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參考價(jià): | 面議 |
- 11211ES03 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):721更新時(shí)間:2022-11-07 16:40:07
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1ML |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 11211ES03 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix 通用TaqMan多重?zé)晒舛縋CR預(yù)混液 | 11211ES03 | 1 mL | 1432.00 |
11211ES08 | 5*1 mL | 5732.00 | |
11211ES09 | 5 mL | 5732.00 | |
11211ES20 | 20 mL | 20635.00 | |
11211ES60 | 100*1 mL | 93235.00 | |
11211ES61 | 100 mL | 93235.00 |
產(chǎn)品描述
通用TaqMan多重?zé)晒舛縋CR預(yù)混液本產(chǎn)品是2×Mix預(yù)混合試劑,能夠?qū)崿F(xiàn)在單個(gè)反應(yīng)孔中進(jìn)行多達(dá)四重的熒光定量PCR反應(yīng)。本產(chǎn)品含有基因改造的抗體法熱啟動(dòng)Taq酶,極大地提高了擴(kuò)增靈敏度和特異性。同時(shí),本產(chǎn)品對(duì)多重反應(yīng)緩沖體系進(jìn)行了深度優(yōu)化,能夠提高反應(yīng)的擴(kuò)增效率,促進(jìn)低濃度模板的有效擴(kuò)增。本產(chǎn)品可用于基因分型和基因多重定量分析。
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |||||
11211ES03 (1 mL) | 11211ES08 (5*1 mL) | 11211ES09 (5 mL) | 11211ES20 (20 mL) | 11211ES60 (100*1 mL) | 11211ES61 (100 mL) | ||
11211 | 2×Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 1 mL | 5*1 mL | 5 mL | 20 mL | 100*1 mL | 100 mL |
運(yùn)輸與保存方式
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,有效期1年。
反應(yīng)體系f
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
2×Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 12.5 | 1× |
Primer mix (10 μM) | X | 0.1 μM-0.5 μMa |
Probe mix (10 μM) | X | 50 nM-250 nMb |
Rox reference dyec | 0.4 | 1× |
Template DNA/cDNAd | 1-10 | - |
ddH2O | up to 25e | - |
【注】使用前務(wù)必充分混勻,避免劇烈震蕩產(chǎn)生過多氣泡。
a) 引物濃度:Primer Mix中包含多對(duì)引物,通常每條引物終濃度為0.2 μM,也可以根據(jù)情況在0.1-0.5 μM間進(jìn)行調(diào)整;
b) 探針濃度:Probe Mix中包含多條不同熒光信號(hào)的探針,每條探針的濃度可根據(jù)具體情況在50-250 nM間調(diào)整;
c) Rox reference dye:使用在Applied Biosystems等Real Time PCR擴(kuò)增儀上,用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差;本產(chǎn)品不含Rox reference dye。如需,推薦使用貨號(hào)10200ES產(chǎn)品。
d) 模板稀釋:qPCR靈敏度*,建議將模板進(jìn)行稀釋使用。若模板為cDNA原液,則模板體積不超過總體積的1/10;
e) 反應(yīng)體系:推薦使用25 μL、30 μL或50 μL,以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
f) 體系配制:請(qǐng)于超凈工作臺(tái)內(nèi)配制,并使用無核酸酶殘留的槍頭、反應(yīng)管;推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
參考擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
變性 | 95℃ | 15 sec | 45 |
退火/延伸a | 60℃ | 30 secb |
【注】a) 退火/延伸:溫度和時(shí)間可根據(jù)設(shè)計(jì)的引物Tm值適當(dāng)調(diào)整。
b) 熒光信號(hào)采集:不同的qPCR檢測(cè)儀器所需的熒光信號(hào)采集時(shí)間不同,請(qǐng)根據(jù)最短時(shí)間限制進(jìn)行設(shè)置。幾種常見儀器的時(shí)間設(shè)定如下:
20 sec:Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sec:Applied Biosystems 7300
32 sec:Applied Biosystems 7500
注意事項(xiàng)
一、關(guān)于操作
1)請(qǐng)于使用前確保產(chǎn)品*解凍并*混勻,短暫離心收集至管底后,置于冰上備用。
2)為避免樣品間交叉污染和氣溶膠污染,推薦在超凈臺(tái)中進(jìn)行反應(yīng)體系的配制。
3)使用過程中避免產(chǎn)品的反復(fù)凍融。
4)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
二、實(shí)驗(yàn)方法
a) 引物設(shè)計(jì)
1. 引物必須具有特異性。
2. 引物的Tm值必須在58-60℃,而且各組引物的Tm差異應(yīng)控制在1-2℃。
3. 引物的長(zhǎng)度一般控制在15-30 bp之間。
b) 探針設(shè)計(jì)
1. TaqMan探針的Tm值要比對(duì)應(yīng)的引物高約10℃(68-70℃)。
2. TaqMan探針和引物間不能形成二聚體。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (UDG plus) | 11212ES03/08/60 | 1 mL/5 mL/100 mL |
Hieff® anti-Taq DNA Polymerase Antibody Taq酶單克隆抗體 | 31301ES60/80/90/92/93/94 | 100 μg/1mg/5mg/10mg/100mg/1000mg |
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 熱敏UDG | 10303ES60/76/96/98 | 100 U/500U/10000 U/100000 U |
dUTP, 100 mM Solution 脫氧尿苷三磷酸溶液(100 mM) | 10128ES72/80/96/98 | 250 μL/1mL/25mL/500mL |
HB220113