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        1. 翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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          Hieff TransTM脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,讓您對轉(zhuǎn)染自信滿滿

          2017-5-5  閱讀(2457)

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          ——效率高不高,一轉(zhuǎn)便知道

           

          關(guān)鍵詞:liposomal ; transfection ; lipo2000 ; lipo3000

           

          轉(zhuǎn)染效率低,細(xì)胞毒性大,操作步驟太繁瑣?怎么辦?

           

          你需要有一種超能力的轉(zhuǎn)染試劑來成就你的轉(zhuǎn)染實驗

           

              轉(zhuǎn)染能夠讓我們更好的研究目的基因是如何在細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)和調(diào)控。目前常見的轉(zhuǎn)染方法有:磷酸鈣共

           

          沉淀法、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和ploybrene、機(jī)械法(如顯微注射和基因槍法)、陽離子脂質(zhì)體試劑,其中

           

          陽離子脂質(zhì)體試劑轉(zhuǎn)染是目前zui常用的轉(zhuǎn)染方法。

           

                 Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑作為一款陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,與應(yīng)用的Lipo2000相比,

           

          具有更高的轉(zhuǎn)化效率和更加便捷的操作。目前已經(jīng)在多種細(xì)胞系中得以驗證,如常見的細(xì)胞系293T,Hela

           

          MCF-7以及相對應(yīng)用比較少的Raw264.7,COS-7Hep3B等細(xì)胞。其中常見細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染效率達(dá)90%以上,

           

          遠(yuǎn)遠(yuǎn)可以滿足我們對于轉(zhuǎn)染實驗的需求。

           

          作用原理:

           

              陽離子能夠通過表面所帶正電荷的靜電作用將核酸包裹,形成核酸-脂質(zhì)體復(fù)合體。細(xì)胞膜表面帶負(fù)電

           

          荷,能夠?qū)⒃搹?fù)合體吸附,被吸附后的復(fù)合體能夠通過膜的融合作用或者細(xì)胞內(nèi)吞的方式形成包涵體進(jìn)入細(xì)

           

          胞。有小部分的DNA 能夠從包涵體中被釋放,并進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中,再進(jìn)一步進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)。

           

           

           

          1:脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染和內(nèi)吞過程

           

          產(chǎn)品特點:

           

          性: 可對大多數(shù)真核細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染,并且對于常見細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率達(dá)90%以上。

           

          低毒性:轉(zhuǎn)染細(xì)胞形態(tài)良好并產(chǎn)生大量的轉(zhuǎn)染基因蛋白

           

          操作簡便:可以直接將脂質(zhì)體復(fù)合物加入到含血清的培養(yǎng)基中。

           

          多樣性:適合瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

           

           

           

          操作流程:

           

           

           

           

           

          2:細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗流程

           

          產(chǎn)品數(shù)據(jù):

           

          客戶提供部分細(xì)胞系轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)(僅供參考)

           

           

          細(xì)胞

           

          培養(yǎng)板

           

          細(xì)胞密度

           

          DNA

           

          Hieff Trans

           

          效率

           

          293T

           

          6

           

          80%

           

          1μg

           

          2μl

           

          90%

           

          293FT

           

          24

           

          85%

           

          1μg

           

          4μl

           

          90%

           

          Hela

           

          12

           

          90%

           

          0.2μg

           

          0.6μl

           

          90%

           

          Raw264.7

           

          35mm

           

          80%

           

          1μg

           

          2μl

           

          90%

           

          Hek293

           

          6

           

          95%

           

          2μg

           

          10μl

           

          80-90%

           

          NCI-H1975

           

          6

           

          80%

           

          4μg

           

          10μl

           

          80%

           

          3t3

           

          12

           

          90%

           

          1μg

           

          5μl

           

          50%

           

           

          驗證過的細(xì)胞系

           

           

          293T

           

          293FT

           

          HEK293

           

          HEK 293T

           

          Caco2

           

          COS-7

           

          DF-1

           

          Lenti X-293T

           

          HeLa

           

          HepG2

           

          LM3

           

          MCF-7

           

          MDA-MB-231

           

          MEF

           

          NCI-H1975

           

          NIH-3T3

           

          PC12

           

          Raw264.7

           

          Vero

           

          H9c2

           

          Hepa1-6

           

          MCF10A

           

          CHO

           

          5-8F

           

          BV-2

           

          A549

           

          3t3

           

          H520

           

          HUVEC

           

          C6

           

          HaCaT

           

          N2A

           

          SGC-7901

           

          H9

           

          MKN-28

           

          Hep 3B

           

          SMCC7721

           

          RKO

           

          C2C12

           

          More…

           

          客戶反饋結(jié)果展示

           

           

           

           

