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2013年
07月 -
DNA專(zhuān)題:DNA純化實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法原理本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中提取多至8μgDNA(70bp-10Kb),回收率為60-85%。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液(DE-A溶液)中溶解,其中的保護(hù)劑能防止線狀DNA在高溫下降解,然后在DE-B溶液的作用下使DNA選擇性結(jié)合到膜上。純化的DNA純度高,并保持片斷完整性和高生物活性,可直接用于連接、體外轉(zhuǎn)錄、PCR擴(kuò)增、測(cè)序、微注射等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)材料PCR產(chǎn)物單鏈DNA質(zhì)粒DNA試劑、試劑盒DNA凝膠回收試劑盒儀器、耗材DNA制備管離心管實(shí)驗(yàn)步驟一、試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定【查看全文】
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2013年
07月 -
DNA專(zhuān)題:cDNA文庫(kù)構(gòu)建
概述cDNA文庫(kù)是以特定的組織或細(xì)胞mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成的互補(bǔ)DNA(cDNA)與適當(dāng)?shù)妮d體(常用噬菌體或質(zhì)粒載體)連接后轉(zhuǎn)化受體菌形成重組DNA克隆群,這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱(chēng)為該組織或細(xì)胞的cDNA文庫(kù)。cDNA文庫(kù)特異地反映某種組織或細(xì)胞中,在特定發(fā)育階段表達(dá)的蛋白質(zhì)的編碼基因,因此cDNA文庫(kù)具有組織或細(xì)胞特異性。cDNA文庫(kù)顯然比基因組DNA文庫(kù)小得多,能夠比較容易從中篩選克隆得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。但對(duì)真核細(xì)胞來(lái)說(shuō),從基因組DNA文庫(kù)獲得的基因與從cD【查看全文】
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2013年
07月 -
一、實(shí)驗(yàn)原理變性梯度凝膠電泳(DGGE)是一種根據(jù)DN段的熔解性質(zhì)而使之分離的凝膠系統(tǒng)。核酸的雙螺旋結(jié)構(gòu)在一定條件下可以解鏈,稱(chēng)之為變性。核酸50%發(fā)生變性時(shí)的溫度稱(chēng)為熔解溫度(Tm)。Tm值主要取決于DNA分子中GC含量的多少。DGGE將凝膠設(shè)置在雙重變性條件下:溫度50~60℃,變性劑0~100%。當(dāng)一雙鏈DN段通過(guò)一變性劑濃度呈梯度增加的凝膠時(shí),此片段遷移至某一點(diǎn)變性劑濃度恰好相當(dāng)于此段DNA的低熔點(diǎn)區(qū)的Tm值,此區(qū)便開(kāi)始熔解,而高熔點(diǎn)區(qū)仍為雙鏈。這種局部解鏈的DNA分子遷移率發(fā)生改變,達(dá)【查看全文】
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2013年
07月 -
一個(gè)用于口腔和面部控制的主時(shí)鐘嚙齒類(lèi)動(dòng)物通過(guò)有節(jié)奏地嗅聞和掃動(dòng)它們的胡須來(lái)探索其環(huán)境。這些行為的協(xié)調(diào)對(duì)其有效性至關(guān)重要,而這項(xiàng)研究則識(shí)別出了其中所涉及的神經(jīng)系統(tǒng)。DavidKleinfeld及其同事在“延髓腹側(cè)”中識(shí)別出一個(gè)驅(qū)動(dòng)節(jié)奏性胡須掃動(dòng)的區(qū)域,并且發(fā)現(xiàn):該區(qū)域中的神經(jīng)元是由來(lái)自介導(dǎo)呼吸模式的核心的輸入控制的?!昂粑J缴善鳌辈粌H對(duì)胡須掃動(dòng)、而且對(duì)其他由呼吸協(xié)調(diào)的行為都可能起一個(gè)主時(shí)鐘的作用。mTOR激酶的結(jié)構(gòu)mTOR(雷帕霉素的哺乳動(dòng)物目標(biāo))通道是響應(yīng)于能量、營(yíng)養(yǎng)物和生長(zhǎng)因子等環(huán)境信號(hào)而【查看全文】
