近年來，類器官技術(shù)進入新的發(fā)展階段，從科研實驗室逐漸融入到醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)和制藥等諸多領(lǐng)域，帶來了翻天覆地的變革。類器官培養(yǎng)是一項系統(tǒng)工程，需要多個維度的標準化規(guī)范，評價類器官養(yǎng)的好不好，除了精巧的培養(yǎng)環(huán)境設(shè)計外，專業(yè)化的類器官團隊都有必要建立有待不斷規(guī)范化的實驗流程SOP[1]。
但是，利用微量移液工具移取類器官活細胞組織可能是一個令人頭疼的問題。移液作為類器官培養(yǎng)過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，很大程度上影響到了類器官細胞分配的活性和均一性，我們特別總結(jié)了5個分液技巧，助您輕松搭建標準化工作流程。
類器官培養(yǎng)物樣品移液面臨的挑戰(zhàn)
培養(yǎng)類器官是一個漫長的過程，需要對培養(yǎng)條件進行多次調(diào)整，以促進類器官的形成和成熟。所有三維培養(yǎng)物都需要一個初始細胞源——這個細胞源一般來自珍貴的臨床活檢或手術(shù)切除樣本，或具有干細胞特性的特定細胞。
移液作為三維細胞培養(yǎng)各階段工作不可避免的基本組成部分，每個移液動作可能只持續(xù)幾秒鐘，但使用正確的工具和技術(shù)對于成功創(chuàng)建類器官培養(yǎng)物和保持培養(yǎng)物批間一致性非常重要。特別是在處理三維細胞培養(yǎng)等挑戰(zhàn)性樣本時，需要特別注意以下方面：
三維細胞模型比二維細胞培養(yǎng)物更脆弱。移液力度過大可能會破壞這些結(jié)構(gòu)，進而影響細胞的行為和存活。
為了讓類器官均勻生長并生成可靠的數(shù)據(jù)，您需要讓細胞在三維結(jié)構(gòu)中均勻分布。不一致的移液操作會導(dǎo)致一個區(qū)域細胞集中成團，而另一個區(qū)域細胞較少。
用于支持類器官形成的基質(zhì)介質(zhì)（如 Matrigel 或水凝膠）液體非常粘稠，處理時增加了移液的難度。
處理類器官的五個移液技巧
移液動作雖然簡單，但移液器卻是一種復(fù)雜的儀器。除了清潔和維護外，基本移液技巧還有很多變化，尤其在處理三維細胞培養(yǎng)等具有挑戰(zhàn)性的樣品時，以下這五個移液技巧將會顯著提升您的移液操作水平：
1
調(diào)整您的移液技巧
在將源細胞接種到特殊的生長培養(yǎng)基、更換培養(yǎng)基抑或收獲細胞時一定要緩慢。輕柔、一致地移液對于保持類器官精密的結(jié)構(gòu)完整性也至關(guān)重要。
對于水凝膠等粘性溶液，應(yīng)采用反向移液。
在應(yīng)對需要混合類器官培養(yǎng)試劑的場景，電動移液器可幫助您找到并設(shè)定極佳的混合時間和速度以獲得均勻混合的結(jié)果。
2
選擇合適的移液器吸頭
最新的ISO 8655:2022 移液器校準指南強調(diào)移液器和吸頭是一整套系統(tǒng)工具。
始終使用同一制造商生產(chǎn)的移液器和吸頭以獲得最佳移液效果。
靈活考慮不同的吸頭選項，例如寬孔吸頭非常適合某些三維細胞培養(yǎng)應(yīng)用。
3
規(guī)范您的實驗方案
移液的微小差異都會導(dǎo)致數(shù)據(jù)的變化。為您的三維細胞培養(yǎng)工作流程制定標準化移液實驗方案，讓實驗室中的每個人都遵循相同的程序。
使用電動移液器如Picus® 電動移液器，讓實驗室中的每個人遵循相同的程序。
4
不要忽視人體工學(xué)
長時間移液會讓人感到疲勞。
賽多利斯符合人體工程學(xué)的設(shè)置和正確的移液技術(shù)可以減輕疲勞，提高整體精度，使用起來明顯更舒適，并能有效防止手部疲勞。
5
定期保養(yǎng)您的移液器
未校準的移液器會給細胞實驗帶來負面結(jié)果。
請按照制造商推薦的維護計劃定期校準移液器，使其保持最佳工作狀態(tài)。
成為類器官移液實驗大滿貫選手
每種三維細胞模型在反映疾病特征方面都有其固有的局限性，合適的三維細胞模型是基礎(chǔ)研究和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)成功應(yīng)用的基礎(chǔ)。隨著科學(xué)家對疾病驅(qū)動因素和治療方法的深入了解，我們應(yīng)更加關(guān)注包括類器官在內(nèi)的三維細胞模型構(gòu)建流程的標準化，賽多利斯創(chuàng)新的移液產(chǎn)品解決方案和類器官實驗移液技巧定能助您在這一領(lǐng)域的研究中乘風(fēng)破浪。
此外，我們于今年隆重推出的自動化納升級分液系統(tǒng)I.DOT MINI將助您在基于多孔板的類器官培養(yǎng)液分液、不同藥物濃度梯度或組合刺激的復(fù)雜高通量三維細胞模型實驗中獲得極微量、超快速、更節(jié)省的自動化分液體驗。下游結(jié)合強大的Incucyte 實時活細胞成像分析系統(tǒng)針對多孔板中類器官的生長和活力進行全自動長時程觀察，加速實現(xiàn)類器官培養(yǎng)分液和形態(tài)學(xué)監(jiān)測的標準化自動工作流程。
I.DOT MINI
Incucyte®
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-參考文獻-
[1] Standardization of organoid culture in cancer research. Cancer Med, 2023 Jul;12(13):14375-14386. doi: 10.1002/cam4.5943. 2023 Apr 20.
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