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- 60404ES03 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):1248更新時間:2022-02-11 12:32:37
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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Endotoxin Removal Kit 內(nèi)毒素去除試劑盒
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
Endotoxin Removal Kit 內(nèi)毒素去除試劑盒 | 60404ES03 | 1Kit | 4℃ | 1680.00 |
產(chǎn)品描述
細菌內(nèi)毒素可引起機體免疫功能受損,嚴(yán)重者可引發(fā)膿毒性休克,急性呼吸窘迫綜合癥,彌散性血管內(nèi)凝血,全身炎癥反應(yīng)綜合癥或致命性多器官功能衰竭等。因此對于用于疾病治療的基因藥物、蛋白藥物、單抗克隆藥物、治療性疫苗、小分子化學(xué)藥物等生物制品必須通過一定的方法去除內(nèi)毒素。
翊圣提供的內(nèi)毒素去除樹脂以修飾過的多粘菌素B(PMB)為配體,可高效特異的將生物制品中內(nèi)毒素去除,經(jīng)純化樣品zui終的內(nèi)毒素水平可<0.1EU/ml,適合于蛋白,多肽,抗體,多糖等多種形式樣品的純化。本品以預(yù)裝柱的形式提供,另附帶用于去除內(nèi)毒素的其他試劑(如相關(guān)緩沖液)以及無熱源耗材等,方便客戶使用。
產(chǎn)品性質(zhì)
基質(zhì)(Matrix) | 4%瓊脂糖微球 |
配體(Ligand) | 修飾的多粘菌素B(PMB) |
孔徑(Bead size) | 80-100µm |
載量(Capacity) | >2,000,000EU/ml樹脂 |
pH穩(wěn)定范圍(pH range) | 5-10 |
離子范圍(Ion Range) | 0.1-0.5M NaCl |
平衡緩沖液(Equilibration Buffer) | PBS,pH8.0 |
耐受試劑(tolerant reagent) | 20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油; 0.05% 吐溫-20,10mM DTT;1M 尿素;300mM咪唑等 |
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 規(guī)格 |
60404-A | Endotoxin Removal Chromatography Column 內(nèi)毒素去除樹脂預(yù)裝柱 | 2ml |
60404-B | Regeneration Buffer 再生緩沖液 | 125ml |
60404-C | Equilibration Buffer平衡緩沖液 | 125ml |
60404-D | Pyrogen-free Tubes無熱源接收管 | 1包(3個/包) |
60404-E | Pyrogen-free Tips無熱源吸頭(1ml) | 3包(4個/包) |
運輸和保存方法
冰袋運輸。4℃保存,有效期至少1年。
使用方法
1. 樣品處理:多粘菌素B和內(nèi)毒素是通過靜電作用,離子作用,親水作用和分子間相互作用等多種因素共同作用的結(jié)果,因此實驗中存在的若干因素都可能會影響內(nèi)毒素去除效率,如:緩沖液的pH值,內(nèi)毒素濃度,內(nèi)毒素與樹脂的接觸時間,離子強度,溫度以及樣品的特性等。其中樣品pH值和離子強度對于內(nèi)毒素的去除效率影響尤其重要,純化前可用處理過的氯化鈉,0.1M的NaOH或0.1M HCl來調(diào)節(jié)離子強度或pH值。
【注】:① 雖然結(jié)合內(nèi)毒素的pH范圍在5-10,但是7-8的pH范圍是純化的*范圍。
② 合適的離子濃度可降低非特異性吸附,保持0.15-0.5M NaCl的條件可以得到一個較好的去除效果。
2. 活化樹脂:將預(yù)裝柱置于鐵架臺,垂直固定,去除頂部蓋子,打開流速控制器,使保護液在重力作用下流干,加入5ml再生緩沖液,調(diào)節(jié)流速控制器,保持流速在0.25ml/min(或10滴/min),待再生緩沖液流干后再加入5ml再生緩沖液,再重復(fù)操作2次,確保體系保持無熱源(即內(nèi)毒素)存在。即使是*次使用也必須進行這一步操作。該步操作大約需要60min完成。
3. 平衡樹脂:活化完畢后加入6ml的平衡緩沖液,調(diào)節(jié)流速控制器,保持流速在0.5ml/min,流干平衡緩沖液,再按此操作重復(fù)2次。這步操作大約需要40min完成。
4. 內(nèi)毒素去除:將流速控制器關(guān)閉,使用無熱源槍頭將樣品加入,打開控制器,控制流速不高于0.25ml/min,流出液體積達到1.5ml后,使用無熱源接收管接收樣品,樣品流干后,再加入1.5ml-3.0ml的平衡緩沖液淋洗,收集淋洗液。檢測樣品濃度及內(nèi)毒素水平。
5. 再次使用:如果流出樣品內(nèi)毒素水平未能達到預(yù)期值,需要將預(yù)裝柱按照步驟2重新再生,然后上樣純化。
6. 保存條件:如果預(yù)裝柱用完后需要保存,先用10ml平衡緩沖液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5ml的再生緩沖液(含0.02%的疊氮化那)。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
附表
問題 | 可能原因 | 解決方法 |
去除效率低 | 樣品與樹脂接觸時間太短 | 降低樣品流速,或通過低溫孵育來提高結(jié)合效率 |
樣品的pH值沒有在7-8之間 | 調(diào)節(jié)pH值至7-8 | |
去除或檢測系統(tǒng)受到外來因素污染 | 使用無熱源的實驗儀器,保證體系不受污染 | |
內(nèi)毒素與目的蛋白結(jié)合太牢固 | ① 優(yōu)化樣品的pH值,使它們解離; ② 增加樣品與樹脂的接觸時間 | |
樣品損失高 | 樣品通過非特異性作用結(jié)合在樹脂上 | 增加樣品和平衡緩沖液中NaCl的含量 |
目的蛋白與內(nèi)毒素結(jié)合牢固,一起結(jié)合在樹脂上 | ① 優(yōu)化樣品的pH值,使它們解離; ② 增加樣品與樹脂的接觸時間 | |
樣品被污染 | 樹脂用于處理過其他的樣品 | 盡量避免使用同一個預(yù)裝柱處理不同樣品。如果無法避免,可以在處理一個樣品之后,用10-20ml 2M NaCl淋洗樹脂,然后再處理另外一種樣品 |
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