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參考價(jià): | ¥ 675 |
訂貨量: | 1 件 |
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- Yeasen/翌圣生物 品牌
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- 上海市 所在地
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):1111更新時(shí)間:2023-02-23 16:29:19
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10ml |
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貨號(hào) | 40210ES10 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
ATP Luminescent 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒|ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit
產(chǎn)品描述
ATP是細(xì)胞內(nèi)最重要的能量分子,可以用來(lái)衡量細(xì)胞新陳代謝水平,并與活細(xì)胞數(shù)目具有良好的線(xiàn)性關(guān)系,因此,可通過(guò)ATP含量反應(yīng)活細(xì)胞的數(shù)目。本試劑盒借ATP依賴(lài)的熒光素酶催化的熒光素發(fā)光反應(yīng),通過(guò)化學(xué)發(fā)光信號(hào)測(cè)定細(xì)胞內(nèi) ATP含量,從而檢測(cè)細(xì)胞活力或定量檢測(cè)活細(xì)胞數(shù)目,靈敏度高、線(xiàn)性范圍寬。本試劑盒兼容少量樣品檢測(cè)以及大量樣品的高通量篩選檢測(cè)。
ATP Luminescent 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒本試劑盒提供的發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑線(xiàn)性范圍寬、靈敏度高、穩(wěn)定性好。96孔板中,在100個(gè)至100,000個(gè)細(xì)胞范圍內(nèi)有良好的線(xiàn)性關(guān)系,但不同細(xì)胞的檢測(cè)數(shù)量上限會(huì)有不同。此外,操作簡(jiǎn)單,試劑盒中提供的檢測(cè)試劑為即用型,讀數(shù)穩(wěn)定,檢測(cè)速度快,完成檢測(cè)僅需約10 min,無(wú)需洗滌細(xì)胞,也無(wú)需更換或去除培養(yǎng)液。相比于其他常見(jiàn)的細(xì)胞活力測(cè)定方法,如Calcein-AM、CCK-8等,發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)更加簡(jiǎn)單快捷。
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20 oC避光保存,有效期3年。
注意事項(xiàng)
1)試劑中含有熒光素酶,反復(fù)凍融會(huì)影響其活性。建議分裝后置于-20 ℃避光保存。
2)試劑及細(xì)胞樣品使用前均需平衡至室溫,以避免酶催化效果的影響。
3)藥物含量較高時(shí)可能會(huì)干擾熒光素酶反應(yīng),從而影響化學(xué)發(fā)光信號(hào)。建議設(shè)置含有藥物的細(xì)胞培養(yǎng)液照孔以排除溶劑的干擾。
4)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
5)本產(chǎn)品僅供科研使用。
使用方法
一、細(xì)胞培養(yǎng)
使用適合進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)的96孔板,每孔接種100 μL細(xì)胞(根據(jù)培養(yǎng)時(shí)間確定初始接種的細(xì)胞密度,檢測(cè)時(shí)每孔細(xì)胞數(shù)量不宜超過(guò)10萬(wàn)個(gè)),同時(shí)設(shè)置不含細(xì)胞的培養(yǎng)液的孔作為陰性對(duì)照。37 ℃,5 % CO2培養(yǎng)細(xì)胞。也可以設(shè)置細(xì)胞的濃度梯度,以得到最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。根據(jù)需要在合適的時(shí)間加藥處理細(xì)胞。
二、(可選)ATP標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作
把自備的ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液用 PBS稀釋成適當(dāng)?shù)臐舛忍荻龋?/span>96孔板每孔加入100 μL的標(biāo)準(zhǔn)品。
三、細(xì)胞活力檢測(cè)
1. 融解凍存的發(fā)光法檢測(cè)試劑,并平衡至室溫;
2. 取出細(xì)胞培養(yǎng)板,室溫平衡10 min;
3. 96孔板每孔加入100 μL檢測(cè)試劑(由于孔的邊緣效應(yīng),可能會(huì)導(dǎo)致發(fā)光信號(hào)不穩(wěn)定,不建議在邊緣鋪板);
4. 室溫振蕩2 min,以促進(jìn)細(xì)胞的裂解;
5. 室溫放置10 min,使發(fā)光信號(hào)趨于穩(wěn)定;
6. 使用多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè),檢測(cè)波長(zhǎng)560 nm。根據(jù)儀器要求設(shè)置相應(yīng)的參數(shù),每孔的檢測(cè)時(shí)間一般為0.25-1 s,具體需根據(jù)儀器的檢測(cè)靈敏度進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整;
7. 根據(jù)化學(xué)發(fā)光讀數(shù)計(jì)算細(xì)胞的相對(duì)活力,或根據(jù)ATP標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算ATP含量從而得出細(xì)胞的相對(duì)活力。
【注】:檢測(cè)效果因細(xì)胞的種類(lèi)不同而異,對(duì)于一些ATP含量特別高的細(xì)胞,在細(xì)胞數(shù)量達(dá)到100,000以上可能會(huì)出現(xiàn)化學(xué)發(fā)光讀數(shù)繼續(xù)升高,但喪失線(xiàn)性關(guān)系。
HB220913