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Hieff MutTM 系列試劑盒是基于Hieff CloneTM快速克隆技術(shù)的定點(diǎn)突變系統(tǒng),目標(biāo)質(zhì)粒擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)DpnI消化、Hieff CloneTM重組環(huán)化后直接進(jìn)行轉(zhuǎn)化即可完成定點(diǎn)突變。本試劑盒由兩個(gè)模塊組成:
HieffTM Pfu DNA Polymerase擴(kuò)增模塊:提供zui高保真度的擴(kuò)增,可擴(kuò)增20 kb以內(nèi)的質(zhì)粒;擴(kuò)增以指數(shù)方式進(jìn)行,極大減少了模板使用量,有利于原始甲基化模板的*降解。
Hieff CloneTM快速克隆模塊:可環(huán)化PCR產(chǎn)物。
Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit單點(diǎn)突變?cè)噭┖?/span>適用于長(zhǎng)度小于20 kb的任何質(zhì)粒擴(kuò)增,可針對(duì)單堿基、連續(xù)多堿基、不連續(xù)雙堿基(相距超過50 bp)定點(diǎn)突變。
Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Ki多點(diǎn)突變?cè)噭┖衪可一次性向目標(biāo)質(zhì)粒上3至5個(gè)不連續(xù)位點(diǎn)(相距超過50bp)同時(shí)引入定點(diǎn)突變。
使用Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit進(jìn)行單堿基(或連續(xù)多堿基)定點(diǎn)突變
使用Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit進(jìn)行不連續(xù)雙堿基定點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)方案 (兩突變位點(diǎn)相距超過50 bp)
使用Hieff MutTM Muti Site-Directed Mutagenesis Kit進(jìn)行不連續(xù)雙堿基定點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)方案 (兩突變位點(diǎn)相距超過50 bp)
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 引物對(duì)數(shù) | *(元) |
Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit | 11003ES10 | 10 rxn | 1對(duì) | 720 |
2對(duì) | ||||
Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit | 11004ES10 | 10 rxn | n≤5對(duì) | 1228 |
FAQ
Q1. 請(qǐng)問單點(diǎn)突變/多點(diǎn)突變是否都是每個(gè)位點(diǎn)設(shè)計(jì)一對(duì)引物?是否都包括堿基/氨基酸突變,堿基插入和缺失?堿基插入/缺失的zui大長(zhǎng)度是多少?是否可以進(jìn)行連續(xù)氨基酸的突變,氨基酸的數(shù)量限制是多少?
A1:?jiǎn)吸c(diǎn)突變/多點(diǎn)突變是每個(gè)位點(diǎn)設(shè)計(jì)一對(duì)引物;正反向引物可以包括堿基/氨基酸突變,堿基插入和缺失,也可以將這些堿基/氨基酸突變/堿基插入和缺失放在一條引物上;堿基插入/缺失的zui大長(zhǎng)度沒有限制,可為任何長(zhǎng)度;可以進(jìn)行連續(xù)氨基酸的突變,無特別數(shù)量限制。
Q2. 引物設(shè)計(jì)的原則是什么?有無的引物設(shè)計(jì)軟件,若沒有,推薦幾個(gè)好用的引物設(shè)計(jì)軟件。
A2:引物設(shè)計(jì)基本原則是使擴(kuò)增產(chǎn)物末端有同源序列即可。無官設(shè)計(jì)軟件,推薦軟件Primer5,Vector NTI。
Q3. 本試劑盒可以進(jìn)行多點(diǎn)突變,能夠同時(shí)進(jìn)行幾個(gè)位點(diǎn)的突變? 突變效率如何?進(jìn)行單點(diǎn)突變的突變效率是多少?
A3:zui高同時(shí)突變6個(gè)獨(dú)立位點(diǎn)(每個(gè)位點(diǎn)之間相距超過100bp)。突變效率非常高(單次反應(yīng)500多個(gè)克隆,陽(yáng)性率超過95%)
Q4. 該kit不含有感受態(tài)細(xì)胞,推薦的感受態(tài)細(xì)胞是哪些?
A4:*0,DH,XL10。常規(guī)克隆菌都可以。
Q5. 該試劑盒總共的工作時(shí)間一般多久?
A5:實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間3小時(shí)左右。
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司 - 主營(yíng)產(chǎn)品: 抗體,小分子抑制劑,熒光染料,干細(xì)胞培養(yǎng),血清
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