶取出,再向外層鍋內(nèi)加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。


          2.  放回滅菌桶,并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠,以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸,以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。


          3.  加蓋,并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對(duì)稱的方式同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺栓,使螺栓松緊一致,勿使漏氣。


          4.  用電爐或煤氣加熱,并同時(shí)打開(kāi)排氣閥,使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣*排盡后,關(guān)上排氣閥,讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí),控制熱源,維持壓力至所需時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)用1.05 kg/cm2,121.3℃,20分鐘滅菌。


          5.  滅菌所需時(shí)間到后,切斷電源或關(guān)閉煤氣,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí),打開(kāi)排氣閥,旋松螺栓,打開(kāi)蓋子,取出滅菌物品。如果壓力未降到0時(shí),打開(kāi)排氣閥,就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。


          6.  將取出的滅菌培養(yǎng)基放入37℃溫箱培養(yǎng)24小時(shí),經(jīng)檢查若無(wú)雜菌生長(zhǎng),即可待用。

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