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        1. 上海北諾生物科技有限公司

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          • 細(xì)胞凝集反應(yīng)

            實驗原理細(xì)胞質(zhì)膜是由蛋白質(zhì)不同程度鑲嵌在脂雙層中所形成的動態(tài)流動結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)和脂類分子又與寡糖鏈結(jié)合為糖蛋白和糖脂分子,糖蛋白和糖脂分子伸至細(xì)胞表面的分枝狀寡糖鏈在質(zhì)膜表面形成細(xì)胞外被(又稱為糖萼)。許多研究結(jié)果表明:細(xì)胞間的分子識別、細(xì)胞的生長和分化、免疫反應(yīng)和腫瘤發(fā)生等均與細(xì)胞外被(分枝狀寡糖鏈)有關(guān)。凝集素(lectin)是一類含糖的(少數(shù)凝集素例外)并能與糖進(jìn)行專一性結(jié)合的蛋白質(zhì),它具有凝集細(xì)胞和刺激細(xì)胞分裂的作用。凝集素促使細(xì)胞凝集主要是由于它能與細(xì)胞外被的糖分子相連接、在細(xì)胞間形成“
          • 細(xì)菌的革蘭氏染色和特殊形態(tài)觀察

            實驗原理染色方法:革蘭染色法是細(xì)菌學(xué)中zui廣泛使用的一種鑒別染色法。1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立。方法是先將細(xì)菌用結(jié)晶紫染色,加媒染劑(增加染料和細(xì)胞的親和力)后,用脫色劑(酒精或丙酮)脫色,再用復(fù)染劑染色。如果細(xì)菌不被脫色而保存原染液顏色者為革蘭陽性菌(G+);如被脫色,而染上復(fù)染液的顏色者為革蘭陰性菌(G-)。此染色法可將所有具有細(xì)胞壁的細(xì)菌分為兩大類:革蘭陽性菌和革蘭陰性菌。單染色法:只能觀察微生物的大小、形狀、和細(xì)胞排列狀況,但不能鑒別微生物以及它的特殊構(gòu)造等。復(fù)染色法:用兩種或兩
          • 冷凍組織切片制作

            實驗試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇實驗設(shè)備載玻片,Whatman1#濾紙,低倍光學(xué)顯微鏡實驗材料未受損傷的組織實驗步驟1.將未受損傷的組織切剖成小樣本,約lcmXIcmX0.4cm。2.將標(biāo)本放在卡片的一端。標(biāo)記該卡片,將帶有標(biāo)本的一端浸入液氮中。60s后,取出標(biāo)本并放在干冰上。修剪卡片,使其大小剛好比組織塊稍
          • 線粒體的活體染色的及電鏡照片觀察

            實驗原理線粒體是細(xì)胞內(nèi)一種重要細(xì)胞器,是細(xì)胞進(jìn)行呼吸作用的場所。細(xì)胞的各項活動所需要的能量,主要是通過線粒體呼吸作用來提供的?;铙w染色是應(yīng)用無毒或毒性較小的染色劑真實地顯示活細(xì)胞內(nèi)某些結(jié)構(gòu)而又很少影響細(xì)胞生命活動的一種染色方法。詹納斯綠B是線垃體的專一性活體染色劑。線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)呈藍(lán)綠色,而在周圍的細(xì)胞質(zhì)中染料被還原,成為無色狀態(tài)。實驗試劑1.l/300詹納斯綠B染液2.Ringer氏液(哺乳類用)實驗設(shè)備1.顯微鏡2.手術(shù)器材一套3.解剖盤4.小平皿5.載片6.蓋片7
          • 成年豬胰島分離純化方法的優(yōu)化

            實驗試劑膠原酶V,512kut/mg(Sigma公司),DNA酶(Sigma公司),胎牛血清(Gibco公司),RPMI1640培養(yǎng)液(Gibco公司),Dextran(Pharmacia公司),Hanks平衡鹽溶液(Gibco公司)。實驗設(shè)備離心機,注射器,顯微鏡,超凈工作臺等。實驗材料成年雜種豬,豬齡12mo,體質(zhì)量150kg左右,豬被屠宰放血后,在相對無菌條件下迅速取出胰腺,保存于4℃Hanks液中送至實驗室,熱缺血時間少于10min,冷缺血時間少于90min。實驗步驟1.胰島分離胰腺取回
          • 小麥總RNA的提取

            實驗步驟1.所有容器高溫滅菌兩次,DEPC高溫滅菌,所有的試劑用DEPC配制,高溫滅菌。2.在一滅菌2mL管中加入:5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0)0.1mL。3.稱取0.2g小麥黃化苗的葉片,迅速在液氮中研磨成粉末,轉(zhuǎn)入已準(zhǔn)備好的離心管中,劇烈震蕩。4.混勻,冰浴30min。5.4℃,12000rpm,10min。6.上清至另一離心管中加0.4mL氯仿,劇烈震蕩。冰浴放置5min。7.4℃,12000rpm,10min。8.棄有機相(下層)加入0.4mL
          • 葡萄糖在小鼠克隆胚胎發(fā)育中的作用

            實驗步驟1.克隆胚胎制備和胚胎培養(yǎng)卵母細(xì)胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培養(yǎng)液中培養(yǎng)。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml細(xì)胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作為工作液,卵母細(xì)胞在此液中被去掉紡錘體-染色體復(fù)合體;用卵丘細(xì)胞作為核供體。用注射針反復(fù)吸入、吹出卵丘細(xì)胞,以除去其細(xì)胞膜和大部分細(xì)胞質(zhì),然后用注射針將裸卵的核注入去除紡錘體-染色體復(fù)合體的卵母細(xì)胞中。孤雌胚胎所用的卵母細(xì)胞與用于制備核移植胚胎的卵母細(xì)胞來源相同。孤雌胚胎和核移植胚胎用不含Ca2、卻含10mMSr2和細(xì)胞松弛
          • 小鼠角質(zhì)細(xì)胞的分離和培養(yǎng)

            實驗試劑HBSS:NaCl8g/LKCl400mg/LKH2PO460mg/L無水Na2PO447.86mg/L無水葡萄糖1000mg/LNaHCO3350mg/L實驗材料妊娠期BALB/c小鼠實驗步驟1.將1~2天齡新生裸鼠窒息后,置于培養(yǎng)皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠,流水*沖洗,然后用70%乙醇洗兩次。小鼠應(yīng)立即使用,若待處理的小鼠數(shù)量較多,可置冰上30min。2.去除小鼠的四肢和尾巴。3.將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口,用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮膚剝下,用一把鑷子夾住身
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