產(chǎn)品簡介

dsDNA BR Assay Kit 是一種簡便、靈敏、準確、寬范圍的雙鏈 DNA（dsDNA BR)熒光定量檢測試劑盒，在2~1000 ng 區(qū)間具有良好的線性關(guān)系。本試劑盒包含熒光檢測試劑、緩沖液及相關(guān)的 dsDNA BR 標準品，使用前先將熒光檢測試劑用緩沖液稀釋成工作液，然后加入待測 dsDNA 樣品，制作標準曲線后，使用熒光酶標儀或 Qubit®熒光儀進行讀數(shù)。該產(chǎn)品對常規(guī)的污染物如蛋白質(zhì)、鹽類等具有較好的耐受性。

組分信息

儲存條件

2-8℃避光保存 6 個月，冰袋運輸，請注意避免反復凍融。

注意事項

1）熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅；

2）檢測試劑 dsDNA BR Buffer 略起泡，使用時上下顛倒混勻，避免劇烈震蕩；

3）dsDNA BR 標準品，每次使用輕柔震蕩或顛倒混勻，瞬時離心數(shù)秒收集管蓋及管壁上的液體；

4）為保證定量結(jié)果的精確，請使用校準后的移液器操作，樣品濃度較低時請增大待測樣品投入體積；

5）檢測工作液請現(xiàn)用現(xiàn)配，當天使用完畢，使用前請用標準品校準。

6）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作；

7）本產(chǎn)品僅用作科研用途！

實驗步驟

使用 Qubit熒光儀進行 dsDNA BR 定量檢測分析

1.實驗準備

1）在使用前，將試劑盒中的各組分恢復至室溫（室溫放置約半小時）。檢查 dsDNA BR Reagent（組分 A）是否有沉淀，若有沉淀物，可將該試劑至于 37℃水浴鍋中溫育，并輕柔混勻直至沉淀物溶解。

準備足夠量 0.5 mL PCR 薄壁管并標注。請勿在 PCR 管側(cè)壁標注，以免影響熒光信號采集。

2.配制檢測工作液

在避光塑料容器中，使用 dsDNA BR Buffer 按比例將適量 dsDNA BR Reagent 稀釋至 1×（例：取 1 μL dsDNA BR Reagent， 加入 199 μL dsDNA BR Buffer），上下顛倒混勻。工作液現(xiàn)用現(xiàn)配，每次配制檢測工作液時要使用潔凈的容器。

3.配制待檢樣品

1）配制待檢標準品 1 和標準品 2。取 190 μL 檢測工作液至標準品 PCR 管中，分別加入 10 μL dsDNA BR Standard 1 和 dsDNA BR Standard 2 至相應標記的標準品 PCR 管中，輕柔渦旋振蕩 2-3 sec，盡量避免氣泡產(chǎn)生，瞬時離心數(shù)秒。

2）配制待檢樣品。取 180-199 μL 檢測工作液至樣本 PCR 管中，分別加入 1-20 μL 待檢樣本，使 PCR 管中每個樣本終體積為 200 μL，輕輕渦旋振蕩 2-3 sec，盡量避免氣泡產(chǎn)生。

4.檢測

1）將所有待檢 PCR 管置于室溫避光孵育 2 min。

2）按照 Qubit熒光儀的操作說明，選擇 dsDNA BR 檢測程序，使用待檢標準品校正熒光曲線后進行待檢樣品的濃度測定。