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當前位置：> 供求商機> Cell Counting Kit（CCK-8/WST-8）試劑盒
所在地：YEASEN
貨物所在地：上海上海市
更新時間：2024/9/1 21:01:14
訪問次數(shù)：289
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檢測原理：
◆ Cell Counting Kit簡稱CCK8,（CCK-8/WST-8）試劑盒，是一種基于WST-8（化學名：2-（2-甲氧基-4-硝苯基）-3-（4-硝苯基）-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
◆ WST-8屬于MTT的升級產品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物（formazan）。顏色的深淺與細胞的增殖成正比，與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細胞數(shù)量。
◆ CCK法應用非常廣泛，如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。
CCK方法的優(yōu)勢：
◆ 表1 CCK法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較
| MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK法 | |
| 甲臜產物的水溶性 | 差（需加有機溶劑溶解再檢測） | 好 | 好 | 好 |
| 產品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
| 使用方法 | 配成溶液后使用 | 現(xiàn)配現(xiàn)用 | 即開即用 | 即開即用 |
| 檢測靈敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
| 檢測時間 | 較長 | 較短 | 較短 | zui短 |
| 檢測波長 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
| 細胞毒性 | 高，細胞形態(tài)*消失 | 很低，細胞形態(tài)不變 | 很低，細胞形態(tài)不變 | 很低，細胞形態(tài)不變 |
| 試劑穩(wěn)定性 | 一般 | 較差 | 一般 | 很好 |
| 批量樣品檢測 | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 |
| 便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
◆ 酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾；
◆ 細胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時間反復用酶標儀讀數(shù)從而找到*測定時間。
CCK法的操作步驟（更多內容請見說明書）：
實驗一：細胞活性檢測
1、在96孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預培養(yǎng)（
2、向每孔加入10 μL CCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù)）。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內孵育1-4小時。
4、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。
5、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10 μL
實驗二：細胞增殖-毒性檢測
1、在96孔板中配置100μL的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預培養(yǎng)24小時（
2、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測物質。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當?shù)臅r間（例如：6、12、24或48小時）。
4、向每孔加入10μL CCK溶液（注意不要再孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù)）。
5、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內孵育1-4小時。
6、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。
7、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10 μL
注意：如果待測物質有氧化性或還原性的話，可在加CCK之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉藥物影響。當然藥物影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。
活力計算：
細胞活力*（％）=[A（加藥）-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）] ×100
A（加藥）：具有細胞、CCK溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養(yǎng)基和CCK溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A（0加藥）：具有細胞、CCK溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
*細胞活力：細胞增殖活力或細胞毒性活力
保存條件：
產品報價：
| 貨號 | 名稱 | 產地 | 規(guī)格 | 報價（元） | 庫存 |
| QF0025 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 100次/1ml | 150 | 是 |
| QF0026 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 500次/5ml | 480 | 是 |
| QF0027 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 1000T/10ml | 920 | 是 |
| QF0028 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 3000T/30ml | 1833 | 是 |
| QF0029 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 10000T/100ml | 5122 | 是 |
翌圣生物科技（上海）股份有限公司 - 主營產品： 抗體,小分子抑制劑,熒光染料,干細胞培養(yǎng),血清
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