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12603ES24Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 12603ES24 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：1340更新時(shí)間：2021-09-27 15:10:38
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 24T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 12603ES24 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit mRNA純化試劑盒 | 12603ES24 | 24 T | 616 |
12603ES96 | 96 T | 2266 |
產(chǎn)品描述
Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit是翌圣生物自主研發(fā)的專門用于純化mRNA的磁珠試劑盒。其中的mRNA Capture beads為偶聯(lián)了Oligo（dT）的微米級(jí)順磁性微球，通過(guò)與帶有poly（A）尾巴的mRNA相結(jié)合，將mRNA從10 ng-4 μg完整度良好的總RNA中進(jìn)行分離純化。
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品組分 | 組分名稱 | 12603ES24 | 12603ES96 |
12603-A | mRNA Capture Beads | 1.2 mL | 4.8 mL |
12603-B | Beads Binding Buffer | 1.2 mL | 4.8 mL |
12603-C | Beads Wash Buffer | 15 mL | 60 mL |
12603-D | Tris Buffer | 1.2 mL | 4.8 mL |
12603-E | Nuclease-free water | 1 mL | 4 mL |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。
2-8℃保存，有效期一年。避免冷凍！
注意事項(xiàng)
1.磁珠使用前務(wù)必要回溫至室溫，并充分混勻，否則可能影響樣品的回收效率。
2.操作過(guò)程要嚴(yán)格保證無(wú)RNase和核酸污染。
3.本產(chǎn)品和其他試劑配套使用時(shí)，請(qǐng)按照具體實(shí)驗(yàn)說(shuō)明來(lái)進(jìn)行操作。
4.想要獲得好的純化效果，需要有完整度良好的總RNA，確保RIN值在7.0及以上。
5.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
6.本產(chǎn)品僅用作科研用途！
使用方法
一、自備材料
磁力架，Nuclease-free離心管。
二、操作流程
圖1 .mRNA純化試劑盒操作流程
三、操作步驟
3.1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
將mRNA Capture Beads從2-8℃取出，靜置使其溫度平衡至室溫（約30 min）。
3.2 樣本準(zhǔn)備
在一個(gè)Nuclease-free PCR管中，用Nuclease-free water將10 ng-4 μg總RNA稀釋至50 μL，冰上放置備用。
3.3 mRNA與磁珠的結(jié)合
① 顛倒或渦旋振蕩混勻磁珠，吸取50 μL磁珠懸液加入至50 μL 總RNA樣品中，用移液器反復(fù)吹打6次，
使其充分混勻。
② 將磁珠與RNA的混合物置于PCR儀中，65℃，5 min；25℃，5 min；25℃，hold，完成RNA與捕獲磁珠的結(jié)合。
③ 將樣品置于磁力架中，室溫靜置5 min，使mRNA與總RNA分離，小心移除上清。
3.4 樣本的洗滌
① 將樣品從磁力架上取出，加入200 μL Beads Wash Buffer重懸磁珠，用移液器反復(fù)吹打6次以*混勻。
② 將樣品置于磁力架中，室溫靜置5 min，小心移除上清。
③ 重復(fù)上一步驟，共洗滌兩次。
3.5 mRNA樣本第一輪洗脫
① 將樣品從磁力架上取出，加入50 μL Tris Buffer重懸磁珠，用移液器反復(fù)吹打6次以*混勻。
② 將樣品放置于PCR儀中，80℃，2 min；25℃，hold，將mRNA洗脫下來(lái)。
3.6 mRNA與磁珠的再次結(jié)合
① 將樣品從PCR儀中取出，加入50 μL Beads Binding Buffer，用移液器反復(fù)吹打6次以*混勻。
② 室溫孵育5 min，使mRNA結(jié)合到磁珠上。
③ 將樣品置于磁力架中，室溫靜置5 min，小心移除上清。
3.7 樣本的洗滌
將樣品從磁力架上取出，加入200 μL Beads Wash Buffer重懸磁珠，用移液器反復(fù)吹打6次*混勻，將樣品重新放回至磁力架中，室溫靜置5 min，然后吸除全部上清。
【注】：最后需要用10 μL移液器吸干凈殘留液體。
3.8 mRNA樣本終洗脫
方案一：用于逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
將樣品從磁力架上取出，加入12 μL Nuclease-free water重懸磁珠，用移液器吹打6次以*混勻。將樣品置于PCR儀中80℃，2 min后，立即置于磁力架上，室溫靜置5 min。待溶液澄清后，小心吸取10 μL上清至另一新的Nuclease-free PCR管中。
方案二：用于RNA文庫(kù)的構(gòu)建。
可根據(jù)相關(guān)試劑盒說(shuō)明書加入相應(yīng)體積的Frag/Primer Buffer，進(jìn)行文庫(kù)構(gòu)建。
【注】：樣品可置于冰上繼續(xù)進(jìn)行NGS文庫(kù)構(gòu)建或其他分析應(yīng)用（建議立即進(jìn)行后續(xù)反應(yīng)），也可以置于-80℃保存。
HB210923
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