黄片大片在线免费观看,成人综合一区亚洲,亚洲伊人色综图,在线免费观看的www视频,亚洲精品粉嫩美女一区

翌圣生物科技（上海）股份有限公司

初級(jí)會(huì)員·12年

聯(lián)系電話

400-6111-883

您現(xiàn)在的位置：翌圣生物科技（上海）股份有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)>>細(xì)胞轉(zhuǎn)染>> 40806ES01Hieff Trans siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑

40806ES01Hieff Trans siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑

參考價(jià):	面議

參考價(jià):

面議

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

40806ES01 產(chǎn)品型號(hào)
Yeasen/翌圣生物 品牌
生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
上海市 所在地

訪問次數(shù)：857更新時(shí)間：2022-03-22 15:37:13

在線詢價(jià) 加入對(duì)比查看聯(lián)系電話

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!

分享

細(xì)胞生物學(xué)

翌圣生物科技（上海）股份有限

初級(jí)會(huì)員·12年

聯(lián)系人：: 曹女士

電話：: 400-6111-883

手機(jī)：

售后：: 4006-111-883

傳真：: 86-21-34615995

地址：: 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓

網(wǎng)址：: www.yeasen.com

在線咨詢給我留言

掃一掃訪問手機(jī)商鋪

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期	現(xiàn)貨	貨號(hào)	40806ES01
應(yīng)用領(lǐng)域	生物產(chǎn)業(yè)

Hieff TransTM siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑是一種非脂質(zhì)體PEI陽離子、兩性分子轉(zhuǎn)染試劑，為siRNA轉(zhuǎn)染到哺乳動(dòng)物細(xì)胞中而開發(fā)。適用于siRNA和miRNA的轉(zhuǎn)染。

產(chǎn)品介紹

Hieff Trans^TMin vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent

Hieff Trans^TM siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品編號(hào)	規(guī)格	價(jià)格（元）
Hieff Trans^TM in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent Hieff Trans^TM siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑	40806ES01*	0.1 mL	372.00
	40806ES02*	0.5 mL	1472.00
	40806ES03*	1.0 mL	2572.00

產(chǎn)品描述

Hieff Trans^TM siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑是一種非脂質(zhì)體PEI陽離子、兩性分子轉(zhuǎn)染試劑，為siRNA轉(zhuǎn)染到哺乳動(dòng)物細(xì)胞中而開發(fā)。適用于siRNA和miRNA的轉(zhuǎn)染。這種轉(zhuǎn)染試劑包裹siRNA或miRNA形成陽離子復(fù)合物，該復(fù)合物與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白聚糖相互作用吸附在細(xì)胞表面，通過內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞，形成內(nèi)含體。該轉(zhuǎn)染試劑具有質(zhì)子海綿的作用，能夠吸收溶酶體中的H⁺，質(zhì)子的不斷流入，導(dǎo)致復(fù)合體腫脹破裂，從而使外源siRNA或miRNA釋放到細(xì)胞質(zhì)中。

該產(chǎn)品可在廣泛的細(xì)胞系中，實(shí)現(xiàn)1 nM的siRNA超過90%的表達(dá)效率，避免了脫靶效應(yīng)。適用于多種細(xì)胞轉(zhuǎn)染，包括Hela、MCF-7、HepG2、CHO等貼壁細(xì)胞；以及難以轉(zhuǎn)染的懸浮細(xì)胞系，如K562或THP-1細(xì)胞，可達(dá)到80%的沉默效率；同時(shí)還包括一些原代細(xì)胞，原代人成纖維細(xì)胞和原代人肝細(xì)胞等，可達(dá)到80%的沉默效率。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋（wet ice）運(yùn)輸。產(chǎn)品4 oC保存，一年有效。不可冷凍！

注意事項(xiàng)

1）整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程使用無RNA酶和無熱原性的材料，如離心管、槍頭、緩沖液。

2）轉(zhuǎn)染前，確保siRNA是經(jīng)過PAGE純化和脫鹽處理過的，高純度的siRNA或者miRNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。

3）PEI陽離子轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該在4 oC保存，要注意避免多次反復(fù)長(zhǎng)時(shí)間開蓋，否則可能會(huì)導(dǎo)致PEI揮發(fā)，降低轉(zhuǎn)染效率。

4）轉(zhuǎn)染前一天，確保接種貼壁細(xì)胞密度在30%-50%左右，對(duì)于一些小細(xì)胞和生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞，接種密度可適當(dāng)擴(kuò)大2倍。

5）轉(zhuǎn)染前，確保siRNA/miRNA基因沉默表達(dá)不會(huì)影響細(xì)胞活力。

6）該產(chǎn)品只適合體外轉(zhuǎn)染，不能用于體內(nèi)轉(zhuǎn)染。

操作流程

一．貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染（以24孔板和轉(zhuǎn)染1 nM siRNA為例，其他培養(yǎng)板加樣體積請(qǐng)參考表1）
接種貼壁細(xì)胞