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2013年
07月 -
定論文題目看似簡(jiǎn)單,但是事實(shí)上需要縝密的思考。讀者搜尋資料庫(kù)和論文的參考文獻(xiàn)時(shí)看到的就是論文題目,他們會(huì)根據(jù)題目來(lái)判斷論文內(nèi)容及跟自己在搜尋的主題相關(guān)性,顯而易見(jiàn)的,論文題目是左右論文閱讀率的決定性因素。好的論文題目可以:●用簡(jiǎn)單幾個(gè)字濃縮論文內(nèi)容●吸引讀者的目光●將之與同領(lǐng)域的其他論文區(qū)隔出來(lái)以下是在定論文題目時(shí)應(yīng)該謹(jǐn)記在心的3個(gè)簡(jiǎn)單技巧:1.簡(jiǎn)潔有力:論文題目zui主要的功能是提供論文大意,應(yīng)概要簡(jiǎn)單清楚——使用主動(dòng)語(yǔ)態(tài),避免名詞字句及其他不必要的信息。一個(gè)好的題目通常介于10到12個(gè)字之間【查看全文】
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2013年
07月 -
專(zhuān)題:中國(guó)工程院公布院士增選有效候選人名單
中國(guó)工程院公布了2013年中國(guó)工程院院士增選有效候選人名單,共有560人成為有效候選人。為使院士增選工作廣泛接受社會(huì)監(jiān)督,保證候選人材料的真實(shí)客觀,《中國(guó)工程院院士增選候選人材料公示辦法》規(guī)定,自公布有效候選人名單之日起開(kāi)始公示候選人材料,公示方式是在候選人所在單位的公開(kāi)場(chǎng)所張貼,公示內(nèi)容為候選人“提名書(shū)”中經(jīng)候選人確認(rèn)的全部?jī)?nèi)容,公示期為30天。據(jù)悉,2013年院士增選總名額不超過(guò)60名。在6月份至11月份,以上候選人將接受來(lái)自學(xué)部的兩輪評(píng)審、會(huì)外考察和投訴調(diào)查后,方能成為各學(xué)部的正式候選人,【查看全文】
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2013年
07月 -
拒稿讓人沮喪,但評(píng)審?fù)ǔ?huì)有些有用的意見(jiàn),所以作者有機(jī)會(huì)在改投下一家期刊前改進(jìn)論文。有時(shí)候有些比較嚴(yán)重的問(wèn)題是沒(méi)法單靠修改論文就能解決的,例如研究設(shè)計(jì)的缺陷,但有些常見(jiàn)的問(wèn)題是可以在寫(xiě)論文時(shí)輕易避免的。已經(jīng)有好幾個(gè)研究討論過(guò)拒稿的常見(jiàn)原因,以下是導(dǎo)致拒稿的常見(jiàn)錯(cuò)誤以及相關(guān)的避免方法:1.不適當(dāng)或不完整的統(tǒng)計(jì)使用正確的統(tǒng)計(jì)分析法詳細(xì)敘述統(tǒng)計(jì)方法在適當(dāng)?shù)牡胤秸f(shuō)明P值與R2值2.過(guò)度夸大結(jié)果避免將結(jié)論敘述的與實(shí)際研究發(fā)現(xiàn)差距過(guò)大適當(dāng)告知研究限制不要引用不相關(guān)或過(guò)多的信息來(lái)支持?jǐn)?shù)據(jù)3.不適當(dāng)或理想的儀器【查看全文】
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2013年
07月 -
禽流感歸零地作禽流感歸零地作為中國(guó)事實(shí)上的獸醫(yī)師,陳化蘭(ChenHualan)一邊作為先鋒致力于研究致命性禽流感病毒株,一邊還要與那些說(shuō)她正在玩火的批評(píng)人士針?shù)h相對(duì)。中國(guó),哈爾濱—3月30日,星期六,陳化蘭當(dāng)時(shí)正在北京參加一個(gè)會(huì)議,這是她周末的典型工作內(nèi)容,此時(shí)她接到了一個(gè)令人不安的來(lái)電。來(lái)電的是中國(guó)農(nóng)業(yè)部的一位官員,并告訴她一種新的禽流感病毒正在讓人不斷地病倒。陳化蘭了解到,中國(guó)疾病預(yù)防控制中心(CDC)已經(jīng)確認(rèn)了3個(gè)病例,2例發(fā)生在上海,1例發(fā)生在安徽省。這些病例出現(xiàn)于2月下旬和3月上旬;【查看全文】