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參考價(jià) | ¥553 |
- 型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
15 KU | 553元 | 10000 件 可售 |
訪問(wèn)次數(shù):776更新時(shí)間:2023-02-13 16:51:58
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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CAS | 9003-98-9 | 分子量 | 31 kDa |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 15 KU/ |
貨號(hào) | 10607ES | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
主要用途 | 核酸內(nèi)切酶 |
產(chǎn)品描述
脫氧核糖核酸酶I(DNase I),即Deoxyribonuclease I,一種發(fā)現(xiàn)于多種細(xì)胞和組織的核酸內(nèi)切酶,靶向切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生5’端為磷酸基團(tuán)、3’端為羥基的多聚核苷酸,平均消化產(chǎn)物最小為多聚四核苷酸。DNase可催化多種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(zhì)(其切割速率受組蛋白影響)。最佳的工作范圍是pH7-8,DNase的活性依賴于Ca2+,并可被二價(jià)金屬離子如Co 2+,Mn2+,Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保護(hù)酶使其不被水解。在Mg2+存在下,該酶可隨機(jī)識(shí)別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點(diǎn);而在Mn2+存在的條件下,可同時(shí)識(shí)別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點(diǎn)進(jìn)行切割。DNase I最早從胰腺中分離而來(lái),至今哺乳動(dòng)物胰腺也是該酶的最主要的來(lái)源之一。
本品來(lái)自牛胰腺,由四種色譜區(qū)分的組分A,B,C,D構(gòu)成,摩爾比為4:1:1,而D組分非常少。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用于清除蛋白中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使標(biāo)記堿基插入DNA。本品以含氯化鈣的凍干粉形式供應(yīng),酶活力≥2000 Kunitz Units/mg蛋白。
產(chǎn)品性質(zhì)
CAS號(hào)(CAS NO.) | 9003-98-9 |
分子量(Molecular Weight) | ~31 kDa |
孔尼茨單位(Kunitz Units) | ≥2000 Kunitz Units/mg protein |
類型(Type) | Type IV |
最佳PH(Optimal pH) | 7~8 |
外觀(Appearance) | 白色至淺褐色凍干粉 |
純度(Purity) | Protein:≥80% by Biuret |
溶解性(Solubility) | 0.15 M NaCl:5 mg/mL,無(wú)色透明溶液 |
激活劑(Activators) | 多種二價(jià)金屬離子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+ |
抑制劑(Inhibitors) | β-巰基乙醇;螯合劑;SDS;肌動(dòng)蛋白 |
活力單位定義(Unit Definition) | 25℃,pH5.0條件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分鐘ΔA260增加0.001的變化定義為一個(gè)酶活力單位(Kunitz unit)。 |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。凍干粉末于-20℃保存,有效期2年。
注意事項(xiàng)
1)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2)本產(chǎn)品僅作科研用途!
DNase Ⅰ儲(chǔ)存溶液
20 mM sodium acetate(pH 6.5),5 mM CaCl2,0.1 mM PMSF,50%甘油。
DNase Ⅰ失活或抑制
加入EDTA至終濃度為2.5 mM后,65℃加熱10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑,達(dá)到毫摩爾/升濃度的鋅離子,0.1%的SDS,DTT、巰基乙醇等還原劑,50-100 mM以上鹽濃度均對(duì)DNase Ⅰ有顯著抑制作用。
使用方法(應(yīng)用于蛋白提取實(shí)驗(yàn),僅供參考)
1)反應(yīng)體系:蛋白提取液中按照1/100體積加入DNase I儲(chǔ)存液(使其終濃度為20 U/mL),1/100體積加入1 M MgCl2。
2)反應(yīng)條件:37℃,30-60 min。繼續(xù)后續(xù)蛋白提取實(shí)驗(yàn)即可。
【注】由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否則會(huì)降低DNase I的消化能力。
HB21081