          Hieff TransTM Liposomal 轉(zhuǎn)染應(yīng)用

                     

                     

           

          細(xì)菌蛋白激活細(xì)胞自噬體形成

           

          細(xì)胞:Hela   轉(zhuǎn)染質(zhì)粒:細(xì)菌效應(yīng)蛋白A   LC3II:自噬體標(biāo)記蛋白

           

          細(xì)胞分裂紡錘體結(jié)構(gòu)

           

          細(xì)胞Hela   轉(zhuǎn)染質(zhì)粒:Flag-tubulin   細(xì)胞核染色:Hoechst33342

           

           

           

          DNA轉(zhuǎn)染

           

           

          DNA轉(zhuǎn)染

               

           

                    

                   

           

          Hieff Trans

           

          Lipo3000

           

           

          Hieff Trans

           

          Lipo2000

           

          圖片來源:復(fù)旦大學(xué) 細(xì)胞系:Hek293 核酸類型:DNA

           

           

          圖片來源:長春應(yīng)化所 細(xì)胞系:Hela 核酸類型:DNA

           

           

          價格比較:

            

                 

           

          單次反應(yīng)各公司價格對比

           

          常見問題:

           

          Q1:配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物時能否有血清的存在?

           

          答:血清的存在會影響脂質(zhì)體的形成,建議配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物時采用無血清培養(yǎng)基(一般推薦MEM培養(yǎng)

          基)。

           

          Q2:轉(zhuǎn)染實驗過程中是否需要更換成無血清培養(yǎng)基?

           

          答:不需要,我們的轉(zhuǎn)染試劑可以在含血清的介質(zhì)中進(jìn)行轉(zhuǎn)染的過程。

           

          Q3:轉(zhuǎn)染后需要進(jìn)行終止嗎?

           

          答:不需要脂質(zhì)體復(fù)合物可以穩(wěn)定存在6個小時。如果在進(jìn)行轉(zhuǎn)染前沒有進(jìn)行細(xì)胞換液,為了保證細(xì)胞正常

          生長所需的營養(yǎng),需要在46小時后換用新的培養(yǎng)基。但如果轉(zhuǎn)染之前已進(jìn)行過換液則在脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染后不需要

          進(jìn)行再次換液。

           

          Q4:轉(zhuǎn)染試劑的保存及使用過程中的注意事項?

           

          答:本試劑一定要4℃保存,要注意避免反復(fù)多次長時間開蓋,長時間開蓋會導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效

          率。

           

          Q5:若想提高轉(zhuǎn)染效率,應(yīng)該注意什么?

           

          答:a:轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的密度,90%-95%。

           

          b:轉(zhuǎn)染時,核酸和脂質(zhì)體稀釋液要用MEM無血清培養(yǎng)基。

           

          c:轉(zhuǎn)染后4-6h可選擇換液。

           

          參考文獻(xiàn):

           

          Su D N, Wu S P, Chen H T, et al. HOTAIR, a long non-coding RNA driver of malignancy whose

          expression is activated by FOXC1, negatively regulates miRNA-1 in hepatocellular carcinoma[J].

          Oncology Letters, 2016, 12(5):4061.

           

          我們的回報——有買有

           

          產(chǎn)品信息:

           

           

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          規(guī)格

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          *(元)

           

          40802ES03

           

          Hieff TransTM 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

           

          1.0mL

           

          1308.00

           

          868.00

           

          購買/

           

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          5

           

          3

           

          15

           

          15

           

          30

           

          40

           

          50

           

          70

           

          活動條款:

           

          1.活動時間:2017.4.10-2017.6.30

           

          2.本活動可與“整裝待發(fā) 翊起GO”活動疊加參與;

           

          3.本活動zui終解釋權(quán)歸上海翊圣生物所有。

           

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          價格(元)

           

          Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

           

          40802ES02

           

          0.5 mL

           

          738.00

           

          Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

           

          40802ES03

           

          1.0 mL

           

          1308.00

           

          Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

           

          40802ES08

           

          5×1 mL

           

          4878.00

           

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          規(guī)格

           

          價格(元)

           

          Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸鈣法細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑

           

          40803ES70

           

          200 T

           

          298.00

           

          Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/mL

           

          40804ES76

           

          500 μL

           

          180.00

           

          Polybrene (hexadimethrine bromide)  聚凝胺(10 mg/mL

           

          40804ES86

           

          5×500μL

           

          500.00

           

          Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

           

          40805ES01

           

          100μL

           

          228.00

           

          Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

           

          40805ES02

           

          0.5 mL

           

          948.00

           

          Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

           

          40805ES03

           

          1.0 mL

           

          1678.00

           

          Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

           

          40805ES08

           

          5×1 mL

           

          5268.00

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