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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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20563ES03NHS活化磁珠(NHS-Activated MagBeads)
| 參考價 | ￥1398 |
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 20563ES03 型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產商 廠商性質
- 上海市 所在地
規(guī)格
| 1ml | 1398元 | 99 件 可售 |
訪問次數(shù)：452更新時間：2023-12-11 17:35:53
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- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1ml |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 20563ES03 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè) |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
NHS活化磁珠(NHS-Activated MagBeads) | 20563ES03 | 1 mL | 1398.00 |
20563ES08 | 5×1 mL | 3948.00 |
產品描述
NHS活化磁珠(NHS-Activated MagBeads)是一種預活化的聚合物磁性微球，表面為NHS 基團修飾，能夠與含氨基的蛋白或多肽的偶聯(lián)，其主要用于親和純化或者分析檢測抗體、抗原和其他生物分子。為任何所需蛋白質偶聯(lián)到磁珠表面提供了一種便利的方式。與傳統(tǒng)的羧基、氨基磁珠相比，表面含NHS基團的磁珠無需事先采EDC/NHS或戊二醛進行活化，只需簡單地將含氨基的生物配體溶解于偶聯(lián)緩沖液中，將蛋白溶液與磁珠孵育2-4h便可將生物配體，通過 NHS-酯化學共價偶聯(lián)到磁珠上。這一過程不需要危險化學品或冗長的反應方案，具有操作簡單、偶聯(lián)條件溫和、生物配體偶聯(lián)快速高效的優(yōu)點。
活化的磁珠含有能與伯胺反應以形成穩(wěn)定的酰胺鍵的 N-羥基-琥珀酰亞胺 (NHS) 功能基團。一旦它們共價連接，固定的蛋白不會從磁珠表面浸出。在實驗中使用制備的磁珠時，非特異性結合可忽略不計，因為在偶聯(lián)程序中，非反應 NHS-酯基團被*封閉。NHS 活化磁珠可通過手動磁力架進行偶聯(lián)和處理。偶聯(lián)后，制備的磁珠通常用于親和純化程序。
該磁珠適用于含氨基的蛋白、抗體、酶、多肽、核酸等生物分子的共價偶聯(lián)。偶聯(lián)后，制備的磁珠可應用于免疫檢測、免疫沉淀、免疫共沉淀、蛋白/抗體分離純化等實驗。該產品生物配基偶聯(lián)效率高，可高效簡單偶聯(lián)且共價偶聯(lián)穩(wěn)定，可避免抗體與目標蛋白的共洗脫，其實際使用效果可替代DynaBeads Antibody Coupling kit。
產品性質
基質 | 聚合物磁性微球 |
偶聯(lián)量 | >10 μg IgG/mg 介質 |
磁珠濃度 | 10 mg/mL |
微球粒徑 | 1 μm |
儲存緩沖液 | 100%異丙醇 |
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃儲存，有效期2年。
注意事項
1.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2.本產品僅作科研用途！
使用方法
一、緩沖液配制
所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22 μm或0.45 μm濾膜過濾。
清洗液：1 mM HCI
偶聯(lián)液：0.2 M NaHCO3, 0.5 M NaCI, pH8.0
封閉液：0.5 M 乙醇胺，0.5 M NaCI, pH8.3 或 0.1 M Tris, pH8.5
清洗液1：0.1 M乙酸-乙酸鈉，0.5 M NaCI, pH3.0
清洗液 2：0.1 M Tris-HCI, 0.5 M NaCI, pH8.0
保護液: PBS , 0.01% Tween-20,0.02% NaN3
【注】偶聯(lián)液可以選擇碳酸鹽、磷酸鹽等不含氨基的緩沖液體系。緩沖液體系中加入一定濃度的鹽離子減少非特異性吸附。
二、樣本制備
樣品用偶聯(lián)液溶解，濃度約5-10 mg/ml。
三、抗原偶聯(lián)
1 .取適量磁珠，吸去保護液，用1 mM HCI清洗液清洗一次，再用偶聯(lián)液清洗一次。磁珠加入清洗液，混勻后立刻放在磁力架上吸附，吸棄上清?？梢赃x用預冷的溶液快速清洗，減少預活化介質的水解。
溶解好的樣品加入至清洗好的磁珠中，磁珠：樣品溶液體積比約1:1-2。
28°C振蕩反應2-4 h或4°C過夜。確保磁珠懸浮起來，否則會大大影響偶聯(lián)效率。
反應完后收集偶聯(lián)樣品，以便檢測偶聯(lián)效率。去離子水清洗磁珠，加入2倍磁珠體積的封閉液，28°C振蕩反應1 h。
【注】偶聯(lián)后無法用紫外吸收測定上清蛋白濃度，建議用電泳或者BCA定量法檢測偶聯(lián)效率。
將上述反應體系取出，流干其中的封閉液，用3倍磁珠體積的去離子水清洗磁珠，清洗液1、去離子水、清洗液2和去離子水重復沖洗2 次，然后以10 mg/ml的濃度保存在保護液中，于2-8°C保存。
四、純化流程
以磁珠偶聯(lián)抗體，純化抗原為例的純化步驟。
4.1緩沖液的準備
【注】所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22 μm或0.45 μm濾膜過濾。
平衡/洗雜液：0.15 M NaCI, 20 mM Na2HPO4, pH 7.0
洗脫液：0.1 M甘-氨酸，pH 3.0
中和液：1 M Tris-HCI, pH 8.5
4.2磁珠預處理 將偶聯(lián)好的磁珠混合均勻，取計算量（根據(jù)上樣量和磁珠載量計算）的磁珠懸浮液（后文均以100 μL為例），轉移至離心管中，放置在磁分離器上，靜置大約1 min，待溶液變澄清后，用移液器吸棄上清液。再將離心管從磁分離器上取下來，加入與所取磁珠懸浮液等體積（100 μL）的平衡液，使用槍頭反復吹打5次，將離心管置于磁分離器上，大約1min，待溶液變澄清后，用移液器吸棄上清液，重復洗滌2次。
4.3樣品吸附 在預處理的磁珠中加入樣品溶液，漩渦振蕩均勻，在室溫下置于翻轉混合儀或者手工輕輕翻轉離心管，使樣品和磁珠充分接觸并吸附，混合30 min以上，置于磁分離器上，大約1min，待溶液變澄清后，吸棄上清液。
4.4洗雜 向離心管中加入初始磁珠懸浮液5倍體積（500 μL）的洗雜液，振蕩懸浮，混合1-2 min，然后置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，吸棄上清液。該操作重復兩次。
4.5洗脫 在上述離心管中加入3-5倍懸浮液體積（300-500 μL）的洗脫液，用移液器吹打5次，然后在室溫下置于翻轉混合儀或者手工輕輕翻轉離心管，5-10 min后，置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，吸取上清液，收集洗脫組分，即為目標蛋白。
4.6洗脫組分中和 向洗脫組分中加入洗脫體積十分之一的中和液，調節(jié)pH值至7.0-8.0。
4.7磁珠保存 使用后的磁珠用1 mL洗脫液重懸磁珠，然后置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，吸棄上清液。該操作重復兩次。再加入1 mL 平衡液，懸浮磁珠，然后置于磁分離器上，大約1min,待溶液變澄清后，吸棄上清液。加入保護液至磁珠濃度為10 mg/mL, 置于2-8℃保存。
HB220324