1.為了提高轉(zhuǎn)染效率，建議在轉(zhuǎn)染前一天接種細(xì)胞，接種細(xì)胞密度建議30%-50%左右，建議初次使用時(shí)設(shè)置梯度進(jìn)行優(yōu)化///佳使用量。

2.按照以下體系配制siRNA-PEI或miRNAPEI子核酸轉(zhuǎn)染試劑陽離復(fù)合物：

1）對(duì)于每孔細(xì)胞，使用100 μL無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基）稀釋8.4 ng siRNA (0.6 pmoles)，混勻。

2）立刻向100 μL的siRNA中加入2 μL的轉(zhuǎn)染試劑，旋渦10秒，充分混勻。

3）在室溫下孵育10 min，使得形成siRNA-PEI陽離子核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物。
【注】：孵育時(shí)間不要超過30min

4）在形成復(fù)合物過程中，移除細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基，每孔中加入500 μL新鮮預(yù)熱的*培養(yǎng)基。

5）直接將100 µL siRNA-PEI陽離子核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物加入細(xì)胞中，搖動(dòng)培養(yǎng)板，輕輕混勻。終體積為600 µL ，siRNA終濃度為1 nM。

6）37 ℃，5% CO₂培養(yǎng)箱培養(yǎng)，直至目的基因表達(dá)。建議一般mRNA表達(dá)水平通常在24-72 h，蛋白表達(dá)水平在48-96 h。

圖1 轉(zhuǎn)染貼壁細(xì)胞操作流程

【注】：由于靶基因、細(xì)胞類型、siRNA效價(jià)、靶mRNA的半衰期和靶蛋白的周轉(zhuǎn)率等因素，均會(huì)影響siRNA的轉(zhuǎn)染效率。建議選取siRNA濃度在1 nM到10 nM之間。轉(zhuǎn)染試劑的體積應(yīng)根據(jù)siRNA濃度和培養(yǎng)皿的大小進(jìn)行調(diào)整，請(qǐng)參見下表1。

表1 siRNA終濃度為1 nM時(shí)，轉(zhuǎn)染試劑、培養(yǎng)基的用量參考值

培養(yǎng)皿	siRNA物質(zhì)的量(pmoles)	每孔siRNA的含量（ng）	siRNA轉(zhuǎn)染試劑體積（µL）	形成PEI-siRNA復(fù)合物的體積（µL）	*培養(yǎng)基的體積（含血清+雙抗）	加入復(fù)合物后，細(xì)胞培養(yǎng)基總體積
96孔板	0.17	2.4	0.7-0.8	50	125 µL	175 µL
24孔板	0.6	8.6	1-3	100	500 µL	600 µL
12孔板	1.2	17	2-6	200	1 mL	1.2 mL
6孔板	2.2	31	4-12	200	2 mL	2.2 mL
25cm²培養(yǎng)瓶	4.4	62	10-20	400	4 mL	4.4 mL
75cm²培養(yǎng)瓶	10.5	147	30-50	500	10 mL	10.5 mL

表2 siRNA終濃度為10 - 50 nM時(shí)，轉(zhuǎn)染試劑、培養(yǎng)基的用量參考值

培養(yǎng)皿	siRNA轉(zhuǎn)染試劑體積（µL）	形成復(fù)合物的體積（無血清培養(yǎng)基）（µL）	*培養(yǎng)基的體積（含血清+雙抗）	加入復(fù)合物后，細(xì)胞總體積
96孔板	0.5-1.5	50	125 µL	175 µL
24孔板	2-4	100	500 µL	600 µL
12孔板	4-8	200	1 mL	1.2 mL
6孔板	8-16	200	2 mL	2.2 mL
25cm²培養(yǎng)瓶	15-25	400	4 mL	4.4 mL

二．懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染（以24孔板和轉(zhuǎn)染5 nM siRNA為例，其他培養(yǎng)板加樣體積請(qǐng)參考表4）
接種細(xì)胞

1.為了優(yōu)化懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染條件，與貼壁細(xì)胞相比，需要降低懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基的體積。根據(jù)培養(yǎng)皿大小和完整培養(yǎng)基的體積，推薦的接種懸浮細(xì)胞的數(shù)量如下表3所示。

表3 轉(zhuǎn)染當(dāng)天，根據(jù)培養(yǎng)皿的大小，接種懸浮細(xì)胞數(shù)量參考值

培養(yǎng)皿	底面積(cm²)	每孔接種細(xì)胞懸浮液體積（μL）	轉(zhuǎn)染當(dāng)天接種細(xì)胞數(shù)
384孔板	0.1	25	5 ×10³~1×10⁴
96孔板	0.32	50	1×10⁴~ ×10⁴
24孔板	2	200	1×10⁵ ~ 2×10⁵
12孔板	4.5	500	2×10⁵ ~ 4×10⁵
6孔板	9.6	1000	5×10⁵ ~ 2×10⁶
25cm²培養(yǎng)瓶	25-28	2000	2×10⁶~ 5×10⁶

