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放射免疫檢驗標本采集要求
一、樣本準備
1.樣本狀態(tài)
一般需在安靜狀態(tài)下采集標本,因運動能影響許多項目的測定結(jié)果。活動的影響可分暫時
和持續(xù)性兩類。暫時性影響如使血漿脂肪酸含量減少;丙氨酸、乳酸含量增高。持續(xù)性影響,
如激烈運動后使CK、LDH、ALT、AST 和GLU 等的測定值升高,有些恢復較慢,如ALT 在停
止運動1h 后測定,其值仍可偏高30%~50%。
2.飲食
多數(shù)試驗要求在采血前禁食12h,因為飲食中的不同成分可直接影響實驗結(jié)果。
(1) 餐后血液中ALT、GLU、BNU、Na 等均可升高,但空腹達24h 以上,可出現(xiàn)低血糖,
血中TG、游離甘油及脂肪酸可增高。
(2) 高脂餐后2~4h 采血,多數(shù)人ALP 含量增高,主要來自腸源性同工酶,且與血型有密
切關(guān)系,O 型或B 型兼為Le+分泌型者增高更為明顯。
(3) 高蛋白質(zhì)餐使血漿尿素、血氨增加,但不影響肌酐含量。
(4) 高比例不飽脂肪酸食物,可減低膽固醇含量;香蕉、菠蘿、番茄可使尿液5-羥色胺增
加數(shù)倍。
(5) 含卡非因飲料,可使血漿游離脂肪酸增加,并使腎上腺和腦組織釋放兒茶酚胺。
食物如含有動物血液,可引起糞隱血假陽性。
(7) 飲酒后使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加,長期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏
高、平均血細胞體積增加、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶亦較不飲酒的樣本為高,甚至可以將這三項作為嗜酒
者的篩選檢查。
吸煙:癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達8%,而不吸煙者含量在1%以下。此外,
兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高,血液學方面亦有變化,白細胞數(shù)增加、嗜酸粒細胞
減少、中性粒細胞及單核細胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細胞體積偏高。吸煙組血漿硫氰酸
鹽濃度明顯高于非吸煙組。
3.藥物
藥物對檢驗的影響非常復雜,在采樣檢查之前,以暫停各種藥物為宜,如某種藥物不可停
用,則應了解可能對檢驗結(jié)果產(chǎn)生的影響。
4.體位
體位影響血液循環(huán),由于血液和組織間液因體位不同而平衡改變,則細胞成分和大分子物
質(zhì)的改變較為明顯,例如由臥位改為站位,血漿ALB、TP、酶、Ca、膽紅素、Tch 及TG 等濃
度增高;Hb、HCT、RBC 等亦可增加。由于體位的因素,在確立參考值時,應考慮門診和住院
樣本可能存在的結(jié)果差異,故采集標本時要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。
5.時間
樣本準備還應考慮樣本的生物鐘規(guī)律,特別是激素水平分析,如女性生殖激素與月經(jīng)周期
密切相關(guān);膽固醇則在經(jīng)前期zui高,排卵時zui低;纖維蛋白原在經(jīng)前期zui高,血漿蛋白則在排
卵時減少。生長激素于入睡后會出現(xiàn)短時高峰。膽紅素、血清鐵以清晨zui高;血漿蛋白在夜間
降低;血Ca 往往在中午出現(xiàn)zui低值。故采血時間應在相同時間進行。
二、標本采集
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標本采集是直接關(guān)系檢驗結(jié)果的基本要素,如果標本采集不當,即使的儀器設備也難
以彌補在采集標本時引入的誤差和錯誤。
現(xiàn)將各種標本的采集要點分述如下:
(一) 血液標本
采血管分普通管、抗凝管和促凝管三類。常用抗凝劑有草酸鉀、草酸鈉、枸櫞酸鈉、EDTA-K2
或EDTA-Na2、肝素、氟化物等。根據(jù)不同的檢驗項目,選用合適的抗凝劑十分重要。
1.選擇抗凝劑注意事項:
(1) 含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測定K+、Na+的標本。
(2) EDTA、氟化物、草酸鹽等不能用于測定Ca2+的標本,因為Ca2+可與它們形成不溶性
物質(zhì)。
(3) 草酸鹽、氟化物不能用于測定酶和用酶法測定的標本,因為它們有激活或抑制某些酶
活性的作用,如草酸鹽可抑制AMY、ACP、LDH 的活性,氟化物則有激活尿素酶、AMY 的作
用。
(4) 草酸鉀:鈣離子螯合劑,常用量為1~2mg/ml 血液。草酸鉀雖仍可應用,但使紅細胞
縮小,水分從紅細胞滲入血漿,使血漿成分濃度相應偏低。
(5) 草酸鉀氟化鈉混合抗凝劑:葡萄糖測定用,氟化鈉1g,草酸鉀3g 混合,混合劑
4mg 抗凝1ml 血。
