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        1. 翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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          單/多點(diǎn)突變?cè)噭┖?/h3>

          2014-10-2  閱讀(1169)

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          Hieff MutTM 系列試劑盒是基于Hieff CloneTM快速克隆技術(shù)的定點(diǎn)突變系統(tǒng),目標(biāo)質(zhì)粒擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)DpnI消化、Hieff CloneTM重組環(huán)化后直接進(jìn)行轉(zhuǎn)化即可完成定點(diǎn)突變。本試劑盒由兩個(gè)模塊組成:

          HieffTM Pfu DNA Polymerase擴(kuò)增模塊:提供zui高保真度的擴(kuò)增,可擴(kuò)增20 kb以內(nèi)的質(zhì)粒;擴(kuò)增以指數(shù)方式進(jìn)行,極大減少了模板使用量,有利于原始甲基化模板的*降解。

          Hieff CloneTM快速克隆模塊:可環(huán)化PCR產(chǎn)物。 

          Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit單點(diǎn)突變?cè)噭┖?/span>適用于長(zhǎng)度小于20 kb的任何質(zhì)粒擴(kuò)增,可針對(duì)單堿基、連續(xù)多堿基、不連續(xù)雙堿基(相距超過50 bp)定點(diǎn)突變。

          Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Ki多點(diǎn)突變?cè)噭┖衪可一次性向目標(biāo)質(zhì)粒上35個(gè)不連續(xù)位點(diǎn)(相距超過50bp)同時(shí)引入定點(diǎn)突變。

          使用Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit進(jìn)行單堿基(或連續(xù)多堿基)定點(diǎn)突變

          使用Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit進(jìn)行不連續(xù)雙堿基定點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)方案 (兩突變位點(diǎn)相距超過50 bp)

          使用Hieff MutTM Muti Site-Directed Mutagenesis Kit進(jìn)行不連續(xù)雙堿基定點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)方案 (兩突變位點(diǎn)相距超過50 bp)

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          *(元)

          Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit
          單點(diǎn)突變?cè)噭┖?/span>

          11003ES10

          10 rxn

          1對(duì)

          720

          2對(duì)

          Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit
          多點(diǎn)突變?cè)噭┖?/span>

          11004ES10

          10 rxn

          n≤5對(duì)

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          FAQ

          Q1. 請(qǐng)問單點(diǎn)突變/多點(diǎn)突變是否都是每個(gè)位點(diǎn)設(shè)計(jì)一對(duì)引物?是否都包括堿基/氨基酸突變,堿基插入和缺失?堿基插入/缺失的zui大長(zhǎng)度是多少?是否可以進(jìn)行連續(xù)氨基酸的突變,氨基酸的數(shù)量限制是多少?

          A1:?jiǎn)吸c(diǎn)突變/多點(diǎn)突變是每個(gè)位點(diǎn)設(shè)計(jì)一對(duì)引物;正反向引物可以包括堿基/氨基酸突變,堿基插入和缺失,也可以將這些堿基/氨基酸突變/堿基插入和缺失放在一條引物上;堿基插入/缺失的zui大長(zhǎng)度沒有限制,可為任何長(zhǎng)度;可以進(jìn)行連續(xù)氨基酸的突變,無特別數(shù)量限制。

          Q2. 引物設(shè)計(jì)的原則是什么?有無的引物設(shè)計(jì)軟件,若沒有,推薦幾個(gè)好用的引物設(shè)計(jì)軟件。

          A2:引物設(shè)計(jì)基本原則是使擴(kuò)增產(chǎn)物末端有同源序列即可。無官設(shè)計(jì)軟件,推薦軟件Primer5Vector NTI。

          Q3. 本試劑盒可以進(jìn)行多點(diǎn)突變,能夠同時(shí)進(jìn)行幾個(gè)位點(diǎn)的突變? 突變效率如何?進(jìn)行單點(diǎn)突變的突變效率是多少?

          A3:zui高同時(shí)突變6個(gè)獨(dú)立位點(diǎn)(每個(gè)位點(diǎn)之間相距超過100bp)。突變效率非常高(單次反應(yīng)500多個(gè)克隆,陽(yáng)性率超過95%

          Q4. kit不含有感受態(tài)細(xì)胞,推薦的感受態(tài)細(xì)胞是哪些?
          A4*0DH,XL10。常規(guī)克隆菌都可以。

          Q5. 該試劑盒總共的工作時(shí)間一般多久? 

          A5:實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間3小時(shí)左右。

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