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參考價(jià): | 面議 |
- 10170ES50 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):464更新時(shí)間:2022-02-09 14:49:53
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- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50 T |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 10170ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Animal Tissue PCR Component 動(dòng)物組織PCR組分 | 10170ES50 | 50 T | 125.00 |
Animal Tissue PCR Component 動(dòng)物組織PCR組分 | 10170ES70 | 200 T | 435.00 |
產(chǎn)品描述
本試劑盒中的2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)是即用型的PCR預(yù)混合溶液,含有熱啟動(dòng)Taq DNA Polymerase,dNTP以及優(yōu)化的緩沖體系,只需加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增,大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)的操作步驟,可以高通量操作并提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性。本試劑盒中的PCR Enhancer是一種由多種成分組成的混合添加劑,在PCR反應(yīng)中,PCR Enhancer能夠有效降低高GC模板和具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)模板的解鏈溫度,極大地減少DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)PCR的影響,增加PCR反應(yīng)的靈敏度和特異性,且兼容幾乎所有DNA聚合酶的擴(kuò)增體系。本試劑盒主要應(yīng)用于動(dòng)物基因型鑒定,建議搭配動(dòng)物組織裂解組分(Cat NO.19698ES)一起使用,效果更佳。
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
10170ES50(50 T) | 10170ES70(200 T) | ||
10170-A | 2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye) | 500 μL | 2 ×1 mL |
10170-B | 5 × PCR Enhancer | 200 μL | 800 μL |
b)2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye) 包含 PCR 擴(kuò)增所需要的熱啟動(dòng) Taq DNA 聚合酶、dNTP 和 Mg2+等;已混有溴酚藍(lán)染料作為電泳指示劑, PCR 產(chǎn)物可以直接進(jìn)行電泳。
c)5 × PCR Enhancer :高GC含量擴(kuò)增(如大于65%)時(shí),建議使用5 × PCR Enhancer。
運(yùn)輸與保存
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,有效期1年。
PCR反應(yīng)體系
組分 | 體積(μL) | 終濃度 |
2× Tissue Direct PCR Mix(With Dye) | 10 | 1 × |
Forward Primer(10 μM) | 0.5 | 0.25 μM |
Reverse Primer(10 μM) | 0.5 | 0.25 μM |
裂解產(chǎn)物(DNA模板) | 2 | - |
無(wú)菌超純水 | To 20 | - |
【注】:各組分使用前應(yīng)充分混勻。
a)模板使用量:建議總體系的5-20%之間,避免超過(guò)總體系的20%。
b)引物終濃度:反應(yīng)性能較差時(shí),推薦在 0.1- 0.5 μM 范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度。
c)反應(yīng)體系:推薦使用 20 μL,以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
d)體系配制:配制好PCR反應(yīng)體系,置于渦旋儀上渦旋混勻,瞬時(shí)離心將反應(yīng)液集于管底。
e)對(duì)照反應(yīng):建議進(jìn)行PCR時(shí),設(shè)置陽(yáng)性和陰性PCR對(duì)照反應(yīng)以便于排除假陽(yáng)性或假陰性的干擾。
PCR反應(yīng)條件
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 35 |
退火* | 60℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 20 sec | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*退火溫度:請(qǐng)參考引物的理論 Tm 值,退火溫度可設(shè)置低于引物理論值5℃,或通過(guò)梯度 PCR 確定最佳溫度。
注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為長(zhǎng)期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響 PCR 效率。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服、佩戴、眼罩、一次性手套等采取防護(hù)性措施進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
3. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
HB210811