2.按照以下體系配制siRNA-PEI陽離子核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物：

1）對(duì)于每孔細(xì)胞，使用100 μL無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基）稀釋21 ng siRNA (1.5 pmols)，混勻。

2）向100 μL的siRNA中加入4 μL的轉(zhuǎn)染試劑，立刻旋渦10秒，充分混勻。

3）在室溫孵育15 min，使得形成siRNA-PEI陽離子核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物。
【注】：孵育時(shí)間不要超過30 min

4）在每孔200 μL細(xì)胞懸浮液中，加入100 μL的siRNA-PEI陽離子核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物，輕輕混勻。終體積為300 µL，siRNA終濃度為5 nM。

5）37 ℃，5% CO₂培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-6 h后，再加入700 µL*培養(yǎng)基，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)板使其混勻。

6）繼續(xù)放入培養(yǎng)箱中孵育，直至目的基因表達(dá)。建議一般mRNA表達(dá)水平通常在24-72 h，蛋白表達(dá)水平在48-96 h。

【注】：為了優(yōu)化內(nèi)源性基因沉默，建議選取siRNA濃度在5 nM到20 nM之間。轉(zhuǎn)染試劑的體積應(yīng)根據(jù)siRNA濃度和培養(yǎng)皿的大小進(jìn)行調(diào)整，請(qǐng)參見下表4。

表4 siRNA濃度為5 nM時(shí)，在懸浮細(xì)胞中的參考值

培養(yǎng)皿	siRNA的濃度(pmoles)	每孔siRNA的含量（ng）	轉(zhuǎn)染試劑體積（µL）	形成復(fù)合物培養(yǎng)基體積（µL）	懸浮細(xì)胞的體積	轉(zhuǎn)染4-6h后另加入培養(yǎng)基的體積
384孔板	0.25	3.75	1 ± 0.5	25	25 µL	0 µL
96孔板	0.5	7.5	2 ± 1	50	50 µL	100 µL
24孔板	1.5	21	3 ± 2	100	200 µL	700 µL
12孔板	3.5	49	6 ± 4	200	500 µL	1 mL
6孔板	6	84	10 ± 8	200	1 mL	2 mL
25cm²培養(yǎng)瓶	12	168	15 ±10	400	2 mL	4 mL

表5 懸浮細(xì)胞中siRNA濃度、轉(zhuǎn)染試劑的用量參考值

培養(yǎng)皿	siRNA的終濃度/孔（nM）	轉(zhuǎn)染試劑的體積/孔（µL）
96孔板	1 ~ 20	1 ± 0.5
24孔板		2 ± 1
12孔板		3 ± 2
6孔板		10 ± 8
96孔板	20 ~ 50	1.5 ± 0.5
24孔板		3 ± 1
12孔板		5 ± 2
6孔板		15 ± 8

三．miRNA轉(zhuǎn)染操作流程
該轉(zhuǎn)染試劑也適合轉(zhuǎn)染miRNA，轉(zhuǎn)染貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞的具體操作請(qǐng)參考siRNA的操作流程。

相關(guān)產(chǎn)品

名稱	貨號(hào)	規(guī)格	價(jià)格（元）
Hieff Trans^TMLiposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑	40802ES01*	100 μL	168.00
	40802ES02*	0.5 mL	738.00
	40802ES03*	1.0 mL	1308.00
	40802ES08*	5×1mL	4878.00
Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸鈣法細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑	40803ES70	200 T	625.00
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml）	40804ES76	500 μL	180.00
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml）	40804ES86	5×500 μL	500.00
Hieff Trans^TM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 懸浮細(xì)胞專用脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑	40805ES01	100 μL	228.00
	40805ES02	0.5 mL	948.00
	40805ES03	1.0 mL	1678.00
	40805ES08	5×1 mL	5268.00
Hieff Trans^TM in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑	40806ES01*	0.1 mL	372.00
	40806ES02*	0.5 mL	1472.00
	40806ES03*	1.0 mL	2572.00

HB200716

相關(guān)產(chǎn)品

Polybrene 聚凝胺(10 mg/mL)

￥面議
16814ESHieff® Fast Cell Direct Lysis set (for probe)

￥625
16813ESHieff® Fast Cell Direct qPCR set (for sybr)

￥615
16812ESHieff® Fast Cell Direct RT set (for sybr)

￥1038

黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

400-6111-883

細(xì)胞生物學(xué)

Yeasen/翌圣生物

其他品牌

BioAssay Systems

Polyplus

Sigma-Aldrich

會(huì)員登錄

收藏該商鋪

提示

黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

400-6111-883

細(xì)胞生物學(xué)

Yeasen/翌圣生物

其他品牌

BioAssay Systems

Polyplus

Sigma-Aldrich

會(huì)員登錄

收藏該商鋪

提示

客戶評(píng)價(jià)列表