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Carnoy固定液 提供優(yōu)惠高品質(zhì)試劑
產(chǎn)品名稱： Carnoy固定液
規(guī)格：100ml
用途：又稱卡諾氏固定液,由乙醇、乙酸等組成。RNADNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性標(biāo)本,可以用于細(xì)胞學(xué)固定。
注意事項(xiàng)：
儲存條件：室溫,避光,12個月
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載體和目的基因的切斷(切):通常采用限制性核酸內(nèi)切酶(restriction endonuclease),簡稱限制酶,分別對載體DNA和目的基因進(jìn)行切斷,以便于重組。能夠識別特定的堿基順序并在特定的位點(diǎn)降解核酸的核酸內(nèi)切酶稱為限制酶。限制酶所識別的順序往往為4-8個堿基對,且有回文結(jié)構(gòu)。由限制酶切斷后的末端可形成平端、3'-突出粘性末端和5'-突出粘性末端三種情況。形成粘性末端(cohesive end)者較有利于載體DNA和目的基因的重組。
載體和目的基因的重組(接):即將帶有切口的載體與所獲得的目的基因連接起來,得到重新組合后的DNA分子。
⑴粘性末端連接法:載體與目的基因通過粘性末端進(jìn)行互補(bǔ)粘合,再加入DNA連接酶,即可封閉其缺口,得到重組體。
⑵人工接尾法:即同聚物加尾連接法。在末端核苷酸轉(zhuǎn)移酶的催化下,將脫氧核糖核苷酸添加于載體或目的基因的3'-端,如載體上添加一段polyG,則可在目的基因上添加一段polyC,通過堿基互補(bǔ)進(jìn)行粘合后,再由DNA連接酶連接。
⑶人工接頭連接法:將人工連接器(即一段含有多種限制酶切點(diǎn)的DNA片段)連接到載體和目的基因上,即有可能使用同一種限制酶對載體和目的基因進(jìn)行切斷,得到可以互補(bǔ)的粘性末端。
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