細(xì)胞外囊泡(EV, Extracelluar Vesicle)是當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)和新診療療法的熱點(diǎn)研究領(lǐng)域。EV根據(jù)直徑大小和生物生成過程分為多種類型,其中大多數(shù)尺寸較小的EV被稱為外泌體(Exosome)。國家發(fā)改委于2022年印發(fā)的《“十四五”生物經(jīng)濟(jì)發(fā)展規(guī)劃》將“外泌體治療產(chǎn)品”首次納入國家經(jīng)濟(jì)發(fā)展規(guī)劃,2023年在“囊泡”和“外泌體”方向的國自然金額累計近1.5億元,立項(xiàng)近390項(xiàng),超過前兩年立項(xiàng)數(shù)[1]。
截止至目前,EV和外泌體在國內(nèi)外的研究熱潮不減[2],在產(chǎn)業(yè)端也受到醫(yī)藥、生物技術(shù)、體外診斷產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)企業(yè)的爭相投資。
圖1. PubMed檢索外泌體相關(guān)研究論文發(fā)表數(shù)量
圖2. PubMed檢索Extracelluar Vesicle相關(guān)研究論文發(fā)表數(shù)量
活細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)EV樣本制備的挑戰(zhàn)
在EV研究的初步階段,往往需要從干細(xì)胞等活細(xì)胞培養(yǎng)基,或血液、尿液和唾液等體液中分離出足夠量和高純度的EV。傳統(tǒng)的分離技術(shù)有沉淀法(P)、超速離心(UF)、體積排阻色譜法(SEC)、免疫親和捕獲(IAC)。這些方法往往耗時耗力,有時因?qū)嶒?yàn)者操作原因?qū)е翬V得率和純度都不甚理想。
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賽多利斯EV分離純化標(biāo)記新方案
為應(yīng)對EV分離和純化的挑戰(zhàn),賽多利斯推出了一種創(chuàng)新的Incucyte® Exofluor細(xì)胞外囊泡(綠色)標(biāo)記試劑盒。這款試劑盒結(jié)合了超濾法和膜過濾技術(shù),能夠均一化EV尺寸并適應(yīng)未來的規(guī)?;a(chǎn)。它提供了一個簡化且快速的操作流程,特別優(yōu)化了針對外泌體囊泡顆粒的分離。接下來讓我們一起來詳細(xì)了解一下吧。
Incucyte® Exofluor
細(xì)胞外囊泡(綠色)
快速標(biāo)記試劑盒
輕松3步的活細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)EV樣品快速制備
Step 1
EV熒光標(biāo)記30分鐘
將EV熒光染料與各種來源EV和外泌體的懸液混合孵育
Step 2
超濾去除游離熒光染料5分鐘
在賽多利斯Vivaspin® 2 超濾柱中去除游離的EV染料
Step 3
過濾去除非EV雜質(zhì)
已去除游離的EV染料的EV懸液裝入注射器,通過賽多利斯Minisart® (0.22 μm) 過濾器來同時完成滅菌并去除殘留的EV聚集體
圖3. Incucyte® Exofluor細(xì)胞外囊泡(綠色)標(biāo)記試劑盒簡便的操作流程
通過將從以上3步法簡便快速獲得的熒光標(biāo)記EV和外泌體, Incucyte® 實(shí)時活細(xì)胞成像分析系統(tǒng)與Cell-by-Cell Analysis 和Basic Analyzer軟件模塊配合使用,為您的EV和外泌體活細(xì)胞攝入量化成像研究賦能諸多實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性提升和新發(fā)現(xiàn)的洞察便利:
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如果您正在從事EV和外泌體在腫瘤學(xué)、干細(xì)胞發(fā)育生物學(xué)、細(xì)胞代謝、精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)等基礎(chǔ)研究,或者正在開展前沿小分子藥物、抗體和基因細(xì)胞治療等生物藥新療法的研發(fā),需要表征細(xì)胞內(nèi)EV攝取行為的同時評估宿主細(xì)胞數(shù)量形態(tài)的變化,或更好地了解EV攝入和有效載荷對生物功能的影響,那么賽多利斯EV標(biāo)記試劑盒將是您理想的選擇!
《Incucyte® 活細(xì)胞成像分析系統(tǒng)
細(xì)胞外囊泡分析方案》
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-參考文獻(xiàn)-
[1] 1.55億!2023年外泌體相關(guān)國家自然科學(xué)基金盤點(diǎn)(blog.sciencenet.cn)
[2] PubMed (https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/)
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