肝素:是一種粘多糖體,可抑制凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶,使纖維蛋白原不能轉(zhuǎn)化為纖維蛋
白。以15±2.5IU 抗凝血液1ml。肝素抗凝血不影響紅細胞體積,可用于生化及血液學檢驗標本,
但不可用于篩選DIC 的3P 和TT 試驗,因肝素與魚精蛋白作用,發(fā)生沉淀,使3P 出現(xiàn)假陽性
以及肝素的抗凝血酶作用出現(xiàn)產(chǎn)生干擾。
(7) EDTA:與鈣離子絡合而抗凝,通常血液學常規(guī)檢驗應用其鉀鹽EDTA-K2 或EDTA-K3 。
EDTA-Li2 亦可作為抗凝劑,且可用于大多數(shù)生化檢驗。
使用抗凝劑要注意血與抗凝劑的比,如血沉取106mmol/L 的枸櫞酸鈉0.4ml,抽1.6ml 血;
凝血機制取0.2ml,抽1.8ml 血;血常規(guī)用EDTA 抗凝管抽1.5ml 血;血生化用肝素抗凝管抽3ml
血等。
2.標本采集注意事項:
(1) 末梢采血時,務必清潔消毒,待干燥后穿刺,用1 次性采血器。嬰兒可取自腳后跟兩
側(cè)處,一般不取手指,采血中不可用力擠壓,以免組織液混入血液,使血液易于凝固和稀釋,
出現(xiàn)誤差。
(2) 采靜脈血時止血帶結(jié)扎過久,可引起誤差。如以結(jié)扎1min 的樣品結(jié)果為基數(shù),則結(jié)扎
3min,可使血漿總蛋白增加5%,膽固醇增加5%,鐵增加6%,膽紅素增加8%,乳酸則不能
使用止血帶。
(3) 血清標本應避免溶血,并及時分離血清,如需隔日檢驗,應封口后冰箱儲存。
(4) 采血用針頭過細會使血K+升高。
(5) 要特別注意采血不能在輸液的同側(cè)進行,更應杜絕在輸液管內(nèi)采血,因輸液成分會影
響檢測結(jié)果(使相應的結(jié)果偏高,如輸K+、Glu 時,可使所測K+、Glu 明顯增高),或使血液稀
釋結(jié)果偏低。
血氣和pH 值測定的血液以動脈血為原則,且不可漏氣。細胞培養(yǎng)的樣品要采用無菌技術(shù),
防止污染。
(7) 標本采集后,必須在試管或容器上帖上檢驗申請單號碼、住院樣本應有床號、姓名,
且應當場核對無誤。
(二) 尿液標本
根據(jù)采集時間可分為清晨空腹尿、隨機尿、計時尿(2h、3h、12h、24h 等)、午后尿、餐后
尿、癥狀典型時尿等。
(1) 晨尿為住院樣本留尿的主要方法,早晨起床后收集*次尿,可用尿常規(guī)檢驗。
(2) 隨機尿多為門診就診樣本的留尿檢驗方法。
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(3) 餐后尿為收集進餐后2h 尿,主要用于了解葡萄糖代謝情況,用以篩查隱性糖尿病或輕
癥糖尿病。
(4) 計時尿應于計時開始時排空尿液,然后于規(guī)定時間內(nèi)至截止時間留尿,計時尿多用于
腎功能和有形成分排出率的評估,亦用于計算淀粉酶或肌酐的排出率。
(5) 24h 尿多用于化學組分的測定,亦用于泌尿道抗酸桿菌的檢查。
尿液原則上以不用防腐劑為好,如需12h 或24h 尿,以冷藏為妥,根據(jù)不同的檢驗目的加
用合適的防腐劑,例如加40%甲醛1 滴于尿液30ml 中,適用于細胞及管型等有形成分的檢查;
激素檢驗常以鹽酸10ml 作為24h 尿的防腐劑或硼酸1g 加于尿液100ml,麝香草酚0.1g 加于尿
100ml 供抗酸桿菌濃集檢查。
(三) 糞便標本
采集后及時送檢,如作原蟲阿米巴檢查應保持一定的溫度,且立即送檢,立即檢查,如檢
查蟯蟲則不必送檢糞樣,而應于晨起時排便前用棉拭擦肛門周圍,可得蟲卵。糞便標本應不污
染容器外表,一般以無濾漏容器留取5~10g 即可。
(四) 腦脊液、漿膜腔液、關(guān)節(jié)液
均由研究醫(yī)師穿刺采樣,檢驗科應提供的各種試管或容器,及時送送檢。
(五) 骨髓
采樣由研究醫(yī)師穿刺,抽吸量不得超過0.2ml,涂片送檢。
(六) 胃及十二指腸液
一般均在門診或病房采集后送檢,收樣時應核對標本。胃液分基礎胃酸分泌(ABO)、zui大
胃酸分泌(MAO)等,十二指腸液分甲、乙、丙、丁管。甲管來自總膽管為橙黃色,乙管來自膽
囊為黃綠色,丙管來自膽道為檸檬色,丁管來自十二指腸液為灰黃或淡黃色,細菌培養(yǎng)應從乙
管取樣接種培養(yǎng)基。
(七) 痰液標本
采集晨間*口痰,多用于細胞學及微生物學檢查。采樣前應先反復漱口,經(jīng)深呼吸數(shù)次
后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培養(yǎng)取樣應在抗生素等藥物治療開始之前,如已用藥,則
應選血液藥物濃度zui低水平時采樣。
(八) 陰道分泌物
由婦產(chǎn)科醫(yī)師采樣后即時送檢,如不能及時送檢,可在37℃加溫數(shù)分鐘后檢查,否則影響
滴蟲動力,易于漏檢。
(九) 精液和前列腺液
采集精液應在禁欲3~5 天后進行,且于排精后30min 內(nèi)保溫送達檢驗科,容器以廣口玻璃
小好,不可貯存于避孕套或塑料瓶內(nèi),收到標本后應及時檢查。前列腺液由醫(yī)師作前列腺按摩
術(shù)取樣,收到標本后亦應立即檢查